“无管化”经皮肾镜碎石术与常规经皮肾镜手术的疗效比较

目的：探讨“无管化”经皮肾镜碎石术与常规经皮肾镜手术的临床疗效。方法选取经皮肾镜手术患者100例,将其随机分为对照组和观察组,每组50例。其中对照组患者采用常规经皮肾镜手术,观察组患者采取“无管化”经皮肾镜手术。结果观察组患者平均手术时间、术后疼痛评分、漏尿时间以及住院时间分别为(48.27±8.36)min、(2.25±0.74)分、(5.85±1.63)h和(4.86±1.78)d,均显著优于对照组患者（P<0.05）;观察组输血发生率和并发症发生率分别为4.00%和2.00%,均显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论“无管化”经皮肾镜碎石术疗效更优于常规经皮肾镜手术,不仅可减轻患者疼痛、加快恢复速度,而且可有效降低并发症发生率。     

RT-SHIV rt基因单拷贝PCR扩增方法的建立及初步应用

目的建立RT-SHIV病毒全长rt基因单拷贝PCR扩增方法,用于HIV-1 rt基因体内遗传与变异研究。方法 Oligo软件设计RT-SHIV rt基因特异性扩增引物,梯度稀释方法进行特异性和灵敏度筛选,进而优化退火温度和PCR反应最佳循环数等条件,建立rt基因PCR扩增方法;在此基础上将模板进行有限稀释,摸索rt基因单拷贝PCR扩增条件;使用该方法扩增感染猴体内RT-SHIV病毒rt基因,BioEdit软件进行基因序列分析。结果筛选得到一组巢式PCR引物,成功建立了RT-SHIV rt基因PCR扩增方法;当模板浓度为100 copies/μL时,扩增产物为单拷贝序列;测序结果显示RT-SHIV感染猴d266和d294血浆样本分别存在1处和6处氨基酸突变。结论本研究建立的全长rt基因单拷贝PCR扩增方法特异性好、灵敏度高、重复性强,可以应用于各类RT-SHIV病毒的全长rt基因分析。     

白细胞介素21对SHIV感染的恒河猴外周血CD8+ T细胞分泌γ干扰素的影响

目的 研究白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)对SHIV感染CD8+T细胞分泌干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的影响.方法 从SHIV/恒河猴模型外周血中分选出CD8+T细胞,加入IL-21诱导培养,应用ELISA方法检测细胞培养上清液中IFN-γ浓度,RT-PCR方法检测细胞中IFN-γ mRNA的表达水平,流式细胞术检测分泌IFN-γ的CD8+T细胞所占的百分比.结果 10 ng/mL,IL-21明显促进CD8+T细胞分泌IFN-γ(P＜0.05),IFN-γ mRNA的表达明显升高,4h为刺激CD8+T细胞胞内IFN-γ合成的最佳时间.结论IL-21对CD8+T细胞分泌IFN-γ有促进作用.     

SIVmac239病毒经不同途径感染恒河猴急性期CD4+T细胞数量与其细胞表面CD95表达量的变化关系

目的研究SIVmac239病毒分别通过直肠(rectal infection:IR)及静脉(intravenous infection:IV)感染恒河猴,在感染急性期外周血CD4+T细胞数量与其细胞表面的死亡受体(CD95)表达量之间的变化关系。方法将SIVmac239经直肠及静脉途径各感染14只恒河猴。监测病毒载量、CD4+T淋巴细胞数量及CD4+/CD8+比值的变化,从而明确感染。同时,在感染急性期内9个时间点采集静脉血,并利用流式细胞术分析CD4+T细胞表面CD95的表达量。结果静脉组恒河猴CD95表达量于第2天开始升高,第7天达到最高,同时CD4+T淋巴细胞数降到最低。直肠组恒河猴也于感染后第2天开始升高,但第10天才达到最高值,CD4+T淋巴细胞数于第17天降到最低。同静脉组相比,直肠组CD95表达量增高及CD4+T细胞数降低均较晚出现,且其CD4+T细胞数量降至最低晚于CD95表达量达到峰值一周后出现。结论 SIVmac239经直肠及静脉感染恒河猴后,伴随CD4+T细胞表面CD95表达的升高,CD4+T细胞数量逐渐下降。但不同感染途径对CD4+T细胞表面CD95的表达量与CD4+T淋巴细胞数的变化不尽相同,这可能由于不同感染途径造成CD95在感染急性期CD4+T细胞数量降低中发挥的作用不同。     

IL-21对恒河猴SHIV特异性CD8+T细胞毒性效应的影响

目的探讨白细胞介素21(interleukin 21, IL-21)对SHIV特异性CD8⁺ T细胞毒性效应的影响。方法定时采集16只SHIV感染恒河猴的外周血,应用实时荧光定量RT-PCR测定病毒载量,流式细胞仪测定CD8⁺ T细胞绝对数,并且体外检测经IL-21刺激SHIV特异性CD8⁺ T细胞后其IL-21R、CD107a及胞内穿孔素(perforin)的表达水平。结果体内实验结果表明外周血病毒载量和CD8⁺ T细胞绝对数之间呈一定程度的负相关。体外实验结果表明SHIV特异性CD8⁺ T细胞经IL-21刺激后其细胞表面表达的IL-21R显著上调,而且perforin⁺ CD8⁺T细胞和CD107a⁺ CD8⁺T细胞的百分比上升,同未经刺激的对照组相比具有统计学差异。结论IL-21能够促进SHIV特异性CD8⁺T细胞的毒性效应。     

自身免疫性疾病中miRNAs对免疫耐受的调节作用

自身免疫性疾病的发生、发展与正常的免疫耐受受损密切相关。miRNAs作为一类细胞生命活动中重要的潜在负调节子,参与调节了多种免疫过程,也包括对中枢免疫耐受和周围免疫耐受的调控。研究证实,自身免疫性疾病中miRNAs通过多条信号通路,尤其是PI₃K信号通路调节免疫细胞的发育和功能,其调控异常是多种自身免疫性疾病的重要发病机制。本文阐述了miRNAs对中枢免疫耐受、周围免疫耐受以及调节性T细胞(Treg)的调控作用,这为将来自身免疫性疾病的诊断及治疗提供潜在的分子标志物以及新的治疗靶点。     

CD45RO N-糖基化位点对galectin-3结合CD45RO突变体转染细胞的影响

目的 构建CD45RO不同N-糖基化位点突变的T细胞株,并检测其与galectin-3的结合情况.方法 采用N→Q定点突变技术分别去除CD45RO的11个N-糖基化位点,制备单个N-糖基化位点缺失的CD45RO,然后将其导入慢病毒表达载体pWPXL中,11个携带单个N-糖基化位点缺失的CD45RO重组慢病毒质粒与慢病毒包装质粒psPAX2和MD2.G共转染293T细胞,将包装重组慢病毒感染CD45-的J45.01细胞,流式分选后获得11株分别表达CD45RO单个N-糖基化位点缺失的J45.01 T细胞株.通过RT-PCR和流式细胞术分别从RNA水平和蛋白水平验证CD45RO突变体的转录和表达,应用流式细胞术检测CD45RO突变细胞株与galectin-3的结合情况.结果 成功构建了1 1个CD45RO单个N-糖基化位点缺失的T细胞株,各突变细胞株能稳定表达突变基因,经测序再次证实突变位点正确,CD45 RO突变体能稳定表达于细胞表面.galectin-3与N327Q突变细胞的结合明显增强,与N36Q突变细胞和N217Q突变细胞的结合明显减弱.结论 CD45RON-糖基化位点对galectin-3与CD45 RO-J45.01细胞的结合有调节作用.     

复方羊南冲剂临床疗效观察

复方羊角冲剂由羊角、川芎、白芷、制川乌等中药组成。临床治疗结果各类头痛性疾病203例,以每日口服2～3次,每次8g,10d为一个疗程。治疗结果表明:缓解42例,明显好转51例,好转80例,无效30例,总有效率为85％、效果满意。