滋肾清肝降糖方对2型糖尿病大鼠蛋白酪氨酸磷酸酶1B及氧化应激的影响

目的:研究滋肾清肝降糖方(ZQJC)对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖代谢、蛋白酪氨酸磷酸1B(PTP1B)表达及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和游离脂肪酸(FFA)的影响。方法:70只雄性SD大鼠随机抽取10只大鼠为正常组,其余大鼠采用高脂饲料喂养联合ip 30 mg·kg-1链脲佐菌素(STZ)的方法造T2DM模型,分为模型组、二甲双胍组(Met,0.14 g·kg-1·d-1,ig)、滋肾清肝降糖方低剂量组(0.9 g·kg-1·d-1,ig)、滋肾清肝降糖方中剂量组(1.8 g·kg-1·d-1,ig)及滋肾清肝降糖方高剂量组(3.6 g·kg-1·d-1,ig)。检测药物干预2,4周后各组大鼠空腹血糖(FBG)以及4周后各组大鼠血清中SOD,MDA,FFA的水平及肝细胞匀浆中PTP1B蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组的FBG均升高(P0.01),PTP1B在肝中的表达增加(P0.01);与模型组比较,ZQJC各剂量组可显著降低大鼠血清FBG,FFA和MDA的含量(P0.01,P0.05),升高血清SOD的活性(P0.05),ZQJC可降低PTP1B在肝中的表达。结论:滋肾清肝降糖方对2型糖尿病大鼠有调节糖代谢的作用,抑制PTP1B表达及氧化应激反应可能为其作用机制之一。     

人脐带血清用于人未成熟卵母细胞体外成熟培养并获得妊娠的观察

目的:以人脐带血清作为卵母细胞体外成熟培养(IVM)培养液的主要成份开展IVM技术研究,旨在为IVM临床妊娠率的提高,IVM技术的进步探索一条新路。方法:47例、47个周期的PCOS患者接受了IVM技术的治疗。未成熟卵母细胞分别入IVM培养液Ⅰ(含人成熟卵泡液,卵泡液组)和IVM培养液Ⅱ(含脐带血清,脐带血清组)行体外成熟培养,分析人脐带血清对IVM结果影响。结果:脐带血组:15周期,160枚未成熟卵母细胞,体外成熟过程中,成熟率、优质胚率及临床妊娠率分别为93.75%(150/160)、50.00%(60/120)和40.00%(6/15),已分娩4例,另2例处于妊娠阶段;卵泡液组:32周期,未成熟卵母细胞349枚,成熟率、优质胚率分别为77.08%(269/349)和23.77%(53/223),胚胎移植31周期,获得7例临床妊娠,妊娠率为22.58%(7/31),目前已分娩4例,3例流产。成熟率和优质胚率方面,脐带血组高于卵泡液组。结论:人脐带血清作为IVM液的主要成份相对于人成熟卵泡液,将更加有助于未成熟卵母细胞的体外成熟培养、改善胚胎质量,并获得较好的妊娠结局。     

两种人工激活剂对卵胞浆内单精子注射后未受精卵母细胞激活效果的比较

目的观察两种不同的人工激活剂对行卵胞浆内单精子注射（ICSI）后未受精卵母细胞的激活作用及效果。方法收集ICSI后24h未受精的人类成熟卵母细胞,分别采用乙醇和离子霉素进行激活处理。16～18h后观察第二极体排出及原核形成情况。激活后正常受精的胚胎继续培养3～5d。统计两组的激活率、原核形成情况、卵裂率及后期胚胎发育情况。结果乙醇处理组的激活率为65．6％（21／32）,离子霉素处理组的激活率为83．7％（36／43）,离子霉素处理组的激活率显著高于乙醇处理组（P〈0．05）;乙醇激活处理后共有10个卵母细胞表现为2PN＋2PB,占被激活卵母细胞的47．6％（10／21）,离子霉素激活处理后有24个卵母细胞表现为2PN＋2PB,占被激活卵母细胞的66．7％（24／36）,两组差异无统计学意义（P〉0．05）;乙醇激活组卵母细胞有4个发育到2～4细胞,2个发育到5～8细胞,1个发育到8细胞以上阶段,获1枚桑葚胚;离子霉素激活组卵母细胞有9个发育到2～4细胞,5个发育到5～8细胞,3个发育到8细胞以上阶段,最终获得2枚囊胚和1枚桑葚胚。结论两种激活剂均能激活ICSI后24h未受精的人类成熟卵母细胞恢复受精,并继续发育成胚胎;离子霉素比乙醇更适宜对ICSI后未受精卵母细胞的激活。     

不同外科手术取精方法与精子发生对无精子症患者卵泡浆内单精子显微注射临床结局的影响

目的 通过对无精子症患者卵泡浆内单精子显微注射(ICSI)临床结局的分析,探讨不同外科手术取精方法与睾丸精子发生对ICSI临床结局的影响.方法 回顾性分析112个梗阻性无精子症(OA)患者和42个非梗阻性无精子症(NOA)患者ICSI周期的临床结局.OA组分为2个亚组51个经皮附睾穿刺(PESA)周期与61个睾丸细针睾丸穿刺(TEFNA)周期ICSI周期.统计学方法采用t检验和χ2检验.结果 TEFNA组与PESA组比较,受精率、卵裂率、临床妊娠率及流产率差异均无统计学意义;而NOA组较OA组受精率、卵裂率、临床妊娠率显著降低,而2组间流产率未见统计学差异.结论 无精子症患者ICSI临床结局受到睾丸精子发生状态而非取精手术方法的影响.     

经直肠输精管壶腹部、精囊腺、前列腺按摩取精术用于IVF-ET取卵日取精失败附4例报告

随着现代辅助生殖技术的发展,体外受精-胚胎移植(IVF-ET)及其相关技术成为治疗不孕不育症主要方法之一,对于精液中有精子者一般通过患者手淫取精用于体外受精.     

人成熟卵泡液在人未成熟卵母细胞体外培养中的应用

卵母细胞体外成熟(IVM)培养主要用于治疗多囊卵巢综合征(PCOS)[1] 及诱导排卵中卵巢反应不良等症。虽然 IVM在临床已实践了 10 多年,但IVM卵母细胞的妊娠率远低于常规卵母细胞的妊娠率[2]。本研究旨在实验一种可用于临床的 IVM培养液,改善临床妊娠率。一、资料和方法1.对象: 2003年8~12月在我院生殖中心行未成熟卵IVM治疗 14 例、14 个周期的 PCOS 患者。诊断标准: 月经稀发或闭经、肥胖、不育;阴道超声提示双侧卵巢每一平面均有> 8 个最大直径< 10mm的小卵泡;月经第3天激素检查黄体生成素/卵泡刺激素(LH/FSH)≥2、泌乳素(P…     

不同冷冻载体对小鼠MⅡ期卵母细胞玻璃化冻、融技术影响

目的比较不同冷冻方法对小鼠成熟卵母细胞的冻存率和冻后发育潜能的影响,试图建立玻璃化冷冻技术平台,为人类卵母细胞玻璃化冷冻提供理论与技术参考。方法以昆明品系小鼠为实验材料、以玻璃化冷冻技术为基本方法冻存小鼠成熟卵母细胞。实验分为新鲜周期对照组和玻璃化冷冻组,玻璃化冷冻组又再分为开放式拉长麦管(OPS)组、自制麦管组和冷冻叶片(cryoleaf)组,比较其存活率、受精率、卵裂率和囊胚形成率。结果新鲜周期对照组和玻璃化冷冻组之间受精率差异无显著性,卵裂率差异亦无显著性(P>0.05),但是囊胚形成率之间差异有显著性(P<0.05);OPS组与自制麦管组之间存活率、受精率、卵裂率、囊胚形成率之间差异均无显著性(P>0.05);OPS组与cryoleaf组比较存活率之间差异有显著性(P<0.05),受精率、卵裂率、囊胚形成率之间差异均无显著性(P>0.05);自制麦管组与cryoleaf组之间存活率之间差异有显著性(P<0.05),而受精率、卵裂率、囊胚形成率之间差异无显著性(P>0.05)。结论OPS法和cryoleaf法均可以用于冷冻昆明小鼠卵母细胞,但cryoleaf法更安全可靠。     

去颗粒方法对卵母细胞冻融的影响

目的:探讨去除卵母细胞周围部分颗粒细胞对冻融后卵母细胞发育潜能的影响。方法:将来源于行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者捐赠的43枚多余成熟卵母细胞(MⅡ期)随机分为A、B两组,在不同条件下进行慢速冷冻法冻融。根据不同的去除卵母细胞周围部分颗粒细胞的方法将卵母细胞分为两组,A组:21枚,透明质酸酶消化法去颗粒;B组:22枚,机械法去颗粒。观察不同的去颗粒方法对冻融后的卵母细胞存活率、受精能力及胚胎早期发育力的影响。结果:A组存活率(52.38%vs 77.27%)、受精率(63.64%vs 70.59%)及卵裂率(57.14%vs 75.00%)均略低于B组,但无显著性差异;两组优质胚胎率(50.00%vs 55.56%)、桑葚胚率(25.00%vs 22.22%)及囊胚率(25.00%vs 11.11%)也均无显著性差异(P>0.05)。结论:不同的去颗粒方法不影响卵母细胞冻融后的发育潜能。     

人分泌早期子宫内膜共培养体系对早期鼠胚凋亡的影响

目的研究人分泌早期子宫内膜共培养体系对早期鼠胚凋亡的影响。方法将2一细胞期鼠胚与子宫内膜(A冻融、B传代)共培养以及单一培养液培养(C组)。72h后对桑椹期鼠胚用TUNNEL法进行凋亡检测。结果共培养组鼠胚的凋亡率明显低于单一培养组，且不受内膜细胞传代及冻融的影响；共培养组优质胚胎数均高于对照组，而共培养组之间无明显差异。结论共培养人分泌早期子宫内膜能减少早期鼠胚的凋亡，提高胚胎体外发育的质量，延长体外培养时间。