医学院校非直属型教学医院教学现状分析与对策研究——以我校邵东临床教学医院为例

近年来,医学院校招生规模不断扩大,但医学院校直属的附属医院教学规模有限,已无法承担日益繁重的临床教学任务.在新形势下,医学院校通过与综合实力较强的医院共同建立非直属型教学医院来改善临床教学基地不足的情况.临床教学医院在完成繁重医疗工作的同时又承担着临床教学任务,使临床教学医院建设无论在教学管理上,还是在保证教学质量方面都面临着巨大的挑战[1].     

maspin、Mn-SOD表达与鼻咽癌组织放疗敏感相关性研究

目的 研究maspin及Mn-SOD在放射治疗鼻咽癌中的表达,探讨其在放射治疗鼻咽癌中的意义.方法 取60例2006年第1次入院放射治疗鼻咽癌,运用原位杂交方法检测放射治疗鼻咽癌中maspin及Mn-SOD mRNA的表达.结果 在放疗敏感及放疗抗拒鼻咽癌中,maspin mRNA中度及强阳性表达率分别为70.00％和42.50％,Mn-SOD mRNA中度及强阳性表达率分别为55.00％和40.00％,差异有统计学意义.在放疗抗拒鼻咽癌中,maspin及Mn-SOD mRNA中度及强阳性表达率均与T分期呈正相关,T3和T4期中表达率分别为63.16％和63.16％,T1和T2期中表达率分别为23.81％和19.05％.在有、无远处转移中,maspin mRNA中度及强阳性的表达率分别为72.73％和31.03％,Mn-SOD mRNA中度及强阳性表达率分别为81.82％和24.14％,差异有统计学意义.结论 maspin、Mn-SOD参与了放射抗拒鼻咽癌的发展.     

高职高专口腔专业病原生物学和免疫学教学改革的探索与实践

病原生物学和免疫学是联系基础医学与临床医学的纽带，根据本学科内容繁杂、抽象、理论多的特点，在教学中对教学内容、教学方法等进行改革，进一步提高教学质量。     

乳铁蛋白负向调控TLR2激动剂诱导的人肺上皮细胞细胞因子分泌

目的观察乳铁蛋白对Toll样受体2(TLR2)激动剂Pam3CSK4刺激人肺上皮细胞分泌促炎细胞因子的影响,并探索其潜在的机制。方法体外培养人肺上皮细胞系NCI-H292,采用100 ng/ml Pam3CK4联合100、200和400μg/ml乳铁蛋白孵育细胞。ELISA检测乳铁蛋白处理前后培养上清TNF-α和IL-8分泌的变化;实时定量PCR和ELISA检测短腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1)蛋白和m RNA表达的影响。提取细胞核蛋白,ELISA测定乳铁蛋白处理前后NF-κB活性的变化,采用Western blot检测IκB的表达;并用siRNA沉默NCI-H292细胞SPLUNC1,观察其对TNF-α和IL-8分泌的影响。结果 100、200和400μg/ml乳铁蛋白预处理肺上皮细胞后,可下调Pam3CK4诱导分泌TNF-α和IL-8。实时定量PCR结果显示,100、200和400μg/ml乳铁蛋白处理后,SPLUNC1 mRNA水平明显增高,并呈一定的剂量依赖性,ELISA也得到了类似的结果。采用转录和翻译抑制剂放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)预处理,可显著降低乳铁蛋白诱导SPLUNC1的表达。此外,乳铁蛋白处理可抑制Pam3CK4激活NF-κB,主要表现为NF-κB的DNA结合活性降低、IκB降解减少。siRNA沉默SPLUNC1表达后,可明显削弱乳铁蛋白对TNF-α和IL-8的抑制作用。结论乳铁蛋白对Pam3CK4诱导的细胞因子分泌具有抑制作用,其机制与上调SPLUNC1表达、抑制NF-κB的活性有关。     

TNFAIP3､Mn-SOD在放射治疗鼻咽癌中的意义

目的 :研究肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(tumor necrosis factor alpha induced protein 3,TNFAIP3)、锰超氧化物歧化酶(Manganese superoxide dismutase,Mn-SOD)m RNA在放射治疗后鼻咽癌中的表达,探讨其在鼻咽癌放射治疗中的意义。方法 :运用原位杂交方法检测放射治疗后鼻咽癌中TNFAIP3及Mn-SOD m RNA的表达。结果:TNFAIP3 m RNA中度及强阳性表达率在放疗敏感鼻咽癌中为15.00%,在放疗抗拒鼻咽癌中为45.00%;Mn-SOD m RNA中度及强阳性表达率在放疗敏感鼻咽癌中为55.00%,在放疗抗拒鼻咽癌中为40.00%,差异均有统计学意义(P均<0.05)。在放疗抗拒鼻咽癌中,TNFAIP3 m RNA中度及强阳性表达率与TNM分期呈正相关,Ⅲ~Ⅳ期表达率为48.28%,Ⅰ~Ⅱ期表达率为36.36%,Mn-SOD m RNA中度及强阳性表达率与T分期呈正相关,T3~T4期中表达率为63.16%,T1~T2期中表达率为19.05%;TNFAIP3 m RNA中度及强阳性表达率在有远处转移的放疗抗拒鼻咽癌中为81.81%,在无远处转移的放疗抗拒鼻咽癌中为31.03%,Mn-SOD m RNA中度及强阳性表达率在有远处转移的放疗抗拒鼻咽癌中为81.82%,在无远处转移的放疗抗拒鼻咽癌中为24.14%,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:TNFAIP3参与了放疗抗拒鼻咽癌的发生、发展;Mn-SOD能增加鼻咽癌的放射敏感性,增强放疗鼻咽癌的抗氧化作用。     

生物钟基因hClock、hBmal1在结直肠肿瘤中的意义

目前,国、内外对生物钟基因的研究多停留在哺乳动物或体外培养细胞的研究,对人结直肠肿瘤中生物钟基因的研究很少.     

肺炎克雷伯菌FimA的表达纯化及多克隆抗体的制备

目的表达及纯化肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)菌毛FimA蛋白并制备多克隆抗体。方法在Clustal Omega网站上比对不同细菌FimA蛋白的同源性。设计特异引物,PCR扩增肺炎克雷伯菌FimA基因,双酶切后将其连接到表达质粒pET28a,构建重组质粒pET28a-FimA。将pET28a-FimA转化表达菌BL21 star(DE3)后培养,使用IPTG诱导FimA蛋白表达。使用IEDG在线网站分析FimA蛋白的B细胞表位,然后用层析纯化的重组FimA蛋白免疫小鼠,获得免疫血清,ELISA检测IgG、IgG1、IgG2a和IgA.结果肺炎克雷伯菌的FimA与其他FimA蛋白同源性较低,为23.6%?30.6%。构建的重组质粒PET28a-FimA在大肠埃希菌中能表达21.6×10^3的重组FimA蛋白,经亲和层析后得到单一电泳条带的高纯度目的蛋白。用FimA蛋白免疫小鼠,获得高滴度的IgG和IgA,且IgG2a的A450值高于IgG1.结论成功构建了表达质粒pET28a-FimA,获得高纯度的重组蛋白FimA。FimA具有免疫原性,用该蛋白免疫小鼠获得高滴度的多克隆抗体。     

钟基因hClock、hBmal1在结直肠肿瘤中的 表达

 目的 探讨人类生物钟基因hClock及hBmal1在不同Dukes分期结直肠肿瘤中的表达,研究它们的表达与结直肠肿瘤侵袭及转移的关系。方法 采用原位杂交法检测结直肠肿瘤与相应瘤旁组织中hClock及hBmal1基因mRNA的表达,并采用免疫组织化学检测相应标本中hClock基因蛋白产物（CLOCK蛋白）的表达。结果 32例结直肠肿瘤中hClock mRNA阳性表达率93.75%（30／32）,中或强阳性表达率78.13%（25／32）;hBmal1 mRNA阳性表达率71.88%（23／32）,中或强阳性表达率40.63%（13／32）。两者的中或强阳性率与Dukes分期相关（P<0.05）。阳性表达的肿瘤组织对应肿瘤旁组织hClock及hBmal1基因mRNA的弱阳性表达。CLOCK蛋白中或强阳性表达率87.50%（28／32）,瘤旁组织中CLOCK蛋白弱阳性率93.75%（30／32）（P<0.01）。结论 hClock、hBmal1基因与结直肠肿瘤的发生、发展及侵袭、转移有一定的相关性。     

生物钟基因hClock hBmal1在肿瘤中的表达研究

目的:探讨人类生物钟基因hClock及hBmal1在肿瘤中的表达,研究其在肿瘤发生发展中的意义.方法:采用免疫组织化学检测结直肠肿瘤与相应肿瘤旁组织以及肺癌组织中hClock基因蛋白产物(CLOCK蛋白)的表达,并采用原位杂交检测相应标本hClock及hBmal1基因mRNA的表达.结果:肺癌组织中CLOCK蛋白中度及强阳性表达率与分化程度呈正相关.结直肠良性肿瘤中,CLOCK蛋白中度及强阳性表达率为25.0%(2/8);恶性肿瘤中,中度及强阳性表达率86.5%(32/37).结直肠恶性肿瘤中,hClock mRNA中度及强阳性表达率为75.7%(28/37),hClock mRNA中度及强阳性表达与Dukes'分期呈正相关.37例结直肠恶性肿瘤组织中hBmal1 mRNA中度及强阳性表达率为43.2%(16/37),hBmal1 mRNA中度及强阳性表达与Dukes'分期呈正相关.结论:hClock、hBmal1基因与肿瘤的发生、发展及侵袭、转移有相关性.