荷叶碱在大鼠体内的绝对生物利用度研究

目的研究荷叶碱在大鼠体内的药动学特征及其绝对生物利用度。方法SD大鼠分别静脉注射（5 mg·kg^-1）和口服（20 mg·kg^-1）荷叶碱,给药后不同时间点取血,分离血浆,LC-MS/MS法测定血浆中荷叶碱的药物浓度,用DAS软件处理数据并计算药动学参数,求其绝对生物利用度。结果静脉注射荷叶碱的药动学参数：AUC（0-∞）为（1 118.24±420.90）ng·h·mL^-1,Cmax为（1 213.17±359.29）ng·mL^-1,t1/2为（1.30±0.69）h;口服荷叶碱的药动学参数：AUC（0-∞）为（3 111.34±1 986.29）ng·h·mL^-1,Cmax为（1 257.50±942.37）ng·mL^-1,t1/2为（4.89±2.88）h,tmax为（0.33±0.18）h;剂量归一法计算得荷叶碱在大鼠体内的绝对生物利用度为69.56%。结论该方法专属性强,灵敏度高,可用于荷叶碱的体内定量分析。     

人脐带间充质干细胞来源外泌体对小鼠压疮的治疗作用及机制初探

［］　目的 探索人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs)来源外泌体(hucMSCs-derived exosome,hucMSCs-Exo)对小鼠4期压疮创面愈合的作用及其机制。方法 原代分离、培养人脐带间充质干细胞,取P5代细胞培养上清通过差速离心法提取hucMSCs-Exo。将27只成功制备4期压疮模型的BALB/c小鼠随机分为hucMSCs-Exo治疗组(创周皮下注射100μg溶解于100μLPBS 中的hucMSCs-Exo)、PBS对照组(创周皮下注射100μLPBS)及模型(Model)对照组(未给予hucMSCs-Exo和PBS处理)。治疗后评估压疮创面愈合情况,于0、3、7、10、14d拍照并计算创面愈合率;取7、14d皮肤样本行HE染色及Masson染色观察创面病理变化;取7d皮肤样本行免疫组化检测与瘢痕形成相关的α-SMA蛋白表达;取治疗后7、14 d血清检测氧化应激指标SOD及MDA动态变化。结果 hucMSCs-Exo治疗组创面愈合速度较PBS对照组及Model对照组明显加快、瘢痕形成较少,创面愈合率显著升高(P＜0.001);组织病理学结果显示,与PBS对照组及Model对照组比较,hucMSCs-Exo治疗组创面损伤程度、炎性浸润情况明显减轻,胶原沉积量增多,胶原纤维排列分布有序;免疫组化结果显示,hucMSCs-Exo治疗组α-SMA蛋白表达明显低于PBS对照组及Model对照组;生化检测结果示,hucMSCs-Exo治疗组SOD活力在治疗后7d明显高于PBS对照组及Model对照组(P＜0.05),到14d接近正常水平,MDA含量始终低于PBS对照组及Model对照组(P＜0.05)。结论 皮下注射hucMSCs-Exo可促进小鼠4期压疮创面愈合,减少瘢痕形成,其机制可能与hucMSCs-Exo改善体内氧化应激水平有关。     

牙周炎动物模型实验性的研究

目的利用Beagle犬建立一种近似人类临床牙周炎的牙周炎动物模型。方法在6只Beagle犬牙颈部龈缘水平结扎丝线并配以形成牙周炎食谱,分别于1d、3d、7d、14d、1m、2m和3m检查实验动物的牙周状况,记录结果。结果所有动物实验侧牙齿的牙周均形成近似人类临床牙周炎的实验性牙周炎,但严重程度不一。结论在Beagle犬建立的牙周炎模型是较近似于人类临床牙周炎的实验性牙周炎动物模型。     

他汀类药物在高脂血症大鼠体内的PK-PD关系研究

目的:探讨他汀类药物在高脂血症大鼠体内暴露水平(药代动力学参数AUC)与药效之间的关系.方法:建立大鼠高脂血症模型,给予不同剂量的他汀类药物干预治疗,进行药代动力学和药效学测定,计算药代动力学/药效学(PK/PD)值,并进行相关分析.结果:TG-AUC在药代动力学(AUC)变化范围内(0～10.96倍)线性关系良好,Y=0.01036X-7.6445(γ=0.9599).胆固醇(CHOL)-AUC、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)-AUC、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)-AUC由于中间数据偏低,与预测样本数据偏差太大,线性关系不明显.结论:TG-AUC在药代动力学(AUC)变化范围内(0～10.96倍)线性关系良好,可以在知道药代动力学的相关数据基础上对药效进行预测.     

LC-MS/MS法评价卡维地洛对人肝微粒体细胞色素P450酶5种亚型的体外抑制作用

目的建立LC-MS/MS法评价卡维地洛对混合人肝微粒体细胞色素P450酶5种主要亚型(CYP1A2、2C9、2C19、2D6和3A4/5)的体外抑制作用情况。方法在混合人肝微粒体孵育体系中,分别以非那西汀O-脱乙基化(CYP1A2)、双氯芬酸4’-羟基化(CYP2C9)、S-美芬妥英4’-羟基化(CYP2C19)、右美沙芬O-去甲基化(CYP2D6)、咪达唑仑1’-羟基化(CYP3A4/5)和睾酮6β-羟基化(CYP3A4/5)反应作为5种P450酶亚型代谢活性的标志,用阳性抑制剂对试验体系进行验证。建立LC-MS/MS法检测各特征性反应的代谢物生成量,并计算各阳性抑制剂与卡维地洛的IC50值。结果卡维地洛对人肝微粒体CYP3A4/5和CYP2D6存在不同程度的抑制作用,其IC50值分别为4.3μmol.L-1(CYP3A4/5咪达唑仑羟基化反应)、5.6μmol.L-1(CYP3A4/5 6β-羟基睾酮羟基化反应)和27.2μmol.L-1;对其余3种CYP酶亚型则无显著抑制作用。结论建立的LC-MS/MS分析方法灵敏、准确、可靠,卡维地洛对人肝微粒体CYP3A4/5具有中等强度抑制作用,对CYP2D6亦存在较弱的抑制作用。     

改良后Hulth法和Ⅱ型胶原酶注射法建立兔膝骨关节炎模型的比较研究

目的 对比分析兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型两种常用造模方法的差异,为不同类型膝骨关节炎动物模型的选择提供参考.方法 将9只健康新西兰大白兔随机分为3组:空白组、改良后Hulth组、胶原酶组.改良后Hulth组和胶原酶组分别给予改良后Hulth法、关节腔内注射胶原酶干预,1周后每日促...     

当前对小分子药物致QTc间期延长评价的探索(英文)

对QT间期延长的评估是小分子药物研发过程中的关键一步。ICHS7A/S7B为指导这个心血管风险评估提供了主要框架。ICH指南描述了通过体外hERG抑制、离体动作电位时间和在体心电图等三步法来评估QT间期延长。狗、猴、猪、兔、雪貂和豚鼠是常用实验动物用于体内的电生理研究,尤其使用清醒的比格犬。在这些指南中标准研究的基础上,大量新的非在体研发方法也在使用。例如受体结合对hERG抑制、离体兔子心脏或豚鼠心脏灌流等方法。这些模型和临床都有较好的相关性,并且具有成本低廉、实验周期短的特点。因此能够帮助快速准确的预测潜在的心脏病风险,从而加速小分子研发的进程。     

食蟹猴在慢性毒性试验中对治疗性乙肝HBsAg疫苗诱生抗-HBs及生化指标的检测分析

目的 通过在慢性毒性实验中，观察治疗性乙肝蛋白疫苗两种给药途径(皮下和肌肉)抗原性及安全性。方法本研究用高、中、低三个剂量组免疫食蟹猴，每天给药1次，连续3～4周，之后停药恢复4周，定期检测血清抗-HBs和生化指标。结果食蟹猴对两种给药途径和各剂量治疗性疫苗抗-HBs免疫反应及生化指标都正常，均于第2周出现抗-HBs，且恢复期也维护高滴度水平抗-HBs，所不同肌肉免疫组血清抗-HBs滴度和阳性率在恢复期后较皮下免疫组较早出现下降。结论通过对食蟹猴血清抗-HBs和生化指标检测分析，表明治疗性HBeAS疫苗对机体抗体免疫反应和代谢无毒性作用。