慢性粒细胞白血病合并自身免疫性溶血性贫血1例分析

对慢性粒细胞白血病合并自身免疫性溶血性贫血1例分析如下。 1病历摘要 女，38岁。因左上腹不适伴反复乏力、盗汗、咳嗽3个月入院。查体：T38．0℃，全身皮肤及巩膜轻度黄染，咽稍红，扁桃体不大，全身浅表淋巴结未扪及肿大；双下肺呼吸音稍粗，未闻及干湿罗音；心脏无特殊；腹膨隆，巨脾，Ⅰ线10cm，Ⅱ线12cm，Ⅲ线2cm，质中，轻压痛。入院血常规：WBC286．2×10^9／L，HB75g／L，PLT302×10^9／L，幼稚细胞62％，网织红细胞（RET）1．9％；骨髓涂片：粒系增生极度活跃，中性中幼粒＋晚幼粒＋杆状核为71％；Ph染色体阳性；肝功能：白蛋白31g／L，总胆红素（TB）64．1μmol／L，     

苦参碱通过MAPK信号转导通路促进U937细胞凋亡

目的:探讨苦参碱(mattine,Mat)对人淋巴瘤细胞株(U937)的抗癌作用及其分子机制.方法:用0.1,0.2,0.3,0.4,0.5 g·L~(-1)Mat处理U937细胞后,分别采用倒置显微镜和电子显微镜观察细胞形态学变化;台盼蓝拒染法及MTT实验检测细胞增殖抑制作用;Westem blot方法检测细胞MAPK的磷酸化活性.结果:0.2 g·L~(-1) Mat对人组织淋巴瘤U937细胞的增殖有抑制作用;0.2 g·L~(-1) Mat作用U937细胞48 h后,倒置显微镜下可见细胞数目减少,有些细胞变小、变圆,随着Mat作用浓度的增加,U937细胞逐步出现增多的凋亡细胞;Mat可以抑制U937细胞中ERK的活性,并在一定程度上提高p38和JNK的活性.结论:Mat可以在体外抑制人淋巴瘤细胞U937的增殖作用,诱导其凋亡,并且Mat可能通过抑制U937细胞中ERK的活性,提高p38和JNK的活性发挥其诱导凋亡作用.     

P38MAPK信号转导通路在大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中的作用

目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理后细胞内磷酸化P38MAPK(P-p38MAPK)表达及分布变化;Western blot检测大蒜素处理前后细胞内P-p38MAPK和Fas蛋白表达量的变化.结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性.其72h中效浓度(IC_(50))为12.8 mg·L~(-1).Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加.免疫细胞化学法检测药物处理后P-p38MAPK表达增加,主要分布于细胞核与细胞浆,而阴性对照组仅弱表达.Western blot结果分析P-p38MAPK,Fas蛋白表达量随大蒜素浓度的增加而增加,呈剂量依赖性.其阴性组、72 h的1/2 IC_(50)组、IC_(50)组P-p38MAPK蛋白表达水平(相对灰度值)分别为0.259 8±0.013 2,0.361 2±0.008 3,0.505 6±0.005 5;Fas蛋白表达水平分别为0.287 4±0.008 9,0.426 8±0.007 9和0.597 1±0.010 9,差别均有显著性意义(P<0.01).结论:大蒜素可诱导THP-1细胞凋亡,其诱导凋亡机制可能是通过激活P-p38MAPK/Fas途径实现.     

大蒜素诱导THP-1细胞凋亡的作用及机制

目的:探讨大蒜素对急性单核细胞白血病细胞株THP-1凋亡及凋亡基因Fas/FasL表达的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;AO/EB染色观察细胞凋亡形态;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;FCM检测细胞凋亡率和细胞周期分布;免疫细胞化学法和Western blot观察细胞Fas、FasL蛋白表达。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,呈时间-剂量依赖性,72h中效浓度(IC50)为12.8mg/L。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。6.4、12.8mg/L大蒜素作用THP-1细胞72h后,FCM检测G0/G1期细胞比率明显上升,而S期比率明显下降,均出现凋亡峰,凋亡率分别为(22.93±2.93)%和(36.73±2.88)%,呈剂量依赖性,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。在荧光显微镜下可区分早、晚期凋亡细胞、活细胞和坏死细胞。免疫组化显示大蒜素作用后Fas/FasL蛋白上调,主要分布在细胞浆和细胞膜。Western blot结果显示Fas/FasL蛋白表达量随大蒜素浓...     

苦参碱诱导U937细胞分化及其相关机制

目的:观察苦参碱对U937细胞诱导分化作用,并探讨其可能作用机制.方法:采用流式细胞仪检测细胞周期分布;硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验、CD11b,CD14表面抗原的表达及细胞形态学检测细胞分化;Western Blot检测p21Waf1/Cip1的蛋白表达.结果:苦参碱作用U937细胞后,细胞周期分析提示发生S期阻滞;NBT阳性细胞率明显增高(P<0.05),CD11b表达增加(P<0.05);细胞内p21Waf1/Cip1表达增高(P<0.05).结论:苦参碱能诱导U937细胞分化,其机制可能与细胞周期调控蛋白p21Waf1/Cip1表达的改变有关.     

苦参碱对U937细胞及人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响

目的：观察苦参碱（Matrine，Mat）对U937细胞及人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）增殖的影响。方法：采用体外培养技术，通过细胞形态、MTT实验、细胞周期测定观察Mat对U937细胞及HUVECs增殖的影响。结果：Mat（0．2～0．5mg／mL）作用24h后对U937细胞均有增殖抑制作用（P〈0．05或P〈0．01），在该浓度范围内呈剂量和时间依赖性，其作用U937细胞48h的半数抑制浓度（IC50）约为0．4mg／mL，有效作用时间为1d；Mat（0．1～0．5mg／mL）作用24、48、72h后对HUVECs增殖无明显抑制作用，亦无剂量和时间依赖性（P〉0．05）；Mat（0．2～0．5mg／mL）作用U937细胞48h后，S期细胞比例增加，细胞发生S期阻滞（P〈0．05或P〈0．01）；Mat（0．1～0．5mg／mL）作用HUVECs 48h后，对细胞周期无明显影响（P〉0．05）。结论：一定浓度Mat对U937细胞具有增殖抑制作用，呈时间-剂量依赖关系。Mat在一定浓度和时间下不能抑制HUVECs增殖，对其细胞周期亦无明显影响。     

环孢素A对THP-1细胞多药耐药相关蛋白-1表达的影响

目的:观察环孢素A(Cyclosporin A,CsA)处理后急性单核细胞白血病细胞株THP-1多药耐药相关蛋白-1(Multidrug resistance associated protein-1,MRP1)表达量和活性的变化,探讨CsA逆转MRP1的相关机制及THP-1细胞对柔红霉素(Daunorubicin.DNR)的增敏作用.方法:免疫细胞化学法和Western blot法检测CsA处理后THP-1细胞MRP1表达量的改变,噻唑蓝(MTT)法、荧光分光光度法、共聚焦激光扫描显微镜(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)法分别检测CsA处理后50%THP-1细胞生长受抑的DNR浓度(IC50)、THP-1细胞内DNR含量及分布.结果:CsA处理组较对照组MRP1表达量定性、定量检测均增加(P＜0.05);IC50明显下降(0.558 4±0.0670与1.4997±0.2338,P＜0.01),细胞内DNR含量明显增加(126.500 0±14.781 5与20.9000 4-2.497 5,P＜0.01),分布更加均匀.结论:CsA增加MRP1的表达量,但降低其活性,提示CsA通过降低MRP1活性而非减少其表达量实现对MRP1的逆转作用和对THP-1细胞的增敏作用     

环孢素A对THP-1细胞的增敏作用及与多药耐药相关蛋白-1的关系

目的:观察环孢素A(CsA)处理急性单核细胞白血病细胞株THP-1后对柔红霉素(DNR)的耐药性及与多药耐药相关蛋白-1(MRP1)表达的关系,探讨CsA对THP-1细胞的化疗增敏作用及相关机制.方法:噻唑蓝(MTY)法、荧光分光光度法、共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)法分别检测CsA处理前后50%THP-1细胞生长受抑的DNR浓度(IC50)、THP-1细胞内DNR含量及分布的变化.免疫细胞化学法、Western blot法检测CsA处理前后THP-1细胞MRPI蛋白表达量的变化.结果:CsA处理后11{P-1细胞的IC50明显下降(1.536 4±0.175 1 vs 0.558 8±0.054 7,P<0.01),细胞内DNR含量明显增加(21.40±1.71 vs131.96±16.45,P<0.01),且胞浆内分布更加均匀;同时MRP1蛋白表达量增高(0.266 5±0.004 2 vs 0.316 9±0.006 2,P<0.01),结论:CsA可增加THP-1细胞对DNR的敏感性,降低其耐药性,并提示CsA对THP-1细胞耐药性的改变不是通过降低其MRPl蛋白表达量来实现的.