医学研究生自主性减弱的表现及对策

医学研究生的培养是高素质综合型医学人才培养的重点,近年来研究生出现自主性减弱问题,主要表现为获取学科前沿进展的主动性不强,科研课题依赖导师项目,科学研究过程独立性欠缺以及拖延行为。本文针对这些问题提出相应的解决策略,如强调研究生带教,开展研讨会,鼓励研究生创新课题设计,夯实理论基础与实验技术,设定计划解决拖延等。     

GPC3与肝癌细胞增殖的相关性

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织内及体外细胞培养中磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3,GPC3)与细胞增殖的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测54例HCC组织中GPC3的表达,并对比其与Ki-67标记指数及各种临床病理参数的关系.使用shRNA抑制SMMC7721肝癌细胞系中GPC3的表达,MTT检测肝癌细胞的增殖变化.结果:在HCC组织中,GPC3与Ki-67指数有关(r=0.521,P=0.000),也与分化程度、血管浸润情况具有相关性(r=0.287,0.289;P=0.035,0.034).体外实验结果显示,抑制GPC3表达后,实验组细胞增殖活性明显低于阴性对照组和空白对照组(F=45.38,P=0.000).结论:GPC3在HCC的发生、发展和浸润过程中起重要作用,主要与影响肝癌细胞增殖有关.     

阿法替尼联合Mithramycin A对人肝癌 HepG2细胞增殖､凋亡及基因表达的影响

目的:观察阿法替尼(afatinib)联合Mithramycin A(MIT)对人肝癌 HepG2 细胞增殖?凋亡的作用以及相关因子表达的影响?方法:将afatinib与MIT单独或联合作用于肝癌HepG2细胞,采用MTT法测定药物对细胞生长的抑制率,并运用倒置显微镜观察药物作用后细胞形态学变化;以流式细胞技术测定药物对细胞周期和凋亡的影响;以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR) 定量测定细胞内表皮生长因子受体(EGFR)?Sp1?Sp3以及增殖?凋亡相关因子 Cyclin-D1?Cyclin-E2?Bcl-2?Caspase3?Caspase9和p53的表达变化?结果:afatinib与MIT均能有效抑制肝癌HepG2 细胞的生长,并且呈现时间依赖性,两药联合作用能明显增加抑制率(P均 < 0.05);联合用药48 h后,可诱导HepG2细胞产生G0/G1期阻滞并诱发凋亡,抑制作用及凋亡率均较单药组增高(P均 < 0.05);另外,给药72 h后,单药组均出现不同程度的Cyclin-D1?Cyclin-E2?Bcl-2 mRNA 表达量下降,并伴有Caspase3基因上调?单用afatinib组同时出现Caspase9和p53的表达上调,MIT组检测到EGFR?Sp1和Sp3的同步减少,联合用药组以上改变较单药组明显(P均 < 0.05)?结论:afatinib联合MIT能有效抑制肝癌 HepG2 细胞增殖?促进凋亡,这可能与药物作用后Cyclin-D1?Cyclin-E2?Bcl-2下调以及Caspase3?Caspase9和p53的表达上调相关?此项研究可能为以EGFR为中心的肝癌联合治疗提供新方向?     

Sp3对β-catenin基因转录调控作用初探

 目的:观察转录因子Sp3对β-catenin启动子转录活性的影响,探讨Sp3与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法:采用脂质体法将Sp1和(或)Sp3转录因子表达质粒单独/共同与β-catenin启动子（-410/-1 bp）报告基因质粒瞬时转染HEK293T细胞;通过双萤光素酶报告基因实验检测报告基因转录活性的变化。结果:（1）Sp1表达质粒在0.4 μg剂量时能提高启动子的活性2.4倍,Sp3表达质粒在0.4 μg剂量时能显著提高启动子的活性5.3倍。（2）0.4 μg总量的Sp1与Sp3表达质粒共转染293T细胞,随着Sp3/Sp1比例的递增,β-catenin启动子转录活性无明显变化。（3）共同转染Sp1 0.3 μg与Sp3 0.1 μg时,启动子活性提高3.5倍,比单独转染的转录活性强。结论: Sp3能促进β-catenin基因启动子（-410/-1 bp）的转录,Sp1的转录激活作用则较弱;在转录过程中Sp1和Sp3可能存在协同作用;Sp3可能在转录水平调控β-catenin的表达从而影响Wnt/β-catenin信号通路。