建立测定兔眼角膜中盐酸特比萘芬含量的甲醇浸提-HPLC法

目的:建立测定兔眼角膜中盐酸特比萘芬含量的方法。方法:取日本大耳白兔18只,随机分为6组,每组3只,双眼给予0.2%盐酸特比萘芬滴眼液50μl。分别于给药后15、30、60、120、240、480 min时处死兔,剖取角膜,加入甲醇,充氮气,密封冷藏静置浸泡24 h后,涡旋,离心,取上清液采用高效液相色谱法测定其中盐酸特比萘芬的含量。色谱柱为Waters X-Bridge C18,流动相为甲醇-水(92∶8),流速为0.7 ml/min,检测波长为224 nm,柱温为40℃,进样量为20μl。结果:在兔眼角膜醇浸提液中盐酸特比萘芬检测质量浓度在0.007 64~0.382μg/ml(r=0.999 8,n=6)范围内与峰面积呈良好的线性关系;方法回收率为99.6%(RSD=4.5%,n=3),提取回收率为98.5%~103.2%(RSD=6.8%~11.0%,n=3);日内RSD为4.1%(n=5),日间RSD为4.5%(n=5)。给药480 min后仍可测得盐酸特比萘芬,其质量浓度为(0.102±0.043 3)μg/ml。结论:本方法专属性强、准确度高,可用于兔眼角膜中盐酸特比萘芬的含量测定。     

肿瘤靶向NGR/LPD复合物对人乳腺癌裸鼠移植瘤作用的研究

目的观察肿瘤靶向NGR／LPD复合物对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法抑瘤实验设有空白对照组、反义核酸组、正义NGR／LPD组、PEI／ASODN组、LPD组、NGR／LPD组。其中,PEI／ASODN组、LPD组及NGR／LPD3组分别设置高低浓度组（100μl,200μl）作对照考察剂量-效应相关性。通过激光共聚焦显微镜观察药物在裸鼠体内的分布情况。RT—PCR检测hTERTmRNA表达水平,免疫组化检测hTERT蛋白表达的变化。TUNEL法观察肿瘤细胞的凋亡情况。结果体内分布实验表明,NGR／LPD复合物具有肿瘤靶向性,未经NGR修饰的ASODN、LPD及PEI／ASODN则极少分布在肿瘤组织中。NGR／LPD组的瘤体生长最为缓慢,其最大抑瘤率与其他各组相比具有显著差异（P〈0．05）,hTERT mRNA和端粒酶活性表达明显低于各对照组（P〈0．05）,hTERT蛋白表达量下降,肿瘤细胞的凋亡指数明显高于各对照组（P〈0．05）。结论NGR／LPD在体内有很好的肿瘤靶向性和抑制肿瘤细胞生长的作用。     

典型脑出血死亡1例分析

目的进一步加强认识人工瓣膜替换术后患者需要注意的事项,总结患者抗凝治疗中脑出血的预防、救治的经验教训。方法通过对1例典型脑出血患者死亡病例分析,了解患者死亡原因。结果该脑出血患者死因为脑出血及心内膜炎。结论人工瓣膜替换术后患者拔牙要着重严防心内膜炎的发生,了解抗凝治疗的必要性、方法,出院后复查凝血酶原时间,对已经发生的出血事件及时对抗治疗。     

高效液相色谱法测定枸橼酸他莫昔芬凝胶剂在大鼠组织内的分布

目的:研究枸橼酸他莫昔芬凝胶剂经大鼠乳腺组织周围皮肤局部给药后在大鼠体内组织的分布。方法:SD大鼠50只,随机分成实验组和对照组,各组25只大鼠。对照组按10mg/kg的剂量灌胃给予枸橼酸他莫昔芬丙二醇溶液,实验组按50mg/kg的剂量将枸橼酸他莫昔芬凝胶剂均匀涂布于大鼠乳腺组织周围。2组大鼠均每24h给药1次,连续给药3d,并于末次给药后0、4、8、12、24h处死大鼠,剖取乳腺、肝脏、子宫及卵巢等组织,采用HPLC法测定不同组织中枸橼酸他莫昔芬的分布。结果:2组大鼠乳腺组织中枸橼酸他莫昔芬到达峰值时间均为4h,各时间点实验组浓度均高于对照组(t=7.183、7.788、8.078、5.804和5.442,P均<0.001);2组其他各组织不同时间点他莫昔芬浓度间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:枸橼酸他莫昔芬凝胶剂经乳腺组织周围皮肤局部给药后可显著增加乳腺组织对药物的吸收。     

分析尿毒清颗粒辅助治疗糖尿病肾功能衰竭近期疗效

目的分析尿毒清颗粒辅助治疗糖尿病（DM）肾功能衰竭近期疗效。方法选取DM肾功能衰竭患者122例,随机将患者平均分为试验组和对照组。患者首先给予对症和支持治疗,对照组口服爱西特,试验组口服尿毒清颗粒冲剂。治疗前后行血常规、尿常规、肾功能和24h尿蛋白定量检测,同时观察疗效及不良反应。比较2组患者相关参数的异同。结果治疗后,试验组患者BUN、SCr、24h尿蛋白定量和不良反应发生率显著低于对照组（P〈0.05）,而CCr、Hb和有效率显著高于对照组（P〈0.05）。结论尿毒清颗粒效辅助治疗DM肾功能衰竭的近期疗效显著,是一种治疗DM肾功能衰竭患者较好的非透析疗法。     

脂质体介导的hTERT PEI/ASODN缩合体对乳癌MCF-7细胞生长及hTERT表达的影响

目的:探讨脂质体介导的人端牲酶逆转录酶(hTERT)聚乙烯亚胺(PEI)/反义寡核苷酸(ASODN)缩合体对乳癌MCF-7细胞生长及hTERT表达的影响.方法:MCF-7细胞分为3组,分别转染ASODN、PEI/ASODN和脂质体PEI/ASODN,采用激光共聚焦扫描观察摄人情况.另取MCF-7细胞分为9组:空白对照组、ASODN组、SODN组、溶媒组、空白脂质体组、PEI/ASODN组、PEI/SODN组、脂质体-PEI/ASODN组和脂质体-PEI/SODN组.转染后不同时间,分别采用MTT法、RT-PCR及免疫细胞化学方法检测MCF-7细胞的生长情况、hTERT蛋白以及mRNA的表达.结果:脂质体介导的hTERT PEI/ASODN缩合体可以进入细胞内.转染后24、48和72 h,9组间光密度值相比,差异均有统计学意义(F=11.187、30.283和33.080,P均<0.001).与空白对照组相比,PEI/ASODN组、PEI/SODN组及脂质体-PEI/ASODN组光密度值降低(P<0.05).与空白对照组相比,转染48 h后hTERT蛋白和hTERT mRNA表达降低.结论:脂质体介导的hTERT PEI/ASODN缩合体能够有效进入细胞内,抑制MCF-7细胞的生长,其作用可能与抑制细胞中hTERT mRNA及蛋白的表达有关.     

探讨琥珀酸亚铁治疗股骨转子间骨折后隐性失血的疗效

目的 探讨琥珀酸亚铁治疗股骨转子间骨折(IFF)后隐性失血的疗效.方法 选取确诊IFF患者128例,男56例,女72例；年龄55～85(71.8±6.6)岁.所有患者均行手术内固定治疗,根据是否采取干预措施,将患者随机平均分成治疗组和对照组,治疗组术后给予口服琥珀酸亚铁治疗12周,对照组未采取任何干预.分别于术前、术后1d、3d、7d、1月、3月和6月行血常规检查和功能独立性评分系统(FIM)评价关节功能情况.比较2组患者相关参数异同.结果 治疗组术后1月、3月及6月Hb含量和FIM评分显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)；术前、术后1d、3d和7d2组患者Hb含量差异无统计学意义(P＞0.05),术前和术后7dFIM评分差异无统计学意义(P＞0.05).2组患者术后1d、3d和7dHb含量均显著低于术前(P＜0.05).结论 琥珀酸亚铁是一种治疗IFF后隐性失血的有效方法.     

载基因纳米阳离子脂质体前体制剂的制备及性质研究

目的:制备稳定的载反义寡核苷酸的阳离子脂质体前体制剂。方法:以磷脂-二油酰磷脂酰乙醇胺(dioleoylphophatidylethanolamine,DOPE)-十八胺-胆固醇为类脂成分,采用薄膜超声-挤压制备空白阳离子脂质体,吸附-冷冻干燥法制备载反义寡核苷酸阳离子脂质体前体。激光粒度仪测定冷冻干燥前后脂质体Zeta电位及粒径,透射电镜观察其形态,葡聚糖凝胶柱分离未包封的反义寡核苷酸,紫外法测定冻干前后的载药率。结果:海藻糖与甘露醇及甘氨酸为较好的冻干保护剂,制得的阳离子脂质体前体带正电荷,规则球形,大小较均匀,海藻糖作为保护剂复溶前后平均粒径为175和320 nm左右,复融前后Zeta电位值在+32和+40 mV左右,脂质体的载药率复溶前后分别为87.6%与83.21%。结论:海藻糖作为冻干保护剂,薄膜超声挤压法与冷冻干燥法结合,可成功制备反义寡核苷酸阳离子脂质体前体制剂,稳定性大大改善。     

替罗非班调节SIRT1/VEGF信号通路对急性脑梗死大鼠神经元损伤的影响

目的 探讨替罗非班（tirofiban）通过沉默信息调节因子2相关酶/血管内皮生长因子（SIRT1/VEGF）通路对急性脑梗死（ACI）大鼠神经元损伤的影响。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、替罗非班组（60 μg/kg）、抑制剂组（5 mg/kg SIRT1特异性抑制剂EX-527）、替罗非班+抑制剂组,每组15只,除假手术组外,其它各组构建ACI模型。实验结束后,对各组大鼠进行神经功能评分;2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色检测大鼠脑梗死体积所占百分数;试剂盒检测大鼠血清中丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性;苏木精-伊红（HE）染色检测大鼠脑组织病理变化;TUNEL染色检测大鼠神经元细胞凋亡;Western Blot检测大鼠脑组织中SIRT1、VEGF蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠脑组织海马区病理损伤严重,神经功能评分、脑梗死体积百分数、MDA含量、神经元细胞凋亡率显著升高,GSH-Px、SOD活性及SIRT1、VEGF蛋白显著降低（P<0.05）;与模型组比较,替罗非班组、替罗非班+抑制剂组大鼠脑组织海马区病理损伤减轻,神经功能评分、脑梗死体积百分数、MDA含量、神经元细胞凋亡率显著降低,GSH-Px、SOD活性及SIRT1、VEGF蛋白显著升高,而抑制剂组大鼠对应指标变化呈相反趋势（P<0.05）;抑制剂EX-527可减弱替罗非班对ACI大鼠的保护作用（P<0.05）。结论 替罗非班可能通过激活SIRT1/VEGF通路,抑制氧化应激反应和神经元细胞凋亡,进而减轻ACI大鼠神经元损伤。