二甲双胍对IFN⁃γ诱导的人卵巢颗粒细胞损伤的保护作用

目的：探讨二甲双胍对干扰素（interferon,IFN）?γ诱导的人卵巢颗粒细胞KGN功能损伤的效应及可能机制。方法：采用CCK?8法检测不同浓度二甲双胍单独及与IFN?γ共处理对KGN细胞活力的影响,并观察细胞生长状态的变化;流式细胞术检测不同处理对KGN细胞凋亡及周期的影响;q?PCR 法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A（cyclin dependent kinase inhibitor 1A,CDKN1A）mRNA的表达。结果：IFN?γ可抑制KGN细胞活力、阻滞细胞从G0?G1期进入S期,并促进凋亡（P < 0.05）;二甲双胍单独处理几乎不影响KGN细胞功能;但二甲双胍与IFN?γ共同作用可提高损伤的KGN细胞活力,缓解IFN?γ引起的细胞凋亡及周期阻滞,并抑制细胞周期负性调节蛋白CDKN1A表达的异常上调。结论：二甲双胍可减轻IFN?γ诱导的KGN细胞功能损伤,并且可能是通过下调细胞周期负性调节蛋白CDKN1A 的异常表达发挥保护作用。     

黄芩苷对小鼠巨噬细胞干扰素基因刺激因子通路活化的影响

目的: 研究黄芩苷对小鼠骨髓源巨噬细胞（bone marrow derived macrophages,BMDMs）中干扰素基因刺激因子（stimulator of interferon genes,STING）通路的效应。方法: 将C57BL/6小鼠骨髓细胞经巨噬细胞集落刺激因子诱导,培养制备BMDMs,将细胞分为6组：对照组（二甲基亚砜）、黄芩苷组、环鸟苷酸-腺苷酸（cGAMP）组、黄芩苷+cGAMP组、脂多糖组、黄芩苷+脂多糖组。用显微镜观察各组BMDMs的细胞形态;流式细胞术检测各组BMDMs表面CD80、CD86的表达;Griess法检测BMDMs培养上清液中一氧化氮的含量;ELISA法检测BMDMs IL-6、TNF-α和IFN-β的分泌。结果： 黄芩苷对BMDMs 的形态和生长状态无明显影响;黄芩苷抑制活化BMDMs的一氧化氮产生,负向调控BMDMs表面CD80、CD86的表达水平,抑制STING通路活化后巨噬细胞IL-6、TNF-α和IFN-β的分泌。结论： 黄芩苷抑制BMDMs中cGAMP激活的STING通路活化。     

miR-29a在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响

摘要：目的：检测miR-29a在乳腺癌组织中的表达水平并探讨其对人乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。 方法：用荧光定量RT-PCR检测乳腺癌组织及癌旁组织中miR-29a的表达水平;用脂质体法将miR-29a mimic及miR-29a inhibitor分别转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231,通过MTT实验和 Transwell实验观察miR-29a对MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的影响;miRanda软件预测miR-29a的靶基因,western blot验证其表达结果。 结果：荧光定量RT-PCR检测结果表明,与癌旁组织（2.17±0.89）比较,miR-29a在乳腺癌组织（5.65±1.45）中的表达水平上调（t=3.94,P＜0.01）;MTT实验和Transwell实验结果显示,与mimics阴性对照组［（106.36±5.15)%,(216.70±7.20）个］相比,miR-29a mimics组［（133.32±6.31）%,(294.30±8.60)个］乳腺癌细胞的增殖和迁移能力增加（t分别为3.36和6.85,P均＜0.01）;与inhibitor阴性对照组［（105.35±3.42）%,(240.30±9.50）个］相比,miR-29a inhibitor组［（66.63±3.82）%,(156.30±7.80）个］乳腺癌细胞的增殖和迁移能力降低（t分别为8.18和6.81,P均＜0.01）。miRanda软件预测人第10号染色体缺失的同源性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）可能为miR-29a的靶基因。western blot结果显示,与mimics阴性对照组（0.55±0.01）相比,乳腺癌细胞转染miR-29a mimic后,其PTEN蛋白质的表达水平（0.22±0.01）下调（t=14.29,P＜0.01）;与inhibitor阴性对照组（0.49±0.02）相比,转染miR-29a inhibitor后,PTEN蛋白质的表达水平（1.25±0.02）上调（t=19.39,P＜0.01）。 结论：miR-29a在乳腺癌组织中的表达水平增高,并可能通过下调PTEN蛋白的表达促进乳腺癌细胞的增殖和转移。