黄芪-莪术配伍对结肠癌原位移植瘤小鼠模型抗结肠癌生长转移的干预效应研究

黄芪-莪术药对是临床治疗肿瘤的常用组合,主要用于消化道相关炎症及肿瘤的治疗,临床所用配比也多不固定.为研究该药对在不同配比下抗肿瘤效果是否存在差异,该研究建立结肠癌原位移植瘤小鼠模型,结合主成分分析和聚类分析探讨药对不同配比对结肠癌小鼠肿瘤生长、转移的作用,优选黄芪-莪术抗结肠癌效应最适配比.给药15d后测量肿瘤小鼠除...     

黄芪-莪术配伍对结肠癌原位移植瘤模型小鼠SDF-1/CXCR4/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨黄芪-莪术抑制结肠癌原位移植瘤模型小鼠肿瘤生长的可能作用机制。方法 运用分子对接技术预测黄芪、莪术中主要活性成分与通路靶点蛋白基质细胞衍生因子-1（SDF-1）,趋化因子受体4（CXCR4）,核转录因子-κB p65（NF-κB p65）的分子间相互作用。建立CT26.WT结肠癌原位移植瘤模型进行体内实验验证。将60只BALB/c雄性小鼠随机分为假手术组,模型组,5-氟尿嘧啶（5-Fu）组、黄芪-莪术低、中、高剂量组,每组10只。假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,5-Fu组（30 mg·kg^-1）腹腔注射,黄芪-莪术低、中、高剂量组（0.32,0.64,1.28 g·kg^-1）灌胃。干预15 d后,完整剥离原位瘤,取肿瘤相邻结肠组织5~6 cm。测量并计算肿瘤体积,苏木素-伊红（HE）染色观察肿瘤组织及结肠组织病理学变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织中趋化因子SDF-1及其受体CXCR4,磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65）蛋白表达,Western blot和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织趋化因子SDF-1及其受体CXCR4,NF-κB p65,细胞周期蛋白D₁（Cyclin D₁）,癌基因c-Myc蛋白及mRNA表达水平。结果 与模型组比较,5-Fu与黄芪-莪术治疗均能降低原位瘤体积（P<0.05,P<0.01）,5-Fu组抑瘤率最高（61.38±2.34）%,黄芪-莪术中剂量组抑瘤率（43.43±3.71）%。与模型组比较,各药物组肿瘤与结肠组织的病理学改变转轻。与模型组比较,黄芪-莪术显著下调了肿瘤小鼠结肠组织SDF-1,CXCR4,p-NF-κB p65蛋白表达水平（P<0.01）,对肿瘤组织SDF-1,CXCR4,NF-κB p65,Cyclin D₁,c-Myc的蛋白及mRNA表达明显下调（P<0.05,P<0.01）。结论 黄芪-莪术能够抑制结肠癌原位移植瘤的生长,其干预机制可能与调节SDF-1/CXCR4/NF-κB信号通路中相关蛋白及其mRNA表达有关。     

中药物质基础“组分结构”理论的创新与实践

中药物质基础组分结构理论为中药研究提供了一种符合中医药整体性和系统性特征的新的研究思路和方法。经过多年的摸索和积累,组分结构研究已经取得了一定的丰富发展。该文在归纳总结中药物质基础组分结构发展的基础上,系统阐述了组分结构提出的背景以及在中药质量控制、现代创新中药制剂中的作用和进展。组分结构研究推动了中药药效物质基础研究的变革,为中药现代化发展指明了方向。     

不同尿碘水平的初诊2型糖尿病患者血清代谢组分及肠道菌群生态的差异分析

目的:探讨不同尿碘水平的初诊2型糖尿病(T2DM)患者的血清代谢组分及肠道菌群生态的差异与临床意义。方法:选取149例初诊T2DM患者为研究对象,按照尿碘水平分为碘营养不足组(A组,n=49)、碘营养充足组(B组,n=54)及碘营养过量组(C组,n=46)。对患者血清中脂质、空腹及餐后2 h血糖、C肽及胰岛素水平(FIns)等指标进行检测,同时随机抽取各组部分患者对其肠道菌群及代谢物短链脂肪酸(SCFA)进行检测,并比较其组间差异。分析两组患者肠道SCFA与UIC、HbA1c、FPG及HOMA-IR的相关性。结果:A组患者血糖、血脂与B组患者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。A组及C组患者空腹Fins水平及HOMA-IR高于B组,HOMA-β低于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。B组患者肠道产丁酸菌及肠道来源SCFA中的丁酸水平高于A组或C组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。A组中丁酸浓度与UIC正相关,与HbA1c、FPG、HOMA-IR负相关(P<0.05)。C组中丁酸浓度与UIC负相关,与HbA1c、FPG、HOMA-IR正相关(P&l...     

益气解毒方对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞线粒体自噬作用机制

目的:研究益气解毒方对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾小管上皮细胞线粒体自噬作用机制。方法:采用DN大鼠模型,观察益气解毒方对DN的治疗作用。采用苏木素伊红(HE)染色法观察给药后DN大鼠肾脏病理变化,透射电镜观察DN大鼠肾小管上皮细胞线粒体自噬体情况。采用蛋白免疫印迹法检测肾组织中微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(microtubule-associatedprotein1lightchain 3Ⅱ,MAP1LC3-Ⅱ,LC3-Ⅱ),自噬标志物p62蛋白(sequestosome-1,p62),促凋亡蛋白Nix(Bcl-2/E1B 19 k Da-interacting protein 3-like,Nix)的表达,并应用实时荧光定量PCR测定Nix mRNA的表达。结果:与模型组比较,益气解毒方能够增加DN大鼠体重,改善DN大鼠血尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),血糖(GLU),甘油三酯(TG)及总胆固醇(CHOL),白蛋白(Alb)等血、尿生化指标(P0.01),并且能抑制由DN导致的肾小管上皮细胞线粒体过度自噬,显著降低LC3-Ⅱ,p62,Nix蛋白的表达(P0.01),同时降低Nix mRNA的表达(P0.01)。结论:益气解毒方对DN有较好的治疗效果,这可能与其调节DN肾小管上皮细胞线粒体自噬紊乱有关。     

二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠尿nephrin排泄的影响

目的:观察二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠尿nephrin(UNE)排泄的动态影响,探讨二甲双胍对糖尿病肾小球足细胞的保护作用?方法:将高脂膳食联合小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的2型糖尿病大鼠随机分为3组:糖尿病模型组?二甲双胍干预组?优降糖干预组,并设正常对照组?干预前后监测血糖(BG)以及尿白蛋白(UALB)和尿nephrin排泄?8周末糖化血红蛋白(HbA1c)的变化?结果:①3组糖尿病大鼠BG及HbA1c均明显高于正常组(P < 0.05);经二甲双胍和优降糖干预后,4?8周末2组BG和HbA1c均明显低于2型糖尿病模型组(P < 0.05),但差异无统计学意义(P > 0.05);②4?8周末各糖尿病大鼠尿白蛋白/肌酐比(UACR)明显高于正常组(P < 0.05);与2型糖尿病模型组比较,二甲双胍和优降糖组UACR值明显降低(P < 0.05),4周末,两干预组间无显著性差异(P > 0.05),8周末,两组间差异有统计学意义(P < 0.05);③0?2周末,4组大鼠尿nephrin/肌酐比(UNER)差异无统计学意义,4?8周末,各糖尿病大鼠UNER均明显高于正常组(P < 0.05),二甲双胍和优降糖干预组UNER明显低于糖尿病模型组(P < 0.05),且二甲双胍组低于优降糖组(P < 0.05);④Pearson相关分析显示UNER与UACR存在正相关(r=0.846,P < 0.05)?结论:二甲双胍可以降低糖尿病肾病大鼠尿nephrin的排泄,提示对肾小球足细胞可能存在保护作用,该作用不完全依赖于血糖的降低?     

黄芪莪术联合5-氟尿嘧啶对CT26.WT原位移植瘤小鼠CXCL10/CXCR3轴和CCL3/CCR5轴表达的影响

目的探讨黄芪莪术配伍联合5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗结肠癌的作用机制。方法采用1只BALB/c雄性小鼠作为种鼠,生成原位瘤体,80只BALB/c雄性小鼠采用移植种鼠瘤体的方法建立CT26.WT原位移植瘤小鼠模型。将80只BALB/c雄性小鼠随机分为模型组、5-FU组(25 mg/kg)、黄芪莪术高剂量组(12 g/kg)、黄芪莪术中剂量组(6 g/kg)、黄芪莪术低剂量组(3 g/kg)、联合高剂量组(12 g/kg+25 mg/kg)、联合中剂量组(6 g/kg+25 mg/kg)、联合低剂量组(3 g/kg+25 mg/kg),每组10只,连续给药3周。处死小鼠取肿瘤组织,计算抑瘤率。采用Western blot和Real-time PCR法分别检测各组小鼠肿瘤组织、淋巴组织和肝脏组织中CXC趋化因子配体10(CXCL10)、CXC趋化因子受体3(CXCR3)、C-C趋化因子配体3(CCL3)、C-C趋化因子受体5(CCR5)蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,各给药组的抑瘤率均升高(P<0.01)。与5-FU组比较,黄芪莪术高、中、低剂量组,联合高、中、低剂量组抑瘤率均降...     

丹参茎叶酚酮有效部位的提取纯化工艺研究

目的对丹参茎叶酚酮有效部位提取纯化工艺进行优选。方法采用超高效液相色谱仪检测,以丹参茎叶中酚酸类(丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸)及黄酮类成分(芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷)二者提取量、总提取量及浸膏得率为评价指标,通过单因素及正交试验考察提取方法、提取溶剂、料液比、提取时间及提取次数对丹参茎叶提取工艺的影响;采用大孔吸附树脂纯化丹参茎叶提取物并对纯化工艺参数进行考察,确定最佳纯化工艺。结果以50%乙醇8倍量回流提取3次,每次提取1.0 h为最佳提取工艺;以AB-8型大孔吸附树脂纯化,1.0 g/m L药液上样,上样量为每10克干树脂上样1.5 g干燥提取物,40%乙醇洗脱,洗脱用量3 BV为最佳纯化工艺,酚酸类及黄酮类成分总纯度可达到41.83%。结论优选的提取工艺稳定可行,适用于丹参茎叶酚酮有效部位的提取纯化,可为丹参茎叶的进一步开发提供参考。     

赤芍总苷、川芎总酚酸组分组成结构对缺氧损伤人脐静脉内皮细胞的影响

目的: 研究赤芍总苷、川芎总酚酸组分不同组成结构对连二亚硫酸钠(Na₂S₂O₄)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧损伤模型的保护作用,并参照基线等比增减法,设计不同组分组成结构,优化出最佳的组分结构。 方法: 采用 Na₂S₂O₄ 体外诱导HUVEC,建立细胞损伤模型。采用MTT比色法测定细胞活力,试剂盒测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)含量、一氧化氮(NO)含量,通过Western blot检测了各组细胞Bcl-2,Bax蛋白的表达量。 结果: 与模型组比较,赤芍总苷组分、川芎总酚酸组分不同组成结构可显著提高SOD活力,降低MDA,LDH,NO含量 (P<0.01,P<0.05)。芍芎组分可以下调Bax蛋白的表达量,上调Bcl-2蛋白的表达量,Bcl-2/Bax显著升高(P<0.01,P<0.05),抑制细胞凋亡。结果显示赤芍总苷、川芎总酚酸组分组成结构比例为8:2时,对缺氧损伤的内皮细胞保护作用最好。 结论: 芍芎组分可以减轻HUVEC的缺氧损伤,8:2组分组成时保护作用最为明显,其机制可能与其抗氧化和抑制细胞凋亡 有关。     

中药产品“多维结构过程动态质量控制技术体系”构建与应用(Ⅰ)

安全性是中药(制剂)产品质量控制的重要组成部分,是临床用药的重要保证。目前2010年版《中国药典》对中药的质量控制多是针对中药效应指标性成分。中药制剂从原料药到产品需要经过许多环节,每一步都会对制剂的安全性产生影响。笔者综合并分析了中药制剂制备过程中引发安全性的一些因素,阐述“多维结构过程动态质量控制技术体系”在中药质量安全性方面的重要作用。中药(制剂)产品质量与安全性密切相关,因此,控制与安全性相关的物质基础是中药(制剂)产品质量控制的重要组成部分。实行对中药制剂由原料到产品的过程动态的质量控制,将中药质量安全控制深入到微观层面,为今后中药制剂的现代化发展打下坚实基础。