社区获得性血流感染病原菌分布及预后危险因素分析

目的：分析社区获得性血流感染（community?acquired bloodstream infection,CABSI）的病原菌分布、耐药情况及预后危险因素,为临床医师诊断及治疗提供依据。方法：收集2017年1月—2019年12月CABSI患者分离的病原菌及临床资料,并按治疗28 d转归分为死亡组和存活组。用χ2检验进行单因素分析,与死亡相关的变量采用Logistic二元回归进行多因素分析。结果：292例CABSI患者分离病原菌323株,其中革兰阴性菌192株,革兰阳性菌118株,真菌9株和厌氧菌4株。革兰阴性菌对头霉素类、碳青霉烯类和氨基糖苷类抗菌药物耐药率均在10%以下,金黄色葡萄球菌对庆大霉素和莫西沙星的耐药率小于20%,链球菌属对青霉素类耐药率为6.7%。292例患者中55例死亡,病死率为18.8%。单因素分析显示脑梗死、感染性休克、肺炎克雷伯菌感染、α溶血链球菌感染、降钙素原（procalcitonin,PCT）升高与患者死亡有关。脑梗死、感染性休克和PCT水平升高是CABSI患者预后相关的独立危险因素（P < 0.05）。结论：CABSI患者病原菌对临床常用抗菌药物耐药率较低。脑梗死、感染性休克和PCT升高能显著增加患者病死率,临床医师应及时采取相应防治措施。     

质谱直接鉴定血培养阳性菌的前处理方法评估

目的：评估基于分离胶的两种前处理方法联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix?assisted laser desorption ionization?time of flight mass spectrometry,MALDI?TOF MS）直接鉴定血培养阳性病原菌的临床应用价值。方法：收集2020年5—11月南京医科大学第一附属医院血培养阳性标本302例,分离胶?皂甙法和分离胶沉淀法分别处理后对阳性血培养标本进行快速鉴定,结果分别与培养鉴定结果比较。结果：分离胶?皂甙法可在45 min内完成鉴定,分离胶沉淀法需20 min;单数菌感染标本288例,使用两方法直接鉴定的准确率均为86.81%（250/288）,其中两方法分别鉴定革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌、革兰阳性杆菌、真菌的准确率差异无统计学意义（P > 0.05）;复数菌感染标本14例,仅分离胶?皂甙法1例与培养鉴定结果一致,其余标本两种方法均仅可准确鉴定其中的一种细菌。结论：两种基于分离胶的前处理方法联合质谱均可直接、快速、准确地鉴定血培养病原菌,分离胶沉淀法可作为本实验室血培养快速鉴定常规的前处理方法。     

白念珠菌和非白念珠菌血症的流行病学、危险因素与预后

目的：探讨白念珠菌和非白念珠菌血症的流行病学、危险因素和预后。方法：回顾分析南京医科大学第一附属医院2016年1月—2020年12月171例念珠菌血症患者临床资料。通过卡方检验和二元Logistic回归分析对白念珠菌组和非白念珠菌组血流感染患者的临床危险因素进行比较,确定与念珠菌感染有关的危险因素,并进一步分析与念珠菌血症预后相关的独立危险因素。结果：光滑念珠菌是念珠菌血症患者中最常见的分离菌（28.65%）,其次为白念珠菌（28.07%）、热带念珠菌（21.64%）、近平滑念珠菌（18.13%）和其他念珠菌（3.51%）,非白念珠菌占71.93%（123/171）。多因素分析显示机械通气（OR=2.588,95%CI：1.119~5.987,P=0.026）是白念珠菌血症的独立危险因素。所有念珠菌对两性霉素B均敏感,白念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌对氟康唑的敏感率分别为91.8%、91.7%和90.3%,热带念珠菌的耐药性相对较高。171例念珠菌血症患者中,48例死亡,病死率为28.07%。多因素分析显示年龄（OR=1.027,95%CI：1.004~1.050,P=0.022）、深静脉置管（OR=2.489, 95%CI：1.033~5.996,P=0.042）和入住ICU（OR=2.921,95%CI：1.020~8.362,P=0.046）是与病死率相关的独立危险因素。结论：本院念珠菌血症的念珠菌分布与其他医院存在差异。除热带念珠菌外,绝大多数念珠菌对抗真菌药物敏感性较高,为经验抗真菌药物的选择提供有用信息。     

甜菜碱对金黄色葡萄球菌生物膜形成抑制与分散的作用

目的研究金黄色葡萄球菌生物膜形成及甜菜碱对其抑制与分散的作用。方法采用结晶紫染色法分别测定终浓度为1.0 g/L的甜菜碱对20株金黄色葡萄球菌生物膜形成的抑制能力和甜菜碱对金黄色葡萄球菌生物膜的分散能力。结果 20株金黄色葡萄球菌均能形成生物膜,其中甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)培养24 h时形成生物膜吸光度值(A_(590 nm))达峰值,为1.99±0.53;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)培养48 h时形成生物膜A_(590 nm)达峰值,为1.13±0.47。加入甜菜碱共培养后,MSSA培养24 h后生物膜A_(590 nm)为1.74±0.61,MRSA培养48 h后生物膜A_(590 nm)为0.40±0.12,与对照组相比差异均有统计学意义(t值分别为2.43和5.84,P均0.05)。当生物膜形成后加入甜菜碱,与对照组相比,MSSA和MRSA的生物膜A_(590 nm)差异无统计学意义(P0.05)。结论 1.0 g/L甜菜碱对金黄色葡萄球菌生物膜的形成具有良好的抑制作用,但不能分散已经形成的生物膜。     

手术患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌血流感染预后不良的危险因素分析

目的 分析手术患者发生耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）血流感染的临床特征及预后不良的危险因素，为临床早期诊断及感染控制提供依据。方法 回顾性分析2017—2020年南京医科大学第一附属医院183例CRKP血流感染患者临床资料及实验室检查，根据血流感染发生前是否有手术史分为手术组（115例）和非手术组（68例），分析手术组患者治疗28 d后的预后影响因素。结果 183例CRKP血流感染患者中62.8%存在手术史，手术组患者在引流管留置和住院时间≥28 d比例均高于非手术组。入住ICU和感染性休克是影响手术组患者预后的独立危险因素。结论 CRKP血流感染患者中手术组人数高于非手术组，入住ICU和感染性休克可显著增加手术患者CRKP血流感染死亡风险，临床医师应积极给予预防和及时诊治措施。     

顺铂诱导SPC-A1人肺腺癌细胞凋亡过程中miR-27a的表达及意义

目的:检测miR-27a在顺铂(DDP)体外诱导人肺腺癌细胞株SPC-A1凋亡过程中的表达变化,探讨其与细胞凋亡之间的相关性及其检测的临床意义?方法:体外培养SPC-A1细胞,实验组加入终浓度为2.5 μg/ml DDP,同时设置不加DDP的对照组?观察12?24?48和72 h后显微镜下细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,real-time PCR检测培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a的表达变化?结果:DDP(2.5 μg/ml)组SPC-A1细胞形态呈凋亡改变,在48和72 h凋亡率分别为(59.3 ± 2.5)%和(76.4 ± 3.1)%,均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a含量在24?48和72 h均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中miR-27a含量在12?24?48和72 h逐渐升高,两两比较差异均有统计学意义(P < 0.05)?结论:miR-27a在DDP诱导的SPC-A1细胞凋亡中表达升高,提示其可能参与细胞凋亡调控;对miR-27a进行定量检测有望用于对肺腺癌化疗疗效的评估?     

实时荧光定量PCR直接检测粪便标本艰难梭菌tcdB基因

目的建立艰难梭菌实时荧光定量PCR检测方法,直接检测粪便标本艰难梭菌tcd B基因,并探讨其应用价值。方法根据艰难梭菌基因组设计tcd B基因特异性引物及探针,用ATCC 43255标准株评价其敏感性,选取艰难梭菌生物学特征相近的临床菌株验证其特异性;收集2015年10-12月临床腹泻患者稀便标本115份,提取基因组总DNA后进行tcd B基因检测,并以产毒培养法为参考方法,探讨该方法的临床诊断价值。结果荧光定量PCR法最低检测限为1×10-3ng,并且仅特异性地扩增产毒艰难梭菌;临床样本评价荧光定量PCR的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为75.0%、99.1%、85.7%和98.1%。结论实时荧光定量PCR直接检测稀便标本中的艰难梭菌tcd B基因可用于艰难梭菌相关腹泻的快速诊断。     

多主棒孢菌致真菌性角膜溃疡1例并文献复习

目的 报道1例多主棒孢菌引起的真菌性角膜溃疡病例并复习相关文献，提高临床对该菌引起感染性疾病的认识。方法 回顾性分析1例多主棒孢菌致真菌性角膜溃疡病例资料，并以英文关键词“Corynespora cassiicola”、中文关键词“棒孢菌”和“棒孢霉”为检索词，检索PubMed、中国知网、万方和维普数据库等国内外报道的病例，结合文献综合分析多主棒孢菌临床感染的特点。结果 该例患者临床表现和实验室检查符合真菌性角膜溃疡的临床特征，病变角膜组织培养提示多主棒孢菌生长，经右眼角膜移植术及抗真菌治疗后好转。复习文献并结合该例，共12例多主棒孢菌临床感染病例。除1例病例资料不完整外，其余11例中男8例，女3例，年龄8～84岁。患者多存在基础疾病，包括糖尿病2例、慢性阻塞性肺疾病1例、高血压1例、慢性阻塞性肺疾病合并高血压1例；感染危险因素包括胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)基因突变3例、植物暴露4例（3例农民、1例眼外伤）、长期使用激素2例、侵袭性诊疗操作1例；11例均引起暗色丝孢霉病，感染部位包括皮下感染7例、眼部感染3例、中枢神经系统感染1例，临床表现主要与受累组织系统相关；临床治疗中两...     

2013—2015年血培养主要病原菌分布及药物敏感性分析

目的：统计分析2013—2015年南京医科大学第一附属医院血培养主要病原菌分布及药物敏感性变迁情况。方法：血培养采用BACTEC FX全自动血培养仪;细菌和真菌鉴定及药物敏感试验采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定及药敏系统,链球菌药敏为纸片扩散法(K-B法),真菌药敏采用ATB FUNGUS 3方法,WHONET5.6软件进行统计分析。结果：2013—2015年南京医科大学第一附属医院血培养阳性率10.4%(2 056/19 799),双侧双瓶采血的标本阳性率显著高于单侧双瓶/双侧单瓶和单瓶采血组(P＜0.01)。前5位病原菌分别是大肠埃希菌(21.3%)、肺炎克雷伯菌(11.4%)、金黄色葡萄球菌(6.0%)、凝固酶阴性葡萄球菌(5.4%)和铜绿假单胞菌(4.3%)。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物敏感性最高(＞60%),但耐药株逐渐增多,尤其是耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌。铜绿假单胞菌对除氨曲南以外的抗菌药物均有较好的敏感性(＞70%),而鲍曼不动杆菌对常见抗菌药物敏感性均较低(＜40%)。革兰阳性球菌对万古霉素、利萘唑胺和替考拉宁敏感性较好。结论：双侧双瓶血培养的采血模式有助于提高血培养阳性率,监测污染率。血流感染病原菌中多重耐药株有增多趋势,加强抗菌药物管理和感染控制有重要意义。     

顺铂诱导的人肺腺癌细胞凋亡过程中miR-638的表达水平研究

目的探讨体内外顺铂(DDP)给药后miR-638表达水平及变化,评价miR-638表达在DDP诱导人肺腺癌细胞凋亡中的意义。方法建立荷SPC-A1瘤的BALB/c裸鼠移植瘤模型,经尾静脉注射DDP后,检测各组裸鼠血清miR-638表达水平。体外培养SPC-A1并经DDP作用不同时间后,检测培养上清miR-638表达水平及细胞凋亡率。收集60例肺腺癌患者DDP化疗前后的血清样本,检测miR-638在化疗前后的表达改变情况并分析其与预后的关系。结果体外DDP处理SPC-A1细胞后凋亡率在24、48和72 h时均显著高于同时间点对照组(P均0.01),且随时间延长显著增高(任意两组间P0.01);DDP作用后培养上清中miR-638表达水平呈时间依赖性增高,且在24、48、72 h均显著高于相应对照组(P均0.05);且SPC-A1培养上清中miR-638水平与凋亡率呈正相关(r=0.711,P0.01);DDP治疗组裸鼠血清miR-638表达水平明显高于生理盐水处理组和未治疗对照组(P均0.05),而后两组间差异无统计学意义(P0.05);接受DDP化疗后血清miR-638表达上调的患者总体生存率明显高于表达下调者(P0.05)。结论 miR-638在体内和体外DDP诱导的人肺腺癌细胞凋亡中均出现表达上调,提示miR-638可能对肺癌DDP化疗中判断预后及疗效观察具有一定价值。