胶质瘤细胞GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平对其基因转录的影响

目的 探讨胶质瘤细胞胶质细胞原性神经营养因子（GDNF）基因启动子Ⅰ区甲基化水平对其基因转录的影响。方法 体外培养胶质瘤U251细胞,加入不同浓度5-氮杂胞苷（浓度分别为1、5、10和20 μmol/L）干预,以加入PBS为对照。采用重亚硫酸盐测序法测定GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平,RT-PCR检测GDNF mRNA的表达。结果 与PBS组相比,1 μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平无显著影响（P>0.05）,5、10和20 μmol/L 5-氮杂胞苷均显著降低其甲基化水平（P<0.05）。与PBS组相比,1 μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF mRNA表达水平无显著影响（P>0.05）,5 μmol/L 5-氮杂胞苷显著增加其表达水平（P<0.05）,但随着浓度进一步增加（10、20 μmol/L）,其表达水平逐渐降低。结论 5-氮杂胞苷对GDNF基因具有去甲基化作用;GDNF启动子Ⅰ区去甲基化能够增加GDNF基因的转录水平。