栀子甙对慢性脑缺血认知障碍大鼠神经炎症反应的调节

  目的  观察栀子甙对慢性脑缺血认知障碍大鼠的保护作用,并探讨其作用机制。  方法  采用双侧颈总动脉永久性结扎建立慢性脑缺血大鼠模型,假手术组作为正常对照。在手术8周后,采用Morris水迷宫实验筛选符合痴呆标准的大鼠,随机分为生理盐水组、栀子甙低剂量〔50 mg/（kg·d）〕治疗组及栀子甙高剂量〔100 mg/（kg·d）〕治疗组。按其分组连续灌胃干预4周后,再行Morris水迷宫实验评估学习记忆能力,HE染色观察皮层海马病理改变;Western blot检测额叶和海马胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic portein,GFAP）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）和核转录因子kapa B（nuclear factor- kapa B,NF-κB）蛋白的表达;ELISA检测额叶和海马炎性因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素（interleukin, IL）-6的水平。  结果  连续干预4周后,与假手术组相比,生理盐水组大鼠在水迷宫测试中,逃避潜伏期延长以及目标象限活动减少（P<0.05）,且行为学测试成绩差于干预前（P<0.05）;与假手术组相比,栀子甙低剂量治疗组和栀子甙高剂量治疗组逃避潜伏期延长以及目标象限活动也减少（P<0.05）,但是相应成绩优于生理盐水组（P<0.05）,且与干预前成绩相比无明显变化（P>0.05）。HE染色结果显示,生理盐水组大鼠海马和皮层神经元退化明显,细胞数目明显减少,排列松散,层次减少紊乱,深染细胞多见;与生理盐水组相比,栀子甙低剂量治疗组和栀子甙高剂量治疗组相应病理损害减轻。与假手术组相比,生理盐水组、栀子甙低剂量治疗组及栀子甙高剂量治疗组大鼠海马和额叶GFAP、iNOS、NF-κB的表达及炎性因子TNF-α和IL-6的水平均增加（P<0.05）,但与生理盐水组相比,栀子甙低剂量治疗组及栀子甙高剂量治疗组相应值均减少（P<0.05）。  结论  栀子甙可能通过抑制星形胶质细胞活化,减少iNOS、NF-κB的表达及炎性因子TNF-α和IL-6的释放介导其对慢性脑缺血认知障碍大鼠的保护作用。     

左归丸对老年大鼠CD4~+T细胞IL-2基因启动子区域甲基化的影响

目的研究左归丸对自然衰老大鼠CD4+T细胞白细胞介素(IL)-2基因启动子Cp G位点甲基化水平的影响。方法以自然衰老大鼠为模型,分为青年对照组、老年对照组、老年左归组。流式细胞仪分选各组大鼠CD4+T细胞,以抗CD3联合抗CD28进行刺激。Q Real time RTPCR法检测IL-2 mRNA的表达;ELISA法检测DNA甲基转移酶(DNMTs)活性,甲基化特异性PCR(MSP)法检测IL-2基因启动子Cp G位点甲基化水平。结果抗CD3联合抗CD28刺激24 h后,与青年对照组比较,老年对照组CD4+T细胞IL-2 mRNA表达显著降低(P0.01);DNMTs活性显著增强(P0.01),IL-2基因SET1区域甲基化水平显著升高(P0.01)。与老年对照组比较,老年左归组CD4+T细胞IL-2 mRNA表达明显升高(P0.05);DNMTs活性明显减弱(P0.05),IL-2基因SET1区域甲基化水平明显降低(P0.05)。结论左归丸能通过抑制DNMTs活性,降低IL-2基因SET1区域甲基化水平,促进IL-2表达。     

熟地泽泻药对配比改变对庆大霉素耳毒性离体细胞模型的作用比较

目的：观察熟地（radix rehmanniae preparata）与泽泻（Rhizoma Alismatis）组成的药对在不同剂量配比下对庆大霉素（GM）损伤毛细胞的不同保护作用,寻找其最佳剂量配比。方法：复制内耳螺旋器体外培养GM损伤模型,参照基线等比增减设计,对熟地、泽泻设8个剂量配比组,通过耳蜗毛细胞计数观察不同剂量配比下熟地、泽泻对GM损伤耳蜗内、外毛细胞损失率的影响。结果：全耳蜗计数结果显示,熟地泽泻在8∶3、8∶8、0∶3、0∶8配比下,外毛细胞损失率在全耳蜗范围内较GM模型组有明显下降（P〈0.01）。其他配比组与模型组无统计学差异。结论：熟地泽泻在不同配比下对毛细胞损失率的影响呈现出一种非线性的量效关系,原方配比（8∶3）及其他配比（8∶8、0∶3、0∶8）属最佳配比。     

健脾清肠散结方及其拆方对肠癌HT-29细胞株增殖作用的影响

目的:观察健脾清肠散结方及其拆方对肠癌HT-29细胞株增殖作用的影响,并探讨其关键成分及可能的作用机制。方法:将培养的HT-29细胞随机分为:空白对照组,健脾清肠散结方及其拆方健脾益气方、清肠散结方高、低剂量组,共7组。24 h后换无血清培养液,分别加入不同浓度药物(0、2、20、200μg/ml),用噻唑盐比色法(MTT)分析测定各组在不同浓度及不同作用时间点对HT-29细胞生长抑制率。结果:在浓度为2～200μg/ml时,健脾清肠散结方及其拆方对肠癌HT-29的增殖均有一定的抑制作用,呈现浓度依赖和时间依赖性;其中拆方健脾益气方对肠癌HT-29抑制增殖效果与全方一致。结论:健脾清肠散结方对人大肠癌细胞株HT-29细胞增殖有一定的抑制作用,其关键成分可能是健脾益气药。     

疏肝健胃方对大鼠血浆胃动素及胃组织一氧化氮含量的影响

功能性消化不良(ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｄｙｓｐｅｐｓｉａ,ＦＤ)是一种常见的消化系症状群,包括轻重不一的消化不良症状,如上腹不适、腹胀、腹痛、早饱、嗳气等,同时经胃镜、Ｂ超等仔细检查未发现有溃疡或仅有慢性胃炎。疏肝健胃方为我院消化科治疗ＦＤ的一个常用方药,临床疗效较好,本研究就疏肝健胃方对大鼠血浆胃动素及胃组织一氧化氮含量的影响作了初步观察,以进一步明确本方治疗ＦＤ临床获效的原因。材料及方法一、材料1.动物:选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠36只,雄性,体重150～200ｇ,上海中医药大学实验中心提供,普通饲料喂养1周,使其适应饲养环…     

中药温郁金生化药理作用的研究

郁金属姜科,分黄郁金(广郁金)和温郁金(黑郁金)。前者为姜黄(CurcumaLongal);后者为郁金(Curcuma Aro-matica Salisl)的干燥块根。温郁金的性:凉;味:辛、苦、寒、无毒(唐本草)。主产于浙江地带,尤以温州最多,故称为温郁金。其主成份含有挥发油和姜黄素。(C_(21)H_(24)其挥发油中主要成     

单侧输尿管梗阻法制作大鼠肾间质纤维化模型的改进

目的建立改良的大鼠肾间质纤维化模型。方法用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维化模型,动态观察4周。治疗的第12、、3周末检测血肌酐、尿素氮含量等指标,观察肾功能变化;4周末采用HE染色、六胺银(periodic acid-silver methenamine,PASM)染色和丽春红染色观察肾组织病理变化。结果模型组大鼠血肌酐、尿素氮均有明显上升;模型组大鼠大部分肾小球呈玻璃样变,硬化的肾小球周围所属肾小管萎缩、基底膜增厚,部分肾小管消失;少数残存的肾小球肥大并周围肾小管扩张严重;肾间质胶原纤维增生和大量炎细胞浸润。结论该模型有明显的肾间质纤维化特征,且死亡率低,适合肾间质纤维化的实验研究。     

交泰丸降糖作用的实验研究

目的:观察交泰丸对高糖高脂饲料喂养联合低剂量链脲佐菌素(streptozotoc in,STZ)注射的2型糖尿病大鼠的治疗作用。方法:以高糖高脂饲料喂养大鼠5周,腹腔注射低剂量的STZ(40mg/kg)制作大鼠2型糖尿病动物模型。给予交泰丸灌胃治疗3周,动态观察其治疗后的体重、血糖,并检测治疗3周末血脂以及血清胰岛素的变化。结果:高糖高脂饲料喂养5周后大鼠体重升高,注射STZ后体重明显减轻;空腹血糖(FPG)从STZ注射后1周起持续升高;实验末甘油三酯(TG)明显升高,血清胰岛素(INS)降低;交泰丸组FPG从治疗第1周起即有下降趋势,3周末时FPG和TG较模型组明显降低,而体重和血清INS没有明显的变化。结论:交泰丸对高糖高脂饲料喂养联合低剂量链脲佐菌素注射的大鼠2型糖尿病模型有治疗作用,其机制可能与改善胰岛素敏感性有关。     

泻心汤的抗菌作用研究

目的:研究中药泻心汤的抗菌效应.方法:以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌及绿脓杆菌为受试菌,采用倍比稀释法,观察泻心汤的最低抑菌浓度;采用血清药理学方法,观察大鼠灌服泻心汤12g/kg后15 min、4 h血清的抑菌效应.结果:泻心汤在体外对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为6.25、6.25和100mg/ml;而大鼠给药后含药血清仅具有较弱的抑菌作用.结论:泻心汤在体外具有一定抑菌效应,其含药血清抑菌作用较弱,有待进一步研究.     

阿魏酸钠对组胺引起的血管内皮细胞单层通透性增高的作用

目的　本实验观察阿魏酸钠对炎症介质组胺引起的血管内皮通透性增加的作用。方法　从新生牛主动脉分离获得单个内皮细胞 ,培养于微孔滤膜上直至形成致密单层。通过灌流Hanks液或含 5g·L-1白蛋白的Hanks液后 ,测定经 1× 10 -4 mol·L-1组胺溶液加 1× 10 -5mol·L-1阿魏酸钠处理的液体滤过系数 (Kf)、液体滤过流量 (Jv)和蛋白质渗透压反射系数 (σ)。结果　内皮单层经组胺处理后 ,Kf和Jv降低 ,σ升高 ;而阿魏酸钠能够抑制因组胺造成的Kf和Jv降低 ,以及σ升高。结论　组胺能够引起血管内皮单层通透性的增加 ,而阿魏酸钠能够减轻组胺造成的内皮单层通透性的增加 ;其作用机制需要进一步地研究。