Peyer结介导的小肠黏膜免疫及其物种间差异的研究进展北大核心CSCD

肠道不仅是消化吸收营养物质并进行新陈代谢的消化器官,也是抵抗病原体入侵的免疫器官,在机体免疫功能中扮演重要角色。Peyer结位于肠相关淋巴组织的诱导部位,是小肠黏膜免疫的重要组织,是产生IgA的主要来源。本文阐述了Peyer结的组织学特征,重点归纳了Peyer结主要的免疫细胞类型及其参与的黏膜免疫过程,并对人及主要模式动物Peyer结的研究现状进行综述,以期为后续深入研究Peyer结介导的黏膜免疫提供基础资料。     

胎猪皮肤前体组织异种移植模型的研究

目的探讨胎猪皮肤前体组织异种移植模型及移植后发育过程。方法取精确胎龄为56d的胎猪皮肤前体组织，分组进行移植，①背部创面模型组：制备成微粒皮后移植到BALB／c裸鼠背部创面，以人尸体皮覆盖；背部皮下模型组：制备成小张邮票皮，植入裸鼠背部皮下；耳廓皮下模型组：制备成微粒皮植入裸鼠耳廓皮下。各组于移植后观察其生长发育特性，并于移植后6周和12周取材行HE染色观察其组织结构形态。新生组织块大小采用双样本t检验。结果各模型的胎猪皮肤前体组织移植后均能存活并继续生长，背部创面模型组生长能力显著大于耳廓皮下模型组，新生皮肤组织均具有真皮和表皮，耳廓皮下模型的真皮附属器仅见毛囊（毛发）．偶见皮脂腺，未见汗腺，但是背部创面模型组及背部皮下模型组不仅能发育成毛囊（毛发）、还见大量皮脂腺和汗腺。结论背部创面移植模型最适合于胎猪皮肤前体组织异种移植及移植后发育的研究。     

无菌猪生长、血液以及脏器相关指标的测定

目的 建立无菌太湖猪多项生理数据背景资料。方法 本实验对4头25d无菌猪和4头同窝普通级群体,雌雄比3﹕1,测定并比较血液常规、生化、免疫球蛋白和主要脏器发育指标。运用异速生长建模,对主要脏器重量相对体重的异速生长进行了分析。结果（1）无菌猪与普通级猪的12项血常规和8项血生化指标差异存在显著性（P < 0.05）;（2）无菌猪与普通级猪的平均体重、血清中IgM表达量差异达到显著性水平（P < 0.05）,且无菌猪缺少肠系膜淋巴结;（3）无菌猪的心脏、脾脏和胃与体重呈负异速生长（异速生长指数b < 1）,肠道与体重的异速生长指数为1.78,为正异速生长;而普通级猪的心脏、胃和肠道与体重呈负异速生长（b < 1）,肾脏与体重的异速生长指数最大,为1.20,呈正异速生长。结论 微生物学等级差异影响了猪体重、血液及脏器、免疫系统的发育。     

胎猪皮肤前体组织异种移植研究

目的 系统筛选猪胚胎皮肤前体组织异种移植的最佳妊娠时间窗,了解其创面修复能力. 方法 取胎龄35、42、56、70 d的胎猪皮肤前体组织,制成微粒后移植于BABL/c裸鼠背部创面,以整形患者术后剩余皮肤或者成年猪皮覆盖.观察术后移植物生长发育特性,并于移植后6、12周取材,用组织学方法观察其形态结构及成瘤性. 结果 胎猪皮肤前体组织移植后具有如下特点:(1)能成活并继续生长发育,微粒可融合成片;胎龄35、42、56、70 d的前体组织移植后12周,新生组织面积分别为(18±8)、(47±6)、(31±12)、(20±8)mm2,其中胎龄42 d的组织与其余三者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)新生(猪)皮肤组织具有表皮层和真皮层,真皮乳头明显.(3)能生长成为具有毛发、皮脂腺及汗腺等皮肤附属器的"完整"皮肤,且表皮层有黑索细胞.(4)胎龄56、70 d的胎猪皮肤前体组织移植后未出现畸胎瘤. 结论 胎龄56 d的胎猪皮肤前体组织可用于异种移植修复皮肤创面.     

无菌猪的制备与微生物质量控制

菌群与宿主相互关系等热点研究促进了对无菌动物需求的迅猛发展。无菌猪作为一种特殊的模式动物,其在科学研究中不仅排除了背景微生物因素的影响,而且与常用的无菌小鼠相比,其在解剖、生理、代谢等方面与人更为相似,因此在生命科学研究领域具有重要的应用价值。本文结合现有国外无菌猪研究进展和本实验室在无菌猪研究积累,就无菌猪的制备与微生物质量控制进行简要探讨。     

人与巴马香猪无细胞真皮移植效果的比较

目的比较巴马香猪与人无细胞真皮植入大鼠后的相容性、血管化和收缩率等移植效果,为猪无细胞真皮替代人无细胞真皮用于深度创伤治疗提供依据。方法以机械去表皮法制备巴马香猪与人无细胞真皮经辐照处理后移植于Wistar大鼠全厚皮肤缺损创面进行初步的淋巴细胞浸润、成纤维细胞进入生长、血管化、新生皮肤和创面收缩率比较。结果移植1个月后,移植两种无细胞真皮的的创面均完全愈合,组织学检测表明:巴马香猪无细胞真皮与人无细胞真皮相比炎症的发生时间较长,血管化速度和细胞迁入生长缓慢,而愈合后创面收缩率差异不显著。结论巴马香猪无细胞真皮的生物相容性和血管化等移植效果不及人无细胞真皮,主要影响因素可能在于二者蛋白质的差异。     

小肠黏膜下层仿生双层敷料复合富血小板血浆促进难愈性皮肤溃疡的修复

目的探讨小肠黏膜下层(SIS)仿生双层敷料复合富血小板血浆(PRP)对大鼠难愈性皮肤创面修复的影响。方法 40只SD大鼠随机分为对照组(Control组)、SIS修复组(SIS组)、PRP修复组(PRP组)、SIS复合PRP修复组(SIS+PRP组),对大鼠背部直径3 cm的区域进行25 Gy的辐照后,于辐照区制作1 cm×1 cm全层皮肤缺损,SIS+PRP组创面予以滴加了0. 2 m L PRP的SIS仿生双层敷料覆盖后外贴手术贴巾,SIS组创面予以滴加了0. 2 m L PBS的SIS仿生双层敷料覆盖后外贴手术贴巾,PRP组创面予以滴加0. 2 m L PRP后外贴手术贴巾,对照组创面予以滴加0. 2 m L PBS后外贴手术贴巾。观察各组大鼠术后第3,7,11,15天的创面愈合情况。采用酶联免疫吸附实验检测术后15 d时大鼠难愈性皮肤创面的MDA含量及SOD活性,采用蛋白质免疫印迹检测Nrf2信号通路相关蛋白的表达情况。结果 SIS+PRP组在术后第3,7,11,15天的愈合率均优于其他组,差异具有统计学意义(P 0. 05)。术后15 d,SIS+PRP组皮肤创面的MDA含量(5. 58±0. 86)μmol/g显著低于对照组(13. 71±2. 04)μmol/g、SIS组(11. 26±1. 79)μmol/g、PRP组(10. 18±1. 73)μmol/g,差异具有极显著性统计学意义(P 0. 01); SIS+PRP组皮肤创面的SOD含量(17. 60±3. 89) U/m L显著高于对照组(5. 02±2. 05) U/m L、SIS组(7. 10±2. 41) U/m L、PRP组(11. 37±2. 96) U/m L,差异具有极显著性统计学意义(P 0. 01)。与对照组、SIS组和PRP组相比较,SIS+PRP组皮肤创面Nrf2的表达量显著升高(P 0. 01),p-AKT及p-GSK-3β的表达量显著升高(P 0. 01),而Fyn的表达量则下降(P 0. 05)。结论小肠黏膜下层复合富血小板血浆可以促进难愈性皮肤溃疡的修复,可能与Akt/GSK-3β/Fyn信号通路介导的Nrf2/ARE活化有关。     

小肠黏膜下层冷冻凝胶用于细胞移植支架的研究

目的 利用猪小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)制备一种可用于细胞移植的具有形态记忆功能的新型支架材料.方法 将脱细胞SIS粉末溶解,通过自制混匀装置,用不同浓度的碳化二亚胺冷冻交联制备不同参数的SIS冷冻凝胶.检测弹性形变及形态记忆功能.扫描电镜观察并测定孔径大小,检测吸水率、体外降解率和机械性能,观察小鼠成纤维细胞在支架上的黏附生长情况.结果 SIS冷冻凝胶压缩达85％以上仍可复原,可通过注射器注射.扫描电镜提示具有疏松多孔结构,孔隙相通,孔径大小为(106.63 ±28.90) μm.随着碳化二亚胺浓度的升高,吸水率、细胞毒性差异无统计学意义,降解速率逐渐减缓,机械强度逐步提升.小鼠成纤维细胞在SIS冷冻凝胶上呈线形、纺锤形生长,有大量伪足,部分融合成片紧贴于材料表面及孔隙内壁.结论 具有弹性形变和形态记忆功能的可注射SIS冷冻凝胶生物、物理性能良好,是一种良好的细胞移植支架材料.     

2种腺相关病毒介导的增强型绿色荧光蛋白对人成纤维细胞转染效率的研究

目的 比较2种不同腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)介导的增强型绿色荧光蛋白对人皮肤成纤维细胞(human fibroblast, HFB)的转染效率.方法 原代分离培养人皮肤成纤维细胞并鉴定,按照感染复数(multiple of infection,MOI)为104、105、106转染传2代的人成纤维细胞,流式细胞检测AAV2-EGFP和AAV2/1-EGFP对HFB的转染效率,倒置荧光显微镜观察转染后的荧光强度.MTT法检测AAV2-EGFP和AAV2/1-EGFP对HFB的毒性.结果 腺相关病毒AAV2-EGFP对HFB的转染效率随着MOI增加而增高, MOI为104时转染效率为(7.68±1.18)%,当MOI达到105后,转染效率稳定在(22.16±5.59)%,随着MOI增加,最高至MOI 106转染效率无显著提高.而病毒AAV2/1对于HFB的转染效率在MOI 为106转染效率仅为(3.47±0.93)%.2种病毒在转染过程中,细胞生长正常,MTT显示各转染组与未转染组的吸光度值无统计学差异.结论 AAV2载体对体外培养的HFB转染效率高于AAV2/1,但2种病毒载体对人皮肤成纤维细胞转染效率均不高,AAV2/1-EGFP对HFB几乎无感染能力.     

辐照猪皮与重组人表皮生长因子凝胶治疗小面积Ⅱ度烧伤的临床观察

目的观察辐照猪皮与重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)凝胶用于治疗Ⅱ度烧伤的临床疗效。方法选择135例Ⅱ度烧伤患者,分成3组,分别是辐照猪皮组、rhEGF凝胶组和对照组(碘伏油纱组),观察创面愈合时间、患者疼痛度、换药工作量、色素沉着度、愈合后效果以及1年后随访效果。结果不同治疗方式的愈合时间:对照组>rhEGF凝胶组>辐照猪皮组。辐照猪皮组和rhEGF凝胶组对Ⅱ度烧伤创面的治疗效果均优于对照组,平均愈合时间提前3～5 d,差异有统计学意义(P<0.01),且辐照猪皮组效果要略优于rhEGF凝胶组(P<0.05);rhEGF凝胶组和辐照猪皮组的患者疼痛度减轻及换药工作量相对对照组明显减少(P<0.01),且患者创面愈合效果良好、较少引起色素沉着,1年后部分患者随访证实远期愈合效果好,较少引起瘢痕增生。结论辐照猪皮和rhEGF治疗Ⅱ度烧伤效果确切、预后良好,临床上值得广泛使用。