转化生长因子βⅡ型受体胞外域融合蛋白的体内抗肝纤维化活性研究

研究人血清白蛋白与转化生长因子βⅡ型受体胞外域的融合蛋白(HSA-eTGFBR2)的体内抗肝纤维化作用,以期寻找更加稳定的抗肝纤维化药物。通过CCl₄诱导构建小鼠肝纤维化模型,设正常组、模型组、阳性组、eTGFBR2治疗组、HSA-eTGFBR2治疗组和HSA组。经过苏木精-伊红染色、血清肝功能指标活性检测及Western blot等方法鉴定各组抗肝纤维化效果。结果显示:(1)CCl₄能引起肝脏结构紊乱、肝细胞坏死、胶原纤维增生,损伤肝功能,诱导纤维化;(2)HSA-eTGFBR2及其单体均能明显改善肝纤维化症状,减轻肝细胞损伤及胶原沉积,改善肝功能,降低肝脏中纤维化标志物α-SMA和COL I的表达水平,其改善肝纤维化效果与单体药物相当,而白蛋白几乎没有治疗效果;(3)与单体药物相比,HSA-eTGFBR2融合蛋白在降低给药频率的情况下能取得相当的治疗效果。综上表明HSA-eTGFBR2融合蛋白具有良好的抗肝纤维化效果,与单体药物相比,融合蛋白药物在低注射频率下也能取得较好的治疗效果,表明该融合蛋白药物半衰期更长、更稳定,具有更优的应用前景。     

穴位埋线治疗顽固性失眠23例

穴位埋线治疗顽固性失眠２３例湖南省中医药研究院附属医院（４１０００６）蔡燕飞主题词失眠／穴位疗法，埋线疗法近几年来，笔者采用穴位埋线治疗顽固性失眠２３例，疗效满意。现介绍如下：１临床资料本组２３例中，男１２例，女１１例；年龄在４５～７０岁之间，平均年...     

森林气候疗法的研究进展

目的探讨森林气候疗法的特点及对人体的作用,充分发挥其防治疾病、康复与保健的作用,使人们能全面、准确地了解认识森林气候疗法,以便更好地指导人们的健康与生活。方法收集、检索近几年来国内及国际有关森林气候疗法的文献资料,并进行归纳整理和分析,最后得出结论。结果森林气候疗法是现代疗养学的一项重要内容,也是保健医学的一项重要内容。随着人们生活水平的不断提高,森林气候疗法越来越受到人们的关注,在人们的生活中发挥着越来越重要的作用。结论在不远的将来,森林气候疗法将会得到更进一步的发展。     

人胰岛素样生长因子-1的体外抗肝纤维化活性

探讨人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的体外抗肝纤维化作用。检测IGF-1对人正常肝细胞L-02增殖及生长周期的影响;建立CCl₄诱导的肝细胞损伤模型,探究IGF-1抗肝细胞损伤活性;以TGF-β1诱导的肝星状细胞HSC-T6为体外肝纤维化研究模型,检测IGF-1对HSC-T6细胞中纤维化相关蛋白表达水平及对胞内TGF-β1/Smad信号通路的影响。结果显示,IGF-1可解除TGF-β1对L-02生长的抑制作用,提高CCl₄损伤L-02的细胞存活率,降低HSC-T6细胞纤维化相关蛋白表达水平,抑制TGF-β1/Smad信号通路中Smad3的磷酸化。结果表明,IGF-1能够促进肝细胞增殖,保护肝细胞免受损伤,干预TGF-β1/Smad信号通路,抑制胞外基质ECM合成,从而发挥抗肝纤维化效果。     

香蕉皮黑色素的鉴定及其抗氧化作用研究

目的：提取香蕉皮黑色素，鉴定其结构和研究脂质抗氧化效果，方法：多次用碱溶酸沉技术提取纯化香蕉皮黑色素后，进行紫外和红外光谱测定。同时，研究了香蕉皮黑色素对小鼠肝脏体外过氧化作用的抑制效果，结果：香蕉皮黑色素在紫外波长下显示出最大吸收，红外光谱图具有经典的黑色素红外吸收特征，1．5％香蕉皮黑色素对正常肝匀浆和激发态肝匀浆MDA的抑制率分别达28．4％，39．9％，结论：香蕉皮黑色素的结构可能是邻苯二酚型，该黑色素具有显著的抗氧化作用。     

重组凝血因子Ⅶ表达和合成机制的研究进展

血友病是由于人体内缺乏相应凝血因子造成的凝血障碍,目前主要利用基因重组技术在不同细胞中表达重组凝血因子Ⅶ(Ⅶ因子)从而对血友患者出血进行治疗。为有效提高重组Ⅶ因子的产量及活性,已有研究者尝试利用不同真核表达系统合成重组Ⅶ因子,如BHK细胞、CHO细胞、昆虫细胞和鱼胚胎等。同时,不同外源功能性基因对重组Ⅶ因子活性和翻译后修饰对表达产量的影响也通过不同方法进行探究。本文从Ⅶ因子在凝血途径中的作用、重组表达重组Ⅶ因子和翻译后修饰对合成的影响3个方面对重组Ⅶ因子表达和合成机制研究进行了综述。     

耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADM钙稳态失调及其机制研究

目的探讨耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADM钙稳态失调及其机制。方法转染指示钙离子质粒GECO1.2,检测野生型和耐药型细胞中的[Ca2+]含量;通过Westernblot检测瞬时受体电位离子通道(transient receptor potentialchannel)蛋白TRPC1、TRPC3、TRPC4、TRPC5和TRPC6在两种细胞中的表达情况;运用钙离子通道抑制剂2-APB(100μmol.L-1)抑制耐药细胞中高表达的TRPC5活性后,检测耐药细胞中的[Ca2+]含量。结果耐药细胞中的[Ca2+]含量明显上调,并检测到TRPC5蛋白在耐药细胞中发生高表达,其活性被抑制后,耐药细胞中的[Ca2+]浓度发生下调。结论与野生型细胞相比,耐药细胞中钙稳态失调,其原因可能是由于耐药细胞中TRPC5表达上调引起耐药细胞中[Ca2+]内流所致。提示钙稳态失调与肿瘤细胞的耐药发生有着密切关系。     

外源蛋白在CHO细胞染色体上一个新位点的定点整合和稳定表达

寻找中国仓鼠卵巢（CHO）细胞染色体上稳定表达位点是解决CHO细胞长期培养表达不稳定问题的有效手段。本课题组前期利用慢病毒转染将示踪基因（Zsgreen1）整合CHO细胞染色体上并发现多个潜在稳定表达位点。本研究验证了其中一个位点稳定表达外源蛋白的能力,该位点位于染色体NW_003614241.1上148 052～148 157 bp区域。首先观察Zsgreen1基因的表达情况,随后采用CRISPR/Cas9技术将增强绿色荧光蛋白（EGFP）基因定点整合至该位点,获得3株EGFP基因定点整合的细胞,经60代悬浮培养,细胞荧光强度无明显变化,证明此位点可稳定表达EGFP基因。采用同样方法构建了表达人血清白蛋白（HSA）基因的重组CHO细胞株,经Western blot验证,此位点可分泌表达HSA,表明上述位点可定点整合和稳定表达外源蛋白。     

香蕉皮黑色素的鉴定及其抗氧化作用研究

目的：提取香蕉皮黑色素，鉴定其结构和研究脂质抗氧化效果，方法：多次用碱溶酸沉技术提取纯化香蕉皮黑色素后，进行紫外和红外光谱测定。同时，研究了香蕉皮黑色素对小鼠肝脏体外过氧化作用的抑制效果，结果：香蕉皮黑色素在紫外波长下显示出最大吸收，红外光谱图具有经典的黑色素红外吸收特征，1．5％香蕉皮黑色素对正常肝匀浆和激发态肝匀浆MDA的抑制率分别达28．4％，39．9％，结论：香蕉皮黑色素的结构可能是邻苯二酚型，该黑色素具有显著的抗氧化作用。     

单克隆抗体在农药残留检测中的应用

自1975年Kohler和Milstem创建了杂交瘤技术制备单克隆抗体以来,单克隆抗体已广泛应用于医学、农业及其他生物领域中。本文阐述了农药单克隆抗体的制备流程、已发展的农药单克隆抗体种类及农药残留常用的免疫分析方法,并就农药单克隆抗体制备值得注意的问题提出了建议。