IL-37对炎症相关性疾病的抑制作用

IL-37属IL-1家族细胞因子,最初发现时被命名为IL-1F7,具有5种不同的亚型(IL37a~e)。研究已证实,IL-37能够抑制多种免疫细胞中促炎性细胞因子的产生,进而调节固有免疫应答;此外,IL-37对外源性刺激诱导的结肠炎、关节炎、胰腺炎等炎症性疾病具有一定的保护作用。总之,IL-37能够在多种炎症相关性疾病中发挥抑制作用,是一种新型的炎症抑制因子。     

全长与成熟形式IL-37b的真核表达载体的构建与研究

目的构建全长与成熟形式IL-37b的真核表达载体p EGFP N1/IL-37b,检测二者在RAW 264.7细胞中的表达情况。方法以含IL-37b全长编码区基因的质粒p UBC/IL-37b为模板,构建能够表达全长与成熟形式IL-37b的真核表达载体。将构建的重组质粒p EGFP N1/IL-37b转染到RAW 264.7细胞中,通过western blot和共聚焦显微镜检测全长与成熟形式的IL-37b的表达情况,并通过real-time PCR检测全长与成熟形式IL-37b对LPS诱导的IL-6表达的抑制作用。结果构建的p EGFP N1/IL-37b转染后能够在细胞中表达全长与成熟形式的IL-37b,并且能够抑制LPS诱导的IL-6的表达。结论成功构建了全长与成熟形式IL-37b的真核表达载体,为进一步研究IL-37b的炎症抑制作用与机制打好基础。     

肝癌人源肿瘤异种移植模型构建及初步应用

目的建立肝癌人源肿瘤异种移植(patient-derived xenografts,PDX)模型,探讨其在肝癌精准医疗中的作用。方法取临床肝癌新鲜手术切除标本,NCG小鼠皮下接种肿瘤组织建立PDX模型,HE染色比较移植肿瘤组织与患者肿瘤组织形态结构的一致性。将成功传至第三代的PDX模型制备肿瘤细胞悬液,BALB/c裸鼠皮下接种制作肝癌移植瘤模型15只,成瘤后随机分为5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组、索拉非尼(sorafenib)组和阴性对照组,每组5只。定期监测各组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量,根据瘤重计算抑瘤率,评估疗效。结果本研究共建成肝癌PDX模型6例,成功率为33.3%(6/18),模型较好的保持了原发肿瘤的特征。1例PDX模型中,5-FU与索拉非尼组肿瘤抑瘤率分别为63.7%和29.6%,5-FU组抑瘤率比较差异有显著性(P0.05),索拉非尼组抑瘤率比较差异无统计学意义,与临床结果相符。结论肝癌PDX模型保持了患者肿瘤组织的组织形态,可以适用于肝癌患者的精准医疗。     

慢病毒介导稳定敲低Smurf1细胞株的构建及对细胞迁移的影响

目的构建慢病毒介导稳定敲低Smurf1的HeLa和A549细胞株并检测敲低Smurf1细胞迁移的影响。方法将包装好的Smurf1敲低慢病毒感染HeLa和A549细胞,7 d后进行嘌呤霉素抗性筛选阳性细胞,Western blot和qPCR检测敲低效果,并进行Transwell检测Smurf1敲低对细胞迁移的影响。结果利用干扰慢病毒系统成功构建稳定敲低Smurf1的HeLa和A549细胞株,稳定敲低Smurf1抑制细胞的迁移速率。结论敲低Smurf1抑制细胞迁移。     

DOX调控HNRNPK稳定下调的H1299细胞株的构建与研究

目的构建DOX调控HNRNPK稳定下调的H1299细胞株,并研究HNRNPK下调对细胞增殖与凋亡的影响。方法用包装好的慢病毒感染H1299细胞,感染72 h后利用嘌呤霉素筛选阳性细胞并扩大培养获得稳转株,通过定量PCR与Western blot检测HNRNPK表达效率,并研究HNRNPK下调对细胞增殖与凋亡的影响。结果成功构建了DOX调控HNRNPK稳定下调的H1299细胞株,HNRNPK的下调抑制了H1299细胞的增殖,但对其凋亡没有明显影响。结论 HNRNPK下调抑制了H1299细胞的增殖。     

神经组织特异表达绿色荧光蛋白转基因小鼠的脑组织形态观察

目的 建立神经组织特异表达绿色荧光蛋白的转基因小鼠,为神经系统的形态学观察提供可以荧光示踪的工具动物.方法 把增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 因插入血小板源性生长因(PDGF)B-链启动子下游构建转基因载体,用显微注射的方法建立转基因C57BL/6J小鼠.PCR鉴定转基因小鼠的基因表型,对阳性转基因小鼠的脑组织进行矢状面冷冻切片,分别进行HE染色,显微镜观察组织结构,荧光体视镜及荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)在神经组织的表达.结果 在8个首建品系中筛选出1个神经组织高表达绿色荧光蛋白的转基因小鼠系.观察到绿色荧光蛋白在大脑皮层、海马、丘脑、小脑及脑干等部位表达.结论 建立了稳定遗传的神经组织特异表达绿色荧光蛋白转基因小鼠品系,为神经系统的生理学及病理学研究提供了可以荧光示踪的模型动物.     

孕妇1012例建卡状况分析

目的 了解孕妇建卡状况,加强围产期保健,促进生殖健康.方法 对建立《孕产妇保健手册》的孕妇1012例逐一询问,填写统一的调查表,对调查表进行分析.结果 在1012例孕妇中,早孕建卡者占26.67%,推迟建卡的原因主要是不知道早孕建卡(占29.43%),以为3个月后建卡(占23.75%),部分医务人员说3个月后建卡(占9.03).先兆流产保胎或早孕反应过重者占建卡的孕妇中有人工流产史的比例较高,占59.52%.结论 围产期保健应重视孕前保健,选择最佳生育年龄,提倡计划妊娠,广泛宣传围产期保健知识,提高早孕建卡率,降低人工流产及剖宫产率,减少高危妊娠的发生,保护妇女生殖健康.     

荧光蛋白在肿瘤分子影像研究中的应用

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是在水母中发现的新型报告分子,该蛋白及其衍生物能在多种生物体内表达并发出荧光,是目前在生物学中研究和开发应用得最广泛的蛋白质之一。尤其是在肿瘤的研究中,荧光蛋白的分子影像可为深入揭示肿瘤发生发展的病理过程的机制,以及对其治疗进行实时、动态、细致、无创、靶向性的探测和跟踪提供有效手段。