lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制研究

目的:探讨lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制。方法:采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导三阴性乳腺癌紫杉醇耐药细胞系并命名为MDA-MB-231/R。采用定量PCR和Western blot检测耐药细胞和亲本细胞中lncRNA 178030.2和TRPS1的表达；应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；RIP实验检测lncRNA 178030.2是否与TRPS1相结合；MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2小干扰RNA si178030.2和对照siNC转染至MDA-MB-231/R细胞，分别为干扰组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；MTT法检测MDA-MB-231/R细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将TRPS1过表达质粒pcmv-TRPS1和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，分别用定量PCR和Western blot检测两组细胞中TRPS1 mRNA及蛋白水平的表达情况，然后再分别应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2转染入两组细胞，MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。结果:成功构建在3 μg/ml紫杉醇中稳定生长的三阴性乳腺癌耐药细胞系MDA-MB-231/R。定量PCR结果显示:lncRNA 178030.2在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显高于在其亲本细胞MDA-MB-231中的表达；定量PCR和Western blot显示:TRPS1 mRNA和蛋白在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显低于在其亲本细胞系MDA-MB-231中的表达；与对照组相比，高表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231细胞中TRPS1表达下降，细胞对紫杉醇的敏感性降低，细胞增殖增强，且lncRNA 178030.2确实可以与TRPS1相结合；与对照组相比，低表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231/R细胞中TRPS1表达升高，细胞对紫杉醇的敏感性升高，细胞增殖减弱；在MDA-MB-231细胞中过表达TRPS1后再过表达lncRNA 178030.2，其促进紫杉醇耐药、促进细胞增殖的作用也明显减弱。结论:lncRNA 178030.2促进三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的紫杉醇耐药，促进细胞增殖，其发生机制可能与下调TRPS1的表达有关。     

膝滑液纤维连接蛋白水平与软骨损伤的相关性研究

[目的]观察膝软骨损伤滑液蛋白含量的变化,探索纤维连接蛋白(fibronectin,FN)是否可以作为一种可靠的生物学标记物来反映软骨损害的程度。[方法]131例软骨损害行手术治疗患者纳入本研究,术中全面评估软骨情况,按Outerbridge最高评级确定患者软骨损伤程度。取关节滑液进行SDS-凝胶电泳、考马斯蓝染色,识别有差异的条带进行质谱分析,分析得到的有表达差异的蛋白通过蛋白印迹实验来确定,进一步使用ELISA来验证。将软骨Outerbridge评级与滑液中筛选出的蛋白浓度对比,分析此蛋白与软骨损伤程度(Outerbridge最高评级)的相关性。[结果]SDS-PAGE电泳、考马斯蓝染色,比较后发现OA患者滑液中有一条约为220 KDa的深蓝色条带,切下进行质谱分析发现条带中含有大量FN的肽段。蛋白印迹检测发现FN在Outerbridge Ⅳ级滑液中的表达水平明显高于0级患者滑液中的水平。ELISA检测滑液FN水平按Outerbridge分级顺序如下:0级(87.07±5.65)μg/ml、Ⅰ级(102.75±5.88)μg/ml、Ⅱ级(201.90±12.23)μg/ml,Ⅲ级(287.13±12.51)μg/ml,Ⅳ级(303.63±7.32)μg/ml。FN的变化与软骨损伤的严重程度呈正相关(r=0.873,P0.01)。[结论]在膝滑液中FN水平可以作为一种早期的生物标记来反映软骨损伤情况,并可以在一定程度上反映出膝关节软骨损伤的程度。     

CTEN通过TGF-β1促进非小细胞肺癌细胞紫杉醇耐药的作用及机制研究

目的:探讨CTEN通过TGF-β1促进非小细胞肺癌（NSCLC）细胞紫杉醇耐药的作用和分子机制。方法:采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导非小细胞肺癌紫杉醇耐药细胞系并命名为A549/R,采用定量PCR和Western blotting检测耐药细胞和亲本细胞中CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白的表达,应用Lipofectamine 2000分别将CTEN高表达质粒pcmv-CTEN及其对照质粒pcmv转染至非小细胞肺癌A549细胞,分别为高表达组和对照组,分别用定量PCR和Western blotting检测CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白水平的变化;MTT法检测A549细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000分别将CTEN干扰质粒siCTEN及其对照siNC转染至紫杉醇耐药细胞系A549/R细胞,分别为干扰组和对照组,分别用定量PCR和Western blotting检测CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白水平的变化;MTT法检测A549/R细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000分别将TGF-β1干扰质粒siTGF-β1及其对照质粒siNC转染至非小细胞肺癌A549细胞,分别为干扰组和对照组,分别检测两组细胞中TGF-β1 mRNA及蛋白水平的表达情况,然后再分别用Lipofectamine 2000将CTEN高表达质粒pcmv-CTEN转染入两组细胞,MTT法检测A549细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。结果:成功构建在5 μg/mL紫杉醇中稳定生长的非小细胞肺癌耐药细胞系A549/R。定量PCR和Western blotting显示,CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白在紫杉醇耐药细胞系A549/R中的表达明显高于在其亲本细胞系A549中的表达;与对照组相比,高表达CTEN组的A549细胞中TGF-β1表达上升,细胞对紫杉醇的敏感性降低,细胞增殖增强;与对照组相比,低表达CTEN组的A549/R细胞中TGF-β1表达降低,细胞对紫杉醇的敏感性升高,细胞增殖减弱;在A549细胞中低表达TGF-β1后再过表达CTEN,其促进紫杉醇耐药及细胞增殖的作用也明显减弱。结论:CTEN具有促进非小细胞肺癌A549的紫杉醇耐药,促进细胞增殖的作用,其发生机制可能与上调TGF-β1的表达有关。     

伊立替康联合顺铂治疗广泛期小细胞肺癌的临床观察

目的观察周剂量伊立替康联合顺铂一线治疗广泛期小细胞肺癌(SCLC)的疗效及不良反应。方法 42例经病理或细胞学诊断为广泛期SCLC患者接受伊立替康60mg/m2第1、8、15天,顺铂25mg/m2第1-3天,每28天为1个周期,治疗2个周期评价疗效,每周期评价不良反应。结果 42例入选患者均可评价疗效。获完全缓解(CR)3例,部分缓解(PR)34例,总有效率(CR+PR)为88.09%。所有患者中位疾病进展时间为225d,中位生存时间401d。主要不良反应为Ⅲ/Ⅳ度中性粒细胞下降(19例,45.2%),腹泻(7例,16.7%)和恶心、呕吐(13例,31.0%)等。结论周剂量伊立替康联合顺铂一线治疗广泛期SCLC安全、有效,可作为一线化疗方案的选择。     

HBsAg阳性孕妇HBsAg、HBeAg和HBVDNA关系探讨

目的研究HBsAg阳性孕妇血清HBVDNA载量与HBsAg、HBeAg滴度之间的关系。方法入组乙肝疫苗母婴阻断效果研究队列892例未经抗病毒治疗孕妇,经雅培Architect i2000分析仪检测其血清HBsAg和HBeAg,并用雅培全自动实时荧光定量系统m2000定量检测HBVDNA水平。结果 HBeAg阳性组中,HBVDNA阳性率为95.65%;HBeAg阴性组中,HBVDNA阳性率为30.08%,差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度组HBeAg和HBVDNA检测结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同载量HBVDNA组,HBeAg差异有统计学意义(P<0.01),且随HBVDNA含量增加而增加,成正相关(r=0.71,P<0.01);HBsAg差异也有统计学意义(P<0.01),随HBVDNA含量增加而增加,成正相关(r=0.53,P<0.01)。结论在未经抗病毒治疗的HBsAg阳性孕妇中HBVDNA载量与HBsAg、HBeAg滴度均呈正相关,HBsAg可以较好的反映HBV复制水平。     

男性尿道狭窄的治疗暨钬激光评价

目的探讨尿道狭窄和闭锁的治疗方法.方法 223例尿道狭窄患者分别采用腔镜下钬激光、电刀、冷刀内切开术及开放手术切除瘢痕加尿道吻合术或移植物替代.部分患者采用两种以上手术方法.所有患者坚持尿道扩张1年以上.结果各种方法在治疗效果上并无显著差异,但腔镜下钬激光尿道内切开及瘢痕切除术在控制出血及操作便捷性方面具有明显优势.结论尿道内切开术特别是钬激光尿道内切开术是单纯性尿道狭窄的首选治疗方法.开放手术在复杂性尿道狭窄的治疗上有明显优势,而且是解决尿道狭窄的最终方法.     

癔病患者的心理护理

<正> 癔病是心因性的神经官能症,是由于某些不愉快的精神刺激所致。针对癔病暗示性强、感情用事的特点,在治疗过程中,采取心理护理很有必要。近年来,我院曾收治某中学6名女学生,她们在短期内相继发生癔病,经采用心理护理配合治疗,收到较好的效果。半年后随访,除1例无法追访,尚有1例因再次受到不良刺激,在短期内(与初次发作相隔15     

三种不同术式治疗精索静脉曲张的疗效对比分析

目的比较分析三种不同手术方式治疗精索静脉曲张（VC）的疗效。方法选择1 000例初发的单侧VC患者分别采用开放经腹膜后精索内静脉高位结扎术（腹膜后组,n=360）、经腹股沟超选择性精索内静脉结扎术（腹股沟组,n=324）及经腹腔镜精索内静脉高位结扎术（腹腔镜组,n=316）治疗,分析各组手术操作要点,并对各组手术并发症进行比较。结果三种术式术后附睾炎、阴囊水肿、睾丸鞘膜积液发生例数分别为腹膜后组22例、15例和28例;腹股沟组54例、40例和57例;腹腔镜组32例、23例和32例。腹膜后组和腹腔镜组术后附睾炎、阴囊水肿、睾丸鞘膜积液及腹股沟区疼痛的发生率明显低于腹股沟组（P〈0.05）。结论开放经腹膜后精索内静脉高位结扎术及经腹腔镜精索内静脉高位结扎术具有术后恢复快、并发症较少的优点。由于腹腔镜手术费用明显较高,对术者操作有更高的要求,麻醉要求更高,所以经腹膜后精索内静脉高位结扎术治疗VC具有独特的优势,值得推广。     

3起肠致病性大肠埃希菌造成感染性腹泻爆发疫情的流行病学分析

目的对我市2005-2007年报告的3起由致病性大肠埃希菌感染性腹泻爆发疫情进行流行病学分析,为该类疫情的预防控制提供依据。方法运用回顾性流行病学分析法对我市2005-2007年报告的3起由致病性大肠埃希菌感染性腹泻爆发疫情进行分析,相关资料录人计算机,用Excel软件进行统计分析。结果①2005-2007年共发生3起由致病性大肠埃希菌感染性腹泻爆发疫情,占细菌性食源性疾病总数的6.98%。②发生高峰季节是春、夏和秋季。③人群年龄、性别和职业无特异性。④潜伏期最短的6h,最长的6d;临床症状以腹痛、腹泻为主。⑤传播方式以粪-口途径、人-人接触,食物、水源传播为主。结论我市致病性大肠埃希菌感染性腹泻发病率水平较高,且卫生管理上存在监管未到位等薄弱环节;提示今后应加强监督管理,提高自身检验能力,同时要在高峰季节前做好预防该类疫情的关键控制点的健康教育工作。