内源性HMGB1调节低氧乏养胰腺癌细胞脂肪酸代谢及其机制

目的 研究内源性高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在低氧乏养胰腺癌细胞脂肪酸代谢重编程及线粒体融合/分裂中的作用及机制。方法 GEPIA数据库分析胰腺癌组织中HMGB1表达水平与胰腺癌患者生存率的相关性;CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别检测内源性HMGB1对低氧乏养Patu8988细胞增殖、侵袭及迁移的作用;激光共聚焦显微镜观察Patu8988细胞线粒体形态的改变;蛋白质免疫印迹法检测细胞线粒体融合/分裂相关蛋白、脂肪酸从头合成相关蛋白表达水平的影响。结果 GEPIA数据库分析结果表明HMGB1在胰腺癌中高表达（P<0.01）,且表达水平与胰腺癌患者生存时间呈负相关（P=0.00097）;干扰低氧乏养Patu8988细胞的HMGB1后,细胞增殖、侵袭及迁移能力降低,Patu8988细胞线粒体形态分裂增加,线粒体分裂相关蛋白FIS1表达增加,p-DRP1（Ser637）表达降低,融合相关蛋白MFN1和MFN2表达降低;ACLY、p-ACLY和FASN蛋白表达水平均下降。结论 内源性HMGB1可以促进低氧乏养胰腺癌Patu8988细胞线粒体的融合,抑制分裂,维持线粒体的形态和功能,从而上调ACLY蛋白的表达及磷酸化水平,促进Patu8988细胞的脂肪酸（FA）合成,维持胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力。     

炎症因子在脊髓损伤SD大鼠脑脊液和血液中表达的比较研究

目的探讨脊髓损伤后脑脊液和外周血中TNF-α、IL-6和IL-10的表达水平及其动态变化。方法采用成年SD大鼠重击法脊髓损伤模型,用ELISA方法测定脊髓损伤急性期内炎症因子在脑脊液和血液中相对含量和动态变化;同时用免疫组织化学方法,观察炎症因子在脊髓神经细胞和胶质细胞表达情况。结果ELISA测定结果显示炎症因子TNF-α、IL-6和IL-10在脊髓损伤大鼠脑脊液内有较强表达,而在血液中表达很低。免疫组织化学染色显示脊髓组织中神经细胞和神经胶质细胞大量表达炎症因子。结论脊髓损伤的急性期内,神经细胞和神经胶质细胞是脊髓损伤急性期内炎症因子的主要来源,神经细胞和胶质细胞直接参与了损伤局部组织的固有免疫反应。     

CXCL12-CXCR4轴促进胶质母细胞瘤前神经间质转化

［摘要］目的: 探讨CXC趋化因子配体12-CXC趋化因子受体4(CXC chemokine ligand 12 CXC chemokine receptor 4,CXCL12-CXCR4)轴对脑胶质母细胞瘤前神经间质转化的作用。方法: 分析TCGA GBM基因数据库中CXCR4 mRNA在不同胶质瘤分子分型肿瘤组织中的水平差异及其对肿瘤患者生存率的影响;人胶质瘤LN428、U87MG细胞经不同浓度CXCL12 (0、20、40、60、80、100 ng/mL)及20 μmol/L普乐沙福(选择性CXCR4拮抗剂)预处理48 h,免疫印迹实验检测细胞内OLIG2、E-钙黏蛋白、YKL-40、N钙-黏蛋白和波形蛋白表达水平;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,CCK8法和克隆形成实验检测肿瘤细胞增殖能力。结果： TCGA GBM数据库分析结果显示,与健康者相比,胶质瘤患者CXCR4 mRNA表达显著增高,且与患者生存率呈负相关;间质型胶质母细胞瘤组织标本中CXCR4 mRNA水平显著高于前神经型胶质母细胞瘤(P均＜0.05)。与对照组相比,CXCL12组细胞间质型相关蛋白YKL-40、N-钙黏蛋白、波形蛋白表达水平显著升高,而前神经型相关蛋白OLIG2、E-钙黏蛋白表达水平显著降低,人胶质瘤LN428、U87MG细胞迁移和侵袭能力、增殖能力显著增强(P均＜0.05);给予普乐沙福处理后,与CXCL12组相比,人胶质瘤LN428、U87MG细胞迁移和侵袭能力、增殖能力显著降低,且间质型相关指标蛋白表达显著降低,前神经型相关指标蛋白表达显著升高(P均＜0.05)。结论： CXCL12-CXCR4轴具有促进胶质母细胞瘤前神经间质转化,及迁移和侵袭、增殖的作用。     

马凡综合征并发主动脉夹层动脉瘤误诊一例报告

马凡综合征是一较少见的遗传性疾病,常伴有先天性心脏血管畸形,且多有家族史。在并发主动脉夹层动脉瘤(DAA)时,发病急,表现复杂,易造成误诊,现将1例报告如下。 患者,男,38岁,农民。于1988年2月7日晨因用力后突发上腹及背部疼痛6小时入院。疼痛为持     

不同培养代数大鼠骨髓基质细胞向神经元样细胞转分化能力的比较

为确定诱导大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)向神经元样细胞转分化的适宜培养代数,本研究比较了不同培养代数的BMSCs的转分化潜能。首先体外培养大鼠BMSCs并传代,于不同的培养代数利用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、神经生长因子(NGF)、全反式维甲酸(RA)、音猬因子(Shh)诱导分化,随后运用免疫荧光法和免疫印迹法检测诱导细胞中的神经元样细胞。结果显示骨髓基质细胞体外培养1至3代时能够被诱导分化为神经元样细胞,培养至第7代时丧失转分化为神经元样细胞的潜能。上述结果提示:传代次数增多将引起BMSCs自发分化,使其向神经元样细胞转分化的能力下降,因而BMSCs培养至第3代时适宜进行诱导分化。     

腺病毒介导的IL-24基因抑制人脑胶质瘤细胞增殖的机制研究

目的:探讨IL-24抑制人脑胶质瘤细胞增殖的可能机制.方法:用腺病毒介导的IL-24(Ad.IL-24)及腺病毒空载体感染人脑胶质瘤细胞U251,通过荧光显微镜观察腺病毒的感染效率,RT-PCR法检测IL-24的转录水平;用MTT法、流式细胞仪检测IL-24对U251细胞增殖的影响;用蛋白质印迹方法检测神经生长因子(NGF)、酪氨酸激酶受体A(tyrosine kinase A, TrkA)的表达水平,并分析其相关性.结果:Ad.IL-24及腺病毒空载体转染U251后,RT-PCR结果显示Ad.IL-24组出现高表达电泳条带,而腺病毒空载体组则未出现电泳条带;MTT结果显示Ad.IL-24明显抑制了U251细胞的增殖,且流式细胞仪细胞周期检测发现Ad.IL-24处理组较对照组G2/M期明显延长,蛋白质印迹结果显示过表达IL-24的U251细胞中NGF及TrkA表达降低.结论:IL-24可能通过减少细胞中TrkA和NGF的表达来抑制肿瘤细胞的增殖.     

脑脊髓损伤大鼠局部Th1/Th2细胞相关因子的表达及意义

目的 分析大鼠急性脑脊髓性损伤后脑脊髓中Th1和Th2细胞相关因子的表达水平,探讨其在持续性二次损伤中可能的作用.方法 制备SD大鼠急性脑脊髓性损伤模型,随机分为损伤组和脂多糖(LPS)处理组,各组又分别对脑和脊髓进行实验处理.用荧光定量PCR分别检测不同组别大鼠脑脊髓中Th1和Th2细胞相关因子,并进行相关性分析.结果 与对照组相比,损伤和LPS处理的脑组织Th1细胞相关的细胞因子IFN-γ表达明显增高(P＜0.05),而T-bet的表达并无明显改变;在损伤和LPS处理的脊髓中,IFN-γ和转录因子T-bet、HLX的表达均显著升高(P＜0.05).无论是脊髓损伤组还是LPS处理组,细胞因子IL-4和转录因子GATA3均与对照组无异,呈低表达状态.结论 脑脊髓损伤后呈现不同程度的Th1细胞相关因子上调,尤以可溶性的细胞因子IFN-γ为显著,脊髓损伤时出现T-bet与HLX表达上调.     

放射性核素^125I与神经生长因子的偶联及条件优化

目的: 探讨放射性核素125I与神经生长因子(nerve growth factor,NGF)偶联的最优反应条件.方法: 采用联结标记法进行125I与神经生长因子偶联反应,在125I投料量固定为37 MBq的条件下,改变NGF的投料量分别为20,50,100,150 μg,同样的条件下反应后以三氯醋酸沉淀法计算产率.将产物保存于4℃,于1,2,3,5,7天,2,3,4周时间点检测产物的放射性化学纯度,评价产物的体外稳定性.结果: 当NGF投料量由20 μg增加到50 μg时,125I-NGF产率由76.6%迅速增加到79.0%,当继续增加NGF投料量至150 μg时,125I-NGF产率仅增加1.2%.经过连续4周观测,本标记方法的产物125I-NGF在体外4℃储存条件下未发现明显脱碘,放射化学纯度始终大于80%.结论: 125I与神经生长因子偶联的理想原料配比为37 MBq 125I与50 μg NGF进行反应,该条件下的产物125I-NGF放射性浓度为97.31 MBq/ml,放射性比活度为584.6 MBq/mg.