云南天然钝顶螺旋藻片多糖提取工艺的正交实验优化与脱色脱蛋白方法研究

目的 研究云南钝顶螺旋藻片中多糖的提取与纯化工艺,并筛选出云南钝顶螺旋藻多糖脱色、脱蛋白的最佳方法.方法 正交实验设计优选出提取云南钝顶螺旋藻片中多糖的方法,以提取多糖物质多糖损失率、蛋白质去除率为测定指标,分别考察不同实验方法对多糖脱蛋白、脱色的影响.结果 云南钝顶螺旋藻片多糖的最佳提取工艺为:水提温度为80℃,水提时间2 h,固液比1:15,在此条件下多糖提取率为2.18%,水提温度和固液比是影响多糖得率的主要因素.三氯乙酸脱蛋白法为云南钝顶螺旋藻片多糖脱蛋白的最佳方法,活性炭脱色法对云南钝顶螺旋藻多糖片的脱色效果优于过氧化氢脱色法.结论 云南钝顶螺旋藻片粗多糖的纯化,脱色与脱蛋白方法的优化为进一步研究云南钝顶螺旋藻片的生物活性提供了基础.     

地参多糖的提取工艺研究

目的:开发利用地参中的多糖的价值。方法:采用无水乙醇回流脱脂,热水浸提法提取地参水溶性多糖。对提取时间、提取温度、料水比以及提取次数分别进行了单因素试验和L9(34)正交试验。结果:确定地参多糖最佳提取工艺条件为提取温度80℃,提取料水比1∶15,提取时间3 h,提取1次。结论:该方法操作简便、提取迅速、并能获得含量较高的多糖成分,在该工艺条件下地参多糖得率为16.8%。     

卵巢冠囊肿致腹痛、下肢痛一例

患儿 :女 ,汉族 ,14岁。因“间歇性腹痛、左大腿痛 1年 ,加重 1ｄ急诊入院。患儿于 1年前无明显诱因突然出现左下腹阵发性疼痛 ,难以忍受 ,伴恶心。同时左大腿有酸麻胀痛 ,久立时疼痛加剧 ,平卧后疼痛减轻或缓解。其后症状反复出现 ,无明确诊断。于 1ｄ前患儿突然出现腹痛加剧、腿痛难忍 ,伴轻微恶心 ,经检查后入院。体检 :一般状态可 ,神志清。呼吸略促 ,心肺正常。腹平坦 ,左下腹深部压痛 ,无反跳痛及腹肌紧张 ,肝脾肋弓下未触及 ,鼓音 ,移动性浊音阴性 ,肠鸣音 6次 /ｍｉｎ,无气过水声。四肢活动如常 ,肌力正常 ,皮肤感觉正常。生理反射…     

地参多糖抗肿瘤作用研究进展

地参多糖是从一种多年生草本植物地参中提取出来的生物活性大分子,具有抗肿瘤、抗氧化、抗凝血、免疫调节等多种活性。本文综述了近年来地参多糖的抗肿瘤作用及机制的研究进展,为多糖类抗恶性肿瘤药物的开发及应用研究提供基础。     

刺梨果多糖对肺腺癌A549 细胞增殖、凋亡的作用及机制研究

探讨刺梨果多糖对肺腺癌A549 细胞增殖、凋亡的作用及机制。方法 在0、2、4、6、8、 10 g·L-1 刺梨果多糖干预A549 细胞24、48、72 h 后,采用CCK-8 法检测A549 细胞增殖情况。在0、2、6、 10 g·L-1 刺梨果多糖干预A549 细胞24、48 h 后,采用细胞划痕实验测定A549 细胞的迁移情况;Transwell 实 验测定A549 细胞侵袭情况。在0、2、6、10 g·L-1 刺梨果多糖干预A549 细胞48 h 后,采用流式细胞术（PI 单 染法）测定A549 细胞周期;流式细胞术（Annexin V-FITC/PI 双染法）测定A549 细胞的凋亡情况;Real-Time PCR 法测定A549 细胞的周期、凋亡相关基因表达水平;Western Blot 法测定A549 细胞的周期、凋亡相关蛋白 表达水平。结果 （1）干预24、48、72 h 后,与对照组（0 g·L-1）比较,刺梨果多糖2、4、6、8、10 g·L-1 组的 A549 细胞生长受到显著抑制,细胞的存活率显著降低（P＜0.05,P＜0.01）,刺梨果多糖干预48 h 的IC50 值为 6.109 g·L-1,后续实验采用2、6、10 g·L-1 浓度作为刺梨果多糖低、中、高剂量。（2）干预48 h 后,与对照组比 较,刺梨果多糖2、6、10 g·L-1 组的A549 细胞迁移距离显著增加（P＜0.05,P＜0.01）,细胞侵袭数量显著减少 （P＜0.05,P＜0.01）;刺梨果多糖6、10 g·L-1 组的G0/G1 期、G2/M 期细胞比例均显著升高（P＜0.05,P＜0.01）, S 期的细胞比例显著降低（P＜0.01）;刺梨果多糖2、6、10 g·L-1组A549 细胞的G0/G1、G2/M 期相关调控因子 CDK-4、CDK-6、CyclinD1、CDK-1、CyclinB1 mRNA 及蛋白表达水平均显著下调（P＜0.05,P＜0.01）;A549 细胞的凋亡率均显著升高（P＜0.01）;凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA 表达显著上调 （P＜0.05,P＜0.01）;促凋亡Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 蛋白表达显著上调（P＜0.05,P＜0.01）, 抗凋亡Bcl-2 蛋白表达显著下调（P＜0.05,P＜0.01）。结论 刺梨果多糖能够抑制A549 细胞的增殖、迁移和 侵袭,阻滞细胞周期于G0/G1 和G2/M 期,并通过线粒体通路和死亡受体通路诱导A549 细胞凋亡。     

玛卡多糖抗非小细胞肺癌作用及其机制

目的:探讨玛卡多糖抗非小细胞肺癌作用及其机制。方法:采用一定浓度的玛卡多糖处理非小细胞肺癌A549细胞,CCK-8法、划痕实验和Transwell小室检测玛卡多糖对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响;流式细胞术检测玛卡多糖对A549细胞周期和凋亡的影响;实时荧光定量PCR和Western Blot法检测细胞周期和凋亡相关因子的表达。结果:玛卡多糖能显著抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭;细胞周期被阻滞在G₀/G₁期和G₂/M期;实时荧光定量PCR结果显示,CDK-1和Cyclin B1的表达显著降低,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达显著升高;Western Blot结果发现,周期相关蛋白CDK-1、Cyclin B1、CDK-4、CDK-6、Cyclin D1的表达显著降低,凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax的表达显著升高,Bcl-2的表达显著降低。结论:玛卡多糖能够抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖并促进细胞凋亡。     

人细胞周期素D1和B1真核表达载体的构建及对HeLa细胞的转染

目的：构建人细胞周期素cyclin D1和cyclin B1的真核表达载体,并将其瞬时转染到HeLa细胞株中。方法：以HeLa细胞总RNA为模板,通过RT-PCR扩增cyclin D1和cyclin B1基因编码的cDNA,并将扩增的cDNA片段插入p3XFLAG-CMV~（TM）-14真核表达载体,分别构建p3XFLAG-cyclin D1和p3XFLAG-cyclin B1重组质粒,重组子经酶切分析和测序鉴定后,用脂质体介导的基因瞬时转染法,将重组正确的表达载体转染HeLa细胞,用Western-blot技术检测细胞中FLAG融合蛋白的表达。结果：经酶切鉴定和Western印迹分析证实人cyclin D1和cyclin B1的真核表达载体构建成功,并能在瞬时转染的HeLa细胞中表达分子量大小相符的重组蛋白。结论：成功构建了人cyclin D1和cyclin B1的真核表达载体,为两种细胞周期素及其相关蛋白的功能研究奠定了基础。     

提睾肌痉挛引起的急性腹痛20例临床分析

小儿提睾肌痉挛可引起急性腹痛。患儿突然出现腹股沟区包块伴阵发性腹痛;同时有恶心、呕吐、腹胀、尿频等伴随症状。起病急骤,病程短。本院自2000年以来收治由提睾肌痉挛引起的急性腹痛患者20例,总结如下。1临床资料1.1一般资料本组20例,最小年龄1岁,最大1.8岁,平均年龄1.5岁;单侧4例,占20%,双侧16例,占80%;病程最长6h,最短30min,平均2.6h。1.2临床表现阵发性腹痛伴腹股沟区包块20例,阴囊皱缩17例,恶心、阵发性呕吐13例,腹胀9例,尿频及会阴部不适8例;睾丸位于阴囊入口3例,位于腹股沟外环及阴囊入口之间10例,位于外环处7例。1.3治疗减少不良…