胎鼠血及新生鼠外周血分次移植对造血干细胞植入影响的实验研究

我们拟在建立鼠 鼠同种异体脐血移植动物模型的基础上 ,采用胎鼠血及新生鼠外周血 (ＦＮＰＢ)单次或分次移植 ,观察移植后免疫和造血重建 ,试图探讨促进脐血造血干细胞(ＨＳＣ)植入 ,提高脐血移植 (ＵＣＢＴ)效率的新策略 ,为克服ＵＣＢＴ存在的问题和进一步开发利用提供实验和应用依据。材料和方法1　动物模型　以Ｃ5 7ＢＬ/6 (Ｈ 2 ｂ)鼠 (雌∶雄 =2∶1,8～ 12周龄 ,体重 2 2～ 2 6ｇ ,中国科学院上海实验动物中心提供 )为供鼠 ,ＢＡＬＢ/ｃ(Ｈ 2 ｄ)鼠 (雌性 ,清洁级 ,8～ 12周龄 ,18～ 2 2ｇ ,中山医科大学实验动物中心提供 )为受鼠 ,…     

956对夫妇外周血染色体核型与不良孕产史的关系

目的探讨不良孕产史与染色体核型异常的关系。方法取患者的外周血进行无菌培养、制片及G显带技术进行染色体核型分析。结果通过对956对夫妇染色体核型分析,发现异常核型209例,异常率为11.77%。其中臂间倒位13例,占6.22%;平衡易位28例,占13.40%;性染色体异常2例,占0.96%;染色体多态性163例,占异常总数的77.99%;其他异常3例,占1.43%。结论染色体异常以及多态性是导致不良孕产史的重要因素,因此,染色体核型分析应作为优生优育的常规检查,从而提高人口素质,降低先天性出生缺陷。     

pH值改变对大鼠离体冠状动脉静息张力的影响及机制

目的研究在基础张力状态下,不同pH对大鼠冠状动脉血管静息张力的影响并探讨机制。方法采用离体血管张力记录方法,大鼠冠状动脉环的张力舒缩状态采用PowerLab和DMT系统记录。观察pH值梯度改变对大鼠冠脉血管环张力的影响。观察内外钙、Na＋/Ca2＋交换体抑制剂KB-R7943（1×10-6 mol/L）、氯离子通道阻断剂NPPB（3×10-5 mol/L）、钙通道阻断剂维拉帕米（1×10-5 mol/L）、Na＋/H＋交换体抑制剂氨氯吡咪（AM,3×10-5 mol/L）、Na＋-K＋-ATP酶抑制剂哇巴因（1×10-6 mol/L）、NO合酶抑制剂L-NAME（1×10-4 mol/L）对浴液pH6.4时冠脉张力的影响。结果随胞外pH值逐渐降低,大鼠离体冠脉血管环的静息张力逐渐增强。外钙内流和内钙释放均参与pH6.4时的冠脉收缩,钙通道阻断剂Verapamil可部分阻断冠脉收缩幅度的升高。与对照组相比,KB-R7943、哇巴因对pH6.4时冠脉收缩幅度无显著影响（P〉0.05）;NPPB、氨氯吡咪均可抑制pH6.4时冠脉收缩幅度的升高（P〈0.05）;L-NAME可增强pH6.4时冠脉收缩幅度（P〈0.05）。结论酸中毒时,随胞外pH值降低,大鼠冠脉的静息张力升高。其作用机制可能与内外钙、氯通道、Na＋/H＋交换有关。     

类器官在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一,目前卵巢癌的研究大多使用细胞株和异种移植,但是都有其相应的局限性。因此,需要一个合适的诊断和治疗卵巢癌的临床前研究模型。类器官是一种新兴的3D培养模型,该模型具有培养简单、遗传稳定性好、与原发肿瘤高度同源、能维持肿瘤的遗传异质性,但该技术在卵巢癌的研究仍处在早期阶段。现有研究探讨了卵巢癌类器官的构建,并利用输卵管和卵巢上皮类器官证明卵巢癌二重起源发病的机制及其相关基因功能;其还可用作化疗药物筛选的工具,其药物反应与患者体内用药状态高度一致,可以为患者量身定制治疗策略,实现个体化治疗;另外,在免疫治疗方面也可以利用气-液界面培养或类器官与自体炎症细胞共培养方法以及微流体技术,重现肿瘤免疫微环境,可进行免疫治疗药物的功能测试。这些研究成果表明类器官是卵巢癌研究中一种新颖可靠的临床前模型,将在精准医学中发挥重要作用。     

免疫抑制剂FK506对大鼠移植性肝癌肿瘤生长和脾转移的影响

目的 观察在大鼠移植性肝癌模型中不同FK506剂量下肿瘤的大小和侵润以及脾脏转移情况,用以评价FK506对肝癌细胞增殖和转移的情况.方法在Wistar大鼠肝左叶种植walker-256细胞株成瘤的癌组织块以构建转移性肝癌模型,54只大鼠随机分为FK506低剂量组(0.5 mg/kg*d),正常剂量组(1.0 mg/kg*d)和空白对照组,测量肿瘤大小,通过病理组织学观察7、14、21 d脾脏转移发生率和中位数.结果与空白组相比,第14、21天两个剂量组肝癌体积明显增大(P<0.05);同时也出现了脾转移,第14天FK506各组转移中位数均不同.根据病理组织学,各组脾转移的发生率没有明显性差异.结论用药早期,脾脏还存在免疫功能,免疫抑制剂不能完全压制抗肿瘤效应.低剂量FK506也许有利于减少癌症脾转移,仍需进一步的探讨FK506低剂量长期使用在肝癌复发和转移的作用.     

细胞毒药物(Gemcitabine)治疗人胰腺癌裸鼠胰腺原位移植癌的实验研究

目的 探讨细胞毒药物（Gemcitabine)对胰腺癌裸鼠原位移植模型（SOI）生长，转移的抑制作用。方法　SOI模型分为Ⅰ组（Gemcitabine 100mg/kg),Ⅱ组（Gemcitabine50mg/kg)和对照组。Gemcitabine于术后第2，3，6，9天给药，ip，术后第10周处死裸鼠；并对肿瘤组织的增殖指数（PI），凋亡指数（AI）以及PI/AI进行分析。结果 （1）Ⅰ组能显著抑制胰腺癌生长，Ⅱ组则无显著的肿瘤抑制作用，但两者对胰腺癌转移和预后均无显著疗效；（2）Ⅰ组可显著降低肿瘤增殖指数（PI），增大凋亡指数（AI），PI/AI显著降低。结论 Gemcitabine单用能有效抑制胰腺癌生长，但对肿瘤转移无显著抑制作用。     

西罗莫司对肝癌肝移植术后肿瘤复发的抑制作用

目的探讨联合西罗莫司的联合免疫抑制方案对肝癌肝移植术后肿瘤复发的抑制作用。方法选用Wistar大鼠40只,建立大鼠肝癌肝移植术后肿瘤复发模型,实验组予(SRL MP CSA),对照组(MP CSA),观察60 d,死后剖腹探查取病理检查。对比结果。结果实验组荷瘤大鼠荷瘤肝重为(12.5±0.2)g,较对照组(14.4±0.3)g轻,差异有统计学意义(P<0.05);实验组荷瘤大鼠荷瘤肝重比为(0.0613±0.0006),较对照组(0.0708±0.0013)小,差异有统计学意义(P<0.05);实验组复发率为90%,对照组为95%,差异无统计学意义(P>0.05);实验组生存时间为(25.0±1.9)d,对照组为(14.8±2.3)d,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组大鼠PCNA指数为(64.1±2.1)%,较对照组(80.8±1.0)%低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用联合西罗莫司的联合免疫抑制方案虽然对肿瘤复发率改善不明显,但能够有效抑制肿瘤的生长速度、延长带瘤生存时间。     

槲皮素对内分泌耐药乳腺癌三苯氧胺治疗增敏作用的体内研究

目的:探讨槲皮素(QUE)对内分泌耐药乳腺癌三苯氧胺(TAM)治疗的增敏作用。方法:用大剂量TAM冲击法构建TAM耐药乳腺癌细胞株MCF-7/TAM-R并移植裸鼠后,将荷瘤鼠随机分为4组,分别给予溶媒(对照组)、QUE 50 mg/kg 1次/2 d(QUE组)、TAM 5 mg/kg 1次/d(TAM组)、QUE 50 mg/kg 1次/2 d+TAM 5 mg/kg 1次/d(QUE+TAM组)处理,动态观测各组荷瘤鼠的一般情况与瘤体体积的变化,于给药21 d后,处死各组荷瘤鼠,检测瘤体质量及瘤组织ERα、HER-2、pMAPK、MAPK、pAkt、Akt蛋白的表达。结果:给药过程中,QUE+TAM组和QUE组裸鼠摄食减少、体质量减轻,对照组与TAM组裸鼠无明显异常;至第12天开始,QUE+TAM组瘤体生长呈下降趋势,且第21天明显下降(P0.05),其余各组瘤体均呈持续增长。与对照组比较,QUE+TAM组瘤体质量明显减轻(P0.05),而其余两组均无统计学差异(均P0.05);QUE+TAM组和QUE组瘤组织中ERα蛋白高表达,HER-2、pMAPK、pAkt蛋白低表达,而TAM组上述蛋白表达均无明显差异,各组非磷酸化的MAPK、Akt蛋白表达均无明显差异。结论:QUE能恢复内分泌耐药乳腺癌对TAM的敏感性,可能与其下调HER-2及其下游信号pMAPK、pAkt的表达,并上调ERα的表达有关;QUE有潜在的毒副作用,其安全范围及有效剂量有待进一步探讨。     

靛玉红衍生物PHⅡ-7通过抑制c-fos表达抗乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖

目的:探讨靛玉红衍生物PHⅡ-7抗乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖作用的初步机制。方法:MTT法检测PHⅡ-7的体外杀伤活性;RT-PCR法、Western blot法检测基因、蛋白表达水平;构建干扰c-fos的短发夹RNA真核表达载体,转染MCF-7/ADR细胞,并建立稳定转染的细胞系;采用细胞计数法绘制生长曲线探讨c-fos表达下调对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:PHⅡ-7剂量依赖性地抑制乳腺癌敏感株MCF-7及耐药株MCF-7/ADR增殖;c-fos在耐药株MCF-7/ADR表达明显高于敏感株MCF-7;PHⅡ-7明显抑制c-fos的表达;shRNA显著抑制了c-fos蛋白表达,细胞增殖也被显著抑制。结论:靛玉红衍生物PHⅡ-7浓度依赖性地抑制乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖,其作用可能与抑制原癌基因c-fos有关。     

大鼠鞘内腺苷同类物CHA抗神经病理性疼痛作用

目的 探讨大鼠鞘内注射腺苷同类物CHA(Cyclohexyladenosine)抗神经病理性疼痛作用.方法 雄性SD大鼠,鞘内留置PE-10导管,一周后制作大鼠脊神经结扎神经病理性疼痛模型(SNL).将30只SNL大鼠随机分成5组(n=6):对照组(生理盐水)、CHA组(CHA 0.1,0.5,1.0 nmol)、拮抗组(CHA 1.0 nmol 格列本脲2.0 μg).测定各组鞘内给药前、给药后10,20,30,40,50,60 min各时点的大鼠机械撤足阈值,计算对应时点的最大效应百分比(%MPE),评价抗神经病理性疼痛效果.结果 CHA 0.5及1.0 nmol组抗神经病理性疼痛最大效应百分比均明显高于生理盐水组(P＜0.05).CHA 1.0 nmol 格列本脲2.0 μg组抗神经病理性疼痛最大效应百分比明显低于CHA 1.0 nmol组(P＜0.05).结论 鞘内注射CHA具有明显的抗神经病理性疼痛作用,鞘内预注格列本脲(三磷酸腺苷敏感型K 通道阻滞剂)能拮抗CHA抗神经病理性疼痛作用.