禽流感H5N1亚型病毒感染BALB/c小鼠的免疫应答

目的 研究禽流感H5N1病毒感染BALB/c小鼠后对宿主细胞免疫功能和细胞因子水平变化的影响,探讨禽流感H5N1病毒感染哺乳动物的免疫发病机制.方法 选用鹅源禽流感H5N1病毒感染BALB/c小鼠,采用流式细胞仪检测血液和脾脏T淋巴细胞及其亚群的变化,采用ELISA检测血液中细胞岗子(IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-18、IL-10、IL-2)及禽流感H5N1病毒特异性抗体的变化.结果 禽流感H5N1病毒感染可引起对宿主短暂的、可恢复的细胞免疫功能损伤:血液CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞数量于染毒后第2～4天下降(第4天为最低值),脾脏T淋巴细胞数最于染毒后第5～8天下降(第6天为最低值),然后均逐渐恢复到正常水平.染毒后血液细胞因子变化表现为:血清IFN-γ、TNF-α水平下降,IL-4、IL-18、IL-10水平上升,IL-2水平无明显变化.从感染第7天开始检测H5N1禽流感特异性抗体为阳性,抗体水平逐渐升高至实验结束的感染第14天.结论 H5N1禽流感病毒感染可引起宿主T细胞免疫功能低下是其主要的免疫病理改变之一,细胞因子表达失平衡或过多的表达都可能对宿主产生免疫病理损伤.

Abstract：

Objective To study the cell immunity and eytokines responses to avian influenza A H5N1 virus infections in a BALB/c model to better understand the pathogenesis of H5N1 avian influenza disease. Methods Two hundred and twenty BALB/c mice of the infected group were inoculated with 0.1 ml (10-4.875 TCID50) of A/Goose/Guangdong/NH/2003 ( H5N1 ) virus intra-nasally. Fifty control mice received noninfectious allantoic fluid and another fifty control mice received normal sodium. Blood and spleen samples were collected from the live mice every 24 h during the 14 d post-infection. The changes of CD3 + T cells , CD4 + T cells, CD8 + T cells for cell immunity in blood circulation and spleen were detected by flow cytometry. And the cytokines and antibody responses in blood circulation were detected by ELISA. Necropsy was performed on mice that died during the experiment and those euthanized at end of study. Results Avian influenza A( H5N1) virus infections can make damages to the cell immune system transiently. The CD3 + T cells, CD4 + T cells, CDS + T cells declined at 24 days post infection in blood circulation and declined at 5-8 days in spleen, then recovered to the normal level gradually. The eytokines responses to the infections can be detected: the level of IFN-γ,TNF-α declined, IL-4, IL-18, IL-10 increased, and IL-2 changed little. The antibody increased rapidly from day 7 post infection until the end of the study (day 14 post infection). Conclusion Collectively, avian influenza A(H5N1) virus can cause cell immunity deficiency and an imbalance in the level of eytokines, which may contribute to the unusual severity of disease caused by the H5N1 avian influenza virus.     

系统性念珠菌感染小鼠模型的制备

目的 建立稳定的系统性念珠菌感染小鼠模型,规范其操作方法。方法 采用环磷酰胺对小鼠进行免疫抑制后,选择白色念珠菌（C.albicans）和非白念珠菌（C.parapsilosis）分别接种ICR小鼠,从免疫抑制、菌株制备、接种剂量和接种途径等方面对建模过程进行质量控制,通过生存分析、组织载菌量和病理学检查对模型进行评价。结果 我们建立的系统性念珠菌感染小鼠模型显示肾脏为靶器官,多器官弥散性真菌感染的典型病理组织学改变。结论 通过对建模过程各环节进行规范,可得到稳定的系统性念珠菌感染小鼠模型,该模型可应用于系统性念珠菌感染的致病机理,免疫防御及抗真菌药物筛选等研究领域。     

用ASP实现实验动物信息网的功能改进与扩增

应用ＡＳＰ（Ａｃｔｉｖｅ Ｓｒｅｖｅｒ Ｐａｇｅｓ）技术对实验动物信息网站－“广东省实验动物信息网”网站的主要功能进行改进，取代原有的ＩＤＣ／ＨＴＸ动态页设计的模式，实现该网的技术更新。建立了更快捷、实用、兼容和扩展性强大的网站，同时为该网的进一步发展和完善奠定了基础。本文以实例讲解了技术改进的过程，还列出了设计实现的思路和核心代码。     

尿黑酸病致腰椎管狭窄症一例

患者男,40岁。1987年1月5日住院。自幼发现尿床后留尿印呈黑色,不易洗掉。1978年患者怀疑患“糖尿病”,在某医院化验发现尿色变黑,诊断为“尿黑酸病”,因无其它症状,未治疗。1980年开始反复腰及右下肢疼痛,严重时起步艰难,蹲下可缓解。住院前症状逐渐加重,身高渐矮,由原164cm 降至159cm。既往体健,已婚,生一女,体健。家族中无类似发病。查体:发育正常,自动体位。头颅无畸形,瞳孔等大等圆,对光反射正常,巩膜有不规则褐色斑,鼻尖及耳廓有浅蓝色斑。胸、腹(-)。骨科情况:     

P-选择素在基因敲除小鼠肺转移中的作用研究

目的探讨P-选择素对小鼠黑色素瘤肺转移的影响。方法将体外培养的B16黑色素细胞株通过小鼠的尾静脉注射到小鼠背景为C57／BL（C57）的P-选择素敲除的小鼠和C57小鼠的体内。建立转移瘤瘤模型,第21天断颈处死小鼠,计数转移到肺表面的结节的数目,HE染色进一步确定转移结节。结果P-选择素敲除小鼠肺表面转移的肿瘤结节的数目明显比C57小鼠少,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。HE染色证实小鼠肺组织中有B16细胞的肺转移灶。结论P-选择素缺失可能参与抑制了黑色素瘤的肺转移。     

恒河猴大脑注射Aβ1-42 和Thiorphan对胆碱能神经元影响的研究

目的 观察颅内灌注Aβ1-42和Thiorphan给药后恒河猴基底、核大脑皮质等部位胆碱能神经元的改变.方法 将恒河猴4只,分为对照组(1只)与实验组(3只),对照组开颅后只注射0.9%氯化钠溶液,实验组开颅后先注射Thiorphan到猕猴的基底核和大脑皮质消耗已存在的Neprilysin,然后再缓慢的注射孵育好的纤丝状Aβ1-42,再植入含有Thiorphan的微渗透泵到基底核.免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变.结果 给药后实验组恒河猴基底核、皮质等部位的胆碱能神经元数量减少和ChAT水平降低.结论 Aβ1-42和Thiorphan联合颅内给药后损害大脑基底核、皮质等部位的胆碱能神经元.     

BMPs 在中枢神经系统发育和神经保护中的作用

骨形态发生蛋白（Bone morphogenetic proteins,BMPs）是转化生长因子-β（transforming growth factor -β）超家族的成员,现已经发现 BMPs 很多亚型 BMP 分子在神经系统的不同区域呈持续性表达,但是表达在空间和时间具有差异性,提示不同亚型 BMPs 的功能在神经系统也存在差异。本文主要就 BMPs 在中枢神经系统发育中的作用和神经保护功能作一综述。     

广东省实验动物许可证管理工作的现状及对策

本文阐述了广东省实验动物许可证管理的现状、取得成效、问题和对策。实验动物许可证实施10年来取得了较好成效:从单纯对实验动物质量和设施的合格证管理过渡到对实验动物质量、设施、人员队伍建设和管理软件建设等影响实验结果的4个要素的全面管理,再加上在我省实施统一试题库现场抽题考试和5个评审专家根据细化的评分标准独立打分,充分保证评审的公正性;成功推动了《广东省实验动物管理条例》的立法,使许可证制度的执行有了法律依据;广东省实验动物许可证发放逐年增加,行业和地区分布广泛,获证单位的实验动物生产和使用量不断增加。分析存在的5个方面的问题,提出相应对策,更好推动广东省实验动物的发展。     

水基钻井液对诸氏鲻虾虎鱼抗氧化酶的影响

目的 研究我国南海区某海洋钻井水基钻井液对诸氏鲻虾虎鱼抗氧化酶的影响。方法 在19.75～158 mg/L浓度下,对3月龄诸氏鲻虾虎鱼染毒,并用试剂盒法测定超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活性。结果 SOD对水基钻井液的毒性暴露不太敏感,在染毒第1天只有最低浓度组受到一定程度的抑制,染毒第2 天各浓度组酶活性均受到一定程度的诱导（12.4%～25.5%）,这种诱导作用在第4天即有所减弱,之后酶活性的变化变缓。CAT则对水基钻井液表现出较强的敏感性。染毒第1 天,各组酶活性均受到明显的诱导,并且各组酶活性表现出明显的浓度效应关系。最高浓度组酶活性最大诱导率达到97%（P >0.05）。随后虾虎鱼CAT酶活性逐渐下降,第7 天,各染毒组酶活性的抑制率达到58.4%～89.1%。结论 CAT在中毒反应中表现出了敏感性,具备了作为生物标志物的重要条件,有望在今后的实际应用中发挥作用。     

贝类毒素监测的动物试验优化及替代方法

贝类毒素严重威胁水产品的质量,而且给人类健康带来潜在危害。由于其结构多样、作用机制复杂,贝类毒素监控计划通常使用动物方法,不仅成本高、定量难,而且不符合"3R"的要求。运用减轻动物痛苦和减少数量的优化方法,开发新的基于毒性作用机制和结构分析的细胞功能检测法、免疫学方法、化学分析法和生物传感器方法,这些动物试验替代方法的研究提高了贝类毒素监测的有效性,经过科学验证和认可后可用于监控目的 。