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1.
目的 探讨合并糖调节受损早发稳定型冠心病(PSCHD)患者(〈50岁)循环炎症指标与动脉粥样硬化(AS)特征。方法将208例PSCHD患者分为糖调节正常(NGR)组和糖调节受损(IGR)组,分析其临床和生化资料。结果IGR组的BMI、TG、尿酸(UA)、高敏C反应蛋白(hsDRP)、WBC计数、颈动脉内膜中层厚度(IMT)值和斑块比例、代谢综合征和高血压患病率、冠状动脉斑块积分以及多支病变比例均高于NGR组;hsC-RP与WBC计数、BMI及TG正相关,与HDL-C负相关;WBC计数与BMI及UA正相关;P均〈0.05或〈0.01。结论合并IGR的PSCHD患者循环炎症指标和AS程度均显著增加。  相似文献   
2.
EB病毒LMP2A特异性CTL的体外诱导及分析   总被引:1,自引:1,他引:0  
用EBV LMP2A重组痘苗病毒 (rVV LMP2A )转染人树突状细胞 (DC ) ,转染后的DC分别在第 1、 7、 14天刺激相同MHC背景的T细胞 ,在IL 2作用下诱导LMP2A特异性CTL。用LDH释放法检测CTL杀伤活性 ;流式细胞术 (FACS )检测CTL诱导分化过程中CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD5 6 + 等细胞的分群变化 ;RT PCR检测细胞分化过程中FasLmRNA表达 ;生物活性法检测功能性细胞因子IFN γ的分泌。结果显示本法诱导的CTL对靶细胞有特异性杀伤活性 ,第 2次和第 3次DC刺激后杀伤活性有所上升 ;在CTL诱导分化的第 7、 14、 2 1天细胞分群以CD4 + 、CD8+ 细胞为主 ;RT PCR证实所诱导的细胞内有FasLmRNA的表达 ;随细胞培养天数的增加IFN γ分泌增加 ,在第 14天达到较高水平。研究表明重组痘苗病毒载体rVV LMP2A转染的DC刺激T细胞可诱导出EBV LMP2A特异性CTL。  相似文献   
3.
目的:用EBV潜伏膜蛋白2A(EBV-LMP2A)重组腺病毒转染树突状细胞(DC)激发特异性细胞毒性T细胞(CTL),分析CTL的特性。方法:用AdS-LaMP2A重组腺病毒转染EBV健康携带者及鼻咽癌患者的DC,与自体来源的外周血单个核细胞(PBMC)混合培养,激发LMP2A特异性CIL。用LDH释放法检测CIL杀伤活性;流式细胞术(FACS)检测培养细胞群体中CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 、CD56^ 细胞的组成;生物活性法检测细胞培养上清中IFN-γ含量;RT-PCR分析CTL的FasL mRNA表达。结果:EBV健康携带者及鼻咽癌患者的PBMC,经AdS-LMP2A转染的自体DC两次刺激后,都能诱导出显著的EBV-LMP2A特异的CIL。EBV健康携带者CTL的杀伤活性,随DC刺激次数的增加而逐渐增强,诱导的CTL细胞群体以CD^4 和CD8^ 细胞组成为主,且CD4^ 细胞比例高于CD8^ 细胞,另含少量CD56^ 细胞;在不同时段所诱导的CTL上清中,均含一定量的IFN-γ并随刺激次数和诱导时间的延长呈上升趋势;RT-PCR研究表明,所诱导的CTL有FasL mRNA的表达。结论:以腺病毒载体介导EBV-LMP2A基因转染的成熟DC,在体外能激发较强的LMP2A特异的功能性CTL,可用于EBV相关NPC的免疫治疗。  相似文献   
4.
通过EB病毒LMP2A重组痘苗病毒转染的DCS体外诱导LMP2A特异性CTL,并通过GM-CSF、IL-4和TNF-a培养体系,我们诱导出了人外周血单核细胞来源的DC。同时选用在鼻咽癌患者中表达的EB病毒潜伏蛋白之一LMP2A作为靶基因,利用重组痘苗病毒转染诱导的DCS。DCS与自体PBMCS混合培养,在IL-2的刺激作用下获得特异性CTL。结果如下:1.人外周血单核细胞经GM-CSF、IL-4、TNF-a的混合培养,10天可获得成熟的功能性DCS。FACS检测显示DC表面相对特异性标志CD83…  相似文献   
5.
目的:探讨痘苗病毒载体介导爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)潜伏期膜蛋白2A(LMP2A)基因转染树突状细胞(DC)对DC的表型和功能的影响,以及EBV相关肿瘤免疫治疗性疫苗的可行性,方法:用EBV-LMP2A基因重组痘苗病毒(Vac-LMP2A)转染成熟的DC,流式细胞术(FACS)检测转染前后DC表面分子CD1a,CD83,CD40,CD80,HLA-DR变化,3H-TdR掺入法检测转染前后DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖等功能的改变。结果:转染后LMP2A蛋白在DC细胞内高表达,Vac-LMP2A转染成熟DC前后对其表面共刺激分子及特征性表面标志无影响,转染后的DC仍具有较强的刺激同种异体TI林巴细胞增殖的能力。结论:痘苗病毒载体是介导外源基因LMP2A转染DC的有效载体,Vac-LMP2A转染成熟DC对DC表型和功能无明显影响,是EBV相关肿瘤如鼻咽癌免疫治疗的理想载体。  相似文献   
6.
目的:用负载鼻咽癌细胞(CNE)可溶性抗原的树突状细胞(dendritic cells,DC)诱导自身淋巴细胞,使之活化为鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)特异性细胞毒性T细胞(cvtotoxic T lymphocyte,CTL),观察其对鼻咽癌细胞的体外特异性杀伤作用。方法:用GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导健康成人外周血单核细胞,使其分化为高纯度DC。用鼻咽癌细胞(CNE)可溶性抗原负载成熟DC,流式细胞仪检测负载前后DC的表型特征,MLR检测负载前后DC对同种异体T淋巴细胞增殖的能力。在白细胞介素-2(IL-2)的作用下,用负载鼻咽癌细胞可溶性抗原的DC诱导自身淋巴细胞成NPC特异性CTL,通过杀伤活性实验观察它对鼻咽癌细胞(CNE)的特异性杀伤效应。结果:人外周血单核细胞体外在GM-CSF、IL-4、TNF-α诱导下获得具典型表型特征的成熟DC。负载CNE可溶性抗原对成熟DC表面共刺激分子及特异性表面标志无影响,仍有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖能力,所诱导的CTL对鼻咽癌细胞(CNE)有明显的特异性杀伤作用。结论:负载鼻咽癌细胞(CNE)可溶性抗原的DC所诱导的CTL在体外对鼻咽癌细胞有特异性杀伤作用,对NPC的临床治疗有潜在的应用价值。  相似文献   
7.
为了探讨含有EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)抗原表位片断表达的融合蛋白在鼻咽癌血清学检测中的应用意义,通过重叠延伸PCR方法,合成了3对相互重叠的寡核苷酸引物,涵盖LMP2A的主要的4个抗原表位,将它们拼接在一起构建一个多肽融合基因,克隆到PGEX-4T-2载体中表达融合蛋白,以GST亲和层析柱法纯化融合蛋白,鉴定后以此为抗原检测鼻咽癌患者的血清。结果表明,获得了含EB病毒LMP2A主要的4个抗原表位的融合蛋白(EC2A),蛋白纯度达90%以上,ELISA结果显示鼻咽癌患者血清的检出率为77.9%,正常人群血清为阴性,与常规的VCA-IgA法进行比较,有9份(13.3%)血清VCA-IgA为阴性而EC2A-IgG检出阳性,为鼻咽癌的临床检测提供了新思路,也为后续的单克隆抗体制备奠定了基础。  相似文献   
8.
目的探讨慢性冠心病患者炎症反应与核转录因子-κB1—94ins/delALTTG基因多态性特征。方法收集92例慢性冠心病患者(病例组)临床资料、超敏C反应蛋白(hsCRP)和白细胞(WBC)计数;应用PCR—RFLP分析NF-κB1—94ins/delATFG多态性,并与94例非冠心病者(对照组)比较。结果病例组TC、TG、LDL—C、apoB、Lo(a)、hsCRP和WBC计数及吸烟比例均高于对照组(P〈0.05)。两组间NF-κB1基因-94ins、del各基因型和等位基因频率均无显著性差异(P〉0.05)。结论慢性冠心病患者炎症反应标志物升高,NF-κB1—94ins/delATTG基因多态性可能与我国慢性冠心病的易感性无关。  相似文献   
9.
目的 探讨腺病毒载体介导EB病毒(EBV)潜伏期膜蛋白2A(LMP2A)基因转染树突状细胞(DC)对其功能的影响。方法 通过同源重组法构建带有EBV-LMP2A基因的重组腺病毒Ad5-LMP2A,用不同感染滴度(MOI)的Ad5-LMP2A转染成熟的DC,用流式细胞术(FACS)检测DC的LPM 2A蛋白表达细胞百分率及用台盼蓝染色计数DC死亡百分率,选择最佳MOI;用最佳MOI的Ad5-LMP2A转染成熟的DC,FACS检测转染前后DC表面分子CD1a、CD83、CD40、CD80及HLA-DR的变化;并用^3H-TdR掺入法检测转染前后DC刺激同种淋巴细胞增殖能力及荧光定量PCR检测表达IL-12 P40 mRNA等功能的改变。结果 MOI 200为Ad5-LMP2A转染DC的最佳滴度,此时约80%的DC表达LMP2S蛋白及92%以上细胞为活细胞。Ad5-LMP2A转染成熟DC前后对细胞表面共刺激分子及特征性表面标志无影响;转染后的DC仍具有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖能力和表达IL-12 P40 mRNA的功能。结论 腺病毒载体能高效介导EBV LMP2A基因在DC中表达,Ad5-LMP2A转染成熟DC对其功能无明显影响,便于进一步用于EBV相关肿瘤的免疫治疗。  相似文献   
10.
目的探讨合并非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)的早发稳定性冠心病患者(〈50岁)心血管危险因素聚集特征。方法收集106例早发稳定性冠心病患者的临床资料,检测生化指标、超敏C反应蛋白(hsCRP)、白细胞计数,采用国际糖尿病联盟的代谢综合征标准,用B型超声检测合并NAFL及颈动脉粥样硬化(CA)情况,将研究对象按合并NAFL及不同胰岛素抵抗指数(Homa IR)进行分组分析。结果研究对象中合并NAFL32例(30.1%),非脂肪肝74例(69.9%)。合并NAFL组空腹血糖、胰岛素、总胆固醇、甘油三酯、ALT、hsCRP和白细胞计数及体重指数、Homa IR、血糖异常和CA比例、高血压和代谢综合征患病率均高于非脂肪肝组(P均〈0.05)。hsCRP与体重指数、甘油三酯、ALT和Homa IR正相关(r=0.420,P=0.000;r=0.200,P=0.040;r=0.218,P=0.048;r=0.546,P=0.000),与高密度脂蛋白胆固醇负相关(r=-0.220,P=0.023)。白细胞计数与空腹血糖正相关(r=0.211,P=0.030)。高胰岛素抵抗组体重指数、hsCRP、ALT、高血压、糖尿病、代谢综合征和NAFL患病率及CA比例均高于低胰岛素抵抗组(P均〈0.05)。结论合并NAFL的早发稳定性冠心病患者慢性炎症反应、胰岛素抵抗和心血管危险因素聚集程度更显著。  相似文献   
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