川崎病患儿血浆N端脑钠肽前体表达水平及临床意义

目的：探讨血浆N端脑钠肽前体（N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP）表达水平在川崎病（Kawasaki disease, KD）中的临床意义。方法采用电化学发光免疫学方法测定16例KD患儿应用丙种球蛋白前后及20例呼吸道感染性疾病患儿（对照组）的血浆NT-proBNP水平。结果急性期KD儿童血浆NT-proBNP水平明显高于对照组（t=3.829,P＜0.01）。KD治疗前后比较,KD急性期血浆NT-proBNP水平较恢复期升高,差异有统计学意义（t=12.64,P＜0.01）。KD有冠脉损害组与无冠脉损害组比较,KD急性期冠脉损害组患儿血浆NT-proBNP明显升高,差异有统计学意义（t=8.361,P＜0.01）。结论KD急性期血浆NT-proBNP升高,而在疾病恢复期明显降低,有助于急性期KD的早期诊断,以及NT-proBNP水平升高是KD儿童发生冠脉损害的预测指标之一,值得临床推广应用。     

血浆脑钠肽测定在小儿肺炎合并心衰诊疗中的应用价值

目的探讨小儿肺炎合并心力衰竭患者血浆脑钠肽(BNP)测定在鉴别诊断和疗效评估中的价值。方法选择2012年8月至2014年2月入住我院的80例1-3岁肺炎患者,其中单纯肺炎病例46例和肺炎合并心衰病例34例。每位患者分别在入组时和治愈出院前进行血浆BNP的测定,另取20名健康体检同年龄段儿童测定血浆BNP作为健康对照。将检测结果进行入组时单纯肺炎组与肺炎合并心衰组比较、肺炎合并心衰组治疗前后比较。结果肺炎合并心衰组入院时的血浆BNP(750±120 pg/ml)高于单纯肺炎组(135±50 pg/ml),差异有统计学意义(P0.05)。肺炎合并心衰组患者治愈出院时的血浆BNP(85±45pg/ml)低于入组时(750±120 pg/ml),差异也有统计学意义(P0.05)。结论血浆BNP是小儿肺炎合并心力衰竭患者临床诊断及监测疗效的一个敏感性指标,对于临床诊疗具有重要应用价值。     

自噬在脂多糖诱导的A549细胞炎症反应中的作用及机制研究

目的 探讨自噬在脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的人肺泡上皮A549细胞炎症反应中的作用及机制。 方法 用LPS刺激A549细胞建立炎症反应模型,按浓度（0、1、5、10 μg/mL）和时间（0、4、8、12、24 h）分组（各组n=3）。用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine,3-MA）处理细胞,分为对照组、LPS组、3-MA组、3-MA+LPS组（各组n=3）;用自噬激动剂雷帕霉素（rapamycin,RAPA）处理细胞,分为对照组、LPS组、RAPA组、RAPA+LPS组（各组n=3）。通过Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）过表达质粒和siRNA转染A549细胞,实验分为两部分,每部分各分4组（各组n=3）：TLR4过表达对照组、TLR4过表达组、TLR4过表达对照+LPS组、TLR4过表达+LPS组;TLR4沉默对照组、TLR4沉默组、TLR4沉默对照+LPS组、TLR4沉默+LPS组。采用CCK-8法检测细胞存活率,免疫印迹法检测炎症指标（NLRP3、Caspase-1、ASC）、自噬指标（LC3B、Beclin-1、P62）、TLR4蛋白表达水平。 结果 1 μg/mL浓度的LPS刺激12 h后,炎症指标（NLRP3、Caspase-1、ASC）、自噬指标（LC3B、Beclin-1、P62）和TLR4蛋白表达均明显升高并达峰值（P<0.05）。与LPS组比较,3-MA+LPS组自噬相关蛋白表达降低,炎症相关蛋白表达升高,TLR4蛋白表达上调;RAPA+LPS组自噬相关蛋白表达升高,炎症相关蛋白表达降低,TLR4蛋白表达下调（P<0.05）。TLR4过表达+LPS组较TLR4过表达对照+LPS组自噬相关蛋白表达降低,炎症相关蛋白表达升高;TLR4沉默+LPS组较TLR4沉默对照+LPS组自噬相关蛋白表达升高,炎症相关蛋白表达降低（P<0.05）。 结论 在LPS诱导的人肺泡上皮A549细胞炎症反应中,自噬流对A549细胞具有一定保护作用;TLR4介导自噬流对LPS诱导的人肺泡上皮A549细胞炎症反应进行负向调控。     

脂氧素A4拮抗CTGF所致的人肾小管上皮细胞转分化

目的:探讨脂氧素A4(LXA4)对结缔组织生长因子(CTGF)诱导的肾小管上皮细胞HK2转分化的影响.方法:在体外培养的人肾小管上皮细胞(HK2细胞)中,加入CTGF和LXA4刺激48 h后,用倒置显微镜观察细胞形态学变化,应用RT-PCR、Western blot方法测定上皮细胞E钙黏蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA与蛋白的表达.结果:CTGF刺激使HK2细胞形态由椭圆形转为梭形,下调E钙黏蛋白mRNA与蛋白表达,上调α-SMA的mRNA与蛋白表达.LXAc能够抑制CTGF所致的上述变化,E钙黏蛋白mRNA与蛋白的相对表达值分别为0.270±0.082和0.827±0.177,分别高于CTGF刺激组的0.067±0.015(P<0.05)和0.257±0.221(P<0.05);α-SMA的mRNA与蛋白表达的相对表达值分别为0.070±0.046和0.023±0.023,分别低于CTGF刺激组的0.653±0.256(P<0.05)和0.167±0.050(P<0.05).结论:外源性CTGF能导致HK2细胞转分化为肌成纤维细胞.LXA4可抑制CTGF对HK2细胞的转分化,这为治疗肾间质纤维化提供了一条新途径.     

脂氧素A4抑制结缔组织生长因子诱导的肾小管上皮细胞表达整合素连接激酶

目的:结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)可诱导人肾小管上皮细胞HK-2表达整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK),本研究观察脂氧素A4(lipoxinA4,LXA4)是否调节CTGF对合成ILK的作用,并探讨其作用机制。方法:对体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞株),用不同浓度的LXA4预刺激,再加入CTGF共同孵育;或单用CTGF刺激HK-2细胞。应用RT-PCR和Westernblot方法测定ILKmRNA和蛋白表达,应用Westernblot法测定分裂原激活的蛋白激酶(p42/44mitogen-activated protein kinase,p42/44MAPK)(也称为ERK1/2)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3-K)。结果:CTGF刺激使HK-2细胞ILKmRNA表达和蛋白合成增加,磷酸化ERK1/2、磷酸化PI3-K的表达增加。LXA4呈剂量依赖性地抑制CTGF所致的上述变化。结论:LXA4可抑制CTGF引起的HK-2细胞表达ILK,其机制依赖于抑制...