双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定

目的研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性。方法对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b( ),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功能鉴定。同时,以RT-PCR检测LEBIa2503的转录情况。另外,也对双曲钩体菌体本身有无溶血活性进行检测。结果双曲钩体LEBIa2503基因与问号钩体tlyA溶血素基因在蛋白水平上有相同的结构域,属于直系同源基因(orthologues gene)。原核表达的重组融合蛋白在羊血平板上出现β-溶血环。以RT-PCR的方法能检测到在双曲钩体中有LEBIa2503基因的转录,但双曲钩体菌体本身则检测不到溶血活性。结论未发现双曲钩体有溶血活性,但其含有溶血素基因tlyA,并且在普通培养环境下能被转录,这对进一步研究其内在机制奠定了基础,并对探索致病性问号钩体致病机制提供了一定线索。     

siRNA沉默Pokemon基因抑制人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的增殖

目的采用siRNA干扰技术沉默人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞中Pokemon基因,观察Raji细胞增殖活性的变化,并探讨其可能的分子机制。方法构建靶向Pokemon基因的siRNA重组慢病毒载体并转染Raji细胞。采用实时定量PCR法和Western blotting法检测Raji细胞Pokemon基因的沉默效果,在Raji细胞中沉默Pokemon基因的表达后采用实时定量PCR法和Western blotting法检测bcl-6和突变型p53表达水平的变化;采用流式细胞术检测Pokemon基因沉默后Raji细胞凋亡的情况。结果利用Pokemon靶向siRNA重组慢病毒载体感染Raji细胞有效沉默Raji细胞Pokemon基因表达(P<0.05)。沉默Pokemon基因后,bcl-6和突变型p53基因和蛋白表达均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率增高(P<0.05)。结论 siRNA沉默Pokemon基因有效降低了人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的bcl-6和突变型p53基因和蛋白表达,促进细胞凋亡,抑制其增殖。Pokemon基因有望成为非霍奇金淋巴瘤治疗的新靶点。     

硼替佐米耐药多发性骨髓瘤细胞株KM3/BTZ的建立

目的   建立人多发性骨髓瘤耐硼替佐米的细胞株,并对其生物学特性及耐药机制进行初步探讨。方法   采用浓度梯度递增法,以人多发性骨髓瘤KM3细胞株为亲本,建立耐硼替佐米的多发性骨髓瘤细胞株,绘制生长曲线,并计算倍增时间;MTT法鉴定耐药细胞株的耐药性;RT-PCR方法检测MDR-1在亲代和耐药细胞株中的表达情况。结果   成功建立耐硼替佐米的多发性骨髓瘤细胞株KM3/BTZ,耐药倍数为19.7倍。与亲代细胞相比,耐药细胞株倍增时间延长（P＜0.05）。多药耐药相关基因MDR-1未参与耐药性的发生。结论   成功建立人多发性骨髓瘤耐药细胞株KM3/BTZ,耐药性稳定,为研究耐药机制及逆转耐药提供了理想的模型。     

综合性医院学科建设与发展

本文探讨了我院以学科建设为抓手,通过人才培养、优化结构、突出重点、量化考核和技术创新等方法,推动医院学科建设,促进医院的又快又好发展。     

SULT1E1蛋白表达和性激素含量与子宫肌瘤发病的相关性研究

目的:探讨性激素及人雌激素硫酸基转移酶在子宫肌瘤发生、发展中的作用.方法:化学发光分析法测定30例子宫肌瘤患者和30例同年龄段健康女性血清及组织匀浆中E2、P、T含量.免疫组化染色法检测SULT1E1蛋白的表达.结果:肌瘤组血清E2含量明显低于健康女性组(P<0.05),其T含量则明显高于健康女性组(P<0.05),P含量各组无显著差异;肌瘤组织匀浆中E2含量显著高于肌瘤包膜外肌层组织(P<0.01),其P、T含量两组间无显著差异;肌瘤组织中SULT1E1蛋白表达与肌瘤包膜外肌层组织比较差异显著(P<0.05),肌瘤组织与肌瘤包膜外肌层组织中SULT1E1蛋白定量表达与相应组织匀浆中E2含量分别呈负相关(r=-0.533,r=-0.498,P<0.01).结论:子宫肌瘤的发生、发展与子宫肌瘤组织局部SULT1E1酶活性降低有关.     

老年恶性肿瘤患者应用免疫抑制剂合并医院获得性肺炎127例分析

老年恶性肿瘤患者应用免疫抑制剂合并医院获得性肺炎１２７例分析潘更毅，董珂，丁水印，关玲霞医院获得性肺炎是指病人住院后４８－７２小时后出现的下呼吸道感染。是老年重症患者及免缺损患者的常见合并症，其临床表现常不典型。现将我院１９７５年以来收住的年龄≥６０...     

益生菌与肿瘤防治

益生菌广泛存在于自然界中,通过维持宿主体内菌群平衡、影响肠屏障功能和调节免疫应答等作用,提高宿主健康水平,被公认为"肠道健康卫士".一些益生菌可以增强机体的免疫功能,抑制致癌物质,影响肿瘤细胞的基因表达,对肿瘤具有拮抗作用.大量研究表明,益生菌在未来的肿瘤防治中有很好的应用和发展前景.     

小鼠ERA蛋白在大肠杆菌中的表达及其纯化

目的:对小鼠ERA蛋白(mERA)进行表达、纯化,为真核生物ERA功能研究奠定基础.方法:构建MBP-mERA融合表达载体.在大肠杆菌中诱导表达融合的小鼠ERA蛋白,经直链淀粉亲和层析纯化,Western Blotting鉴定所表达纯化的蛋白.结果:表达的MBP-mERA融合蛋白占菌体总蛋白的18 %;纯化后的融合蛋白纯度为70 %;Western Blotting证实了mERA蛋白的表达.结论:利用基因重组技术,在大肠杆菌中高表达了mera基因,并对融合蛋白进行了初步纯化.     

SULTIE1蛋白表达和性激素含量与子宫肌瘤发病的相关性研究

目的：探讨性激素及人雌激素硫酸基转移酶在子宫肌瘤发生、发展中的作用。方法：化学发光分析法测定30例子宫肌瘤患者和30例同年龄段健康女性血清及组织匀浆中E2、P、T含量。免疫组化染色法检测SULTIE1蛋白的表达。结果：肌瘤组血清E2含量明显低于健康女性组（P〈0．05），其T含量则明显高于健康女性组（P〈0．05），P含量各组无显著差异；肌瘤组织匀浆中E2含量显著高于肌瘤包膜外肌层组织（P〈0．01），其P、T含量两组间无显著差异；肌瘤组织中SULTIE1蛋白表达与肌瘤包膜外肌层组织比较差异显著（P〈0．05），肌瘤组织与肌瘤包膜外肌层组织中SULTIE1蛋白定量表达与相应组织匀浆中E2含量分别呈负相关（r=-0．533，r=-0．498，P〈0．01）。结论：子宫肌瘤的发生、发展与子宫肌瘤组织局部SULTIE1酶活性降低有关。