牛磺酸对急性重型颅脑创伤大鼠脑血流影响的研究

<正>目的:研究急性重型颅脑创伤大鼠后脑皮层血流(CBF)变化以及牛磺酸干预后的变化。方法:将SD大鼠(290±20g)随机分为四组:假手术组(Sham组)、脑创伤组(TBI组)、牛磺酸低剂量组(100mg/kg,Tau-L组)     

牛磺酸对大鼠脑创伤凝血状态影响的研究

目的应用血栓弹力图(TEG)评价牛磺酸(taurine)治疗脑创伤(TBI)SD大鼠的血液凝固状态变化情况。方法 SD大鼠随机分为假手术组、TBI组、牛磺酸治疗组(TAU组)。TBI组和TAU组用液压脑损伤打击仪建立重型TBI模型(左脑打击)。造模成功后即刻从尾静脉给药,假手术组和TBI组给予相同剂量的生理盐水。牛磺酸治疗组给予牛磺酸治疗(给药量为200mg/kg)。每组动物连续给药7天,第8天从颈总静脉及腹主动脉取血,用TEG测量各组大鼠血液凝固情况。结果各组动脉血和静脉血比较:假手术组动脉血达到最大振幅的时间(TMA)、综合凝血指数(CI)与静脉血比较差异有统计学意义;TBI组动脉血反应时间(R)、血凝块的形成时间(K)、α角、最大振幅(MA)、CI与静脉血比较差异有统计学意义。各组静脉血组比较:TAU组静脉血CI值明显高于假手术组和TBI组。结论脑创伤8天大鼠的动脉血与静脉血液凝固状态存在差别,而TAU组则无此现象,这说明牛磺酸可能具有平衡TBI后动静脉血液凝固性的作用,但长时间使用牛磺酸,可能导致血液高凝状态。     

亚低温对创伤性脑损伤后线粒体呼吸功能和超微结构的影响

目的 研究亚低温治疗对创伤性脑损伤(TBI)大鼠线粒体超微结构和呼吸功能的影响.方法 利用液压打击(FPI)制作中度TBI大鼠模型,并随机分为假手术对照组、常温TBI组(肛温36～37℃)、亚低温TBI组(肛温31～33℃,低温持续2 h).各组于脑外伤后2,24 h、3 d和7 d断头取脑,取伤侧海马组织固定,透射电镜观察线粒体形态改变.差速离心法提取伤侧大脑线粒体,采用Clark氧电极法测定线粒体的氧呼吸速率,计算呼吸控制比(RCR)值和磷氧比值(P/O).结果 (1)电镜下常温TBI组线粒体结构形态损伤程度较重,亚低温TBI组线粒体形态基本完好;(2)线粒体RCR值和P/O值在TBI后2 h就显著下降,以24 h为最低(P＜0.01),在7 d时RCR仍然显著低于假手术对照组,P/O值恢复正常.亚低温TBI组线粒体RCR值变化趋势同常温TBI组,但在3 d内RCR值均显著高于常温TBI组,P/O值在3 d后恢复正常.结论 TBI后,线粒体的呼吸功能明显下降,亚低温可以明显改善线粒体的呼吸功能,保护线粒体结构完整性.     

TauT转基因大鼠的构建及鉴定

目的:为研究牛磺酸转运体（TauT）在神经系统疾病中的作用，构建并繁育脑特异性表达TauT转基因模型大鼠（TauT+/-大鼠）。方法:将TAUT cDNA插入脑特异性PDGF启动子下游，构建转基因表达载体，显微注射法建立TAUT转基因大鼠。Genotype鉴定转基因大鼠的基因型。经过配种繁殖和鉴定后，绘制2～8月龄生长曲线、测定各脏器质量、脏体系数和脏脑系数；RT-PCR技术检测TauT+/-大鼠大脑组织中Slc6a6 mRNA基因表达水平；Western blot 检测TauT+/-大鼠在大脑、心、肝组织的TauT蛋白表达，并对TauT+/-大鼠大脑组织进行免疫组化染色和HE染色，IPP软件对免疫组化图像进行处理。结果:成功构建PDGF-Slc6a6表达质粒，得到3只TauT+/-大鼠F0代。经过繁殖和鉴定，与同窝阴性大鼠（TauT-/-大鼠）比较，TauT+/-大鼠大脑组织Slc6a6 mRNA基因表达水平显著升高，大脑、心、肝组织TauT蛋白表达水平没有显著性差异，HE染色和免疫组化结果显示TauT+/-大鼠脑组织海马区和皮层区未见异常，TauT蛋白表达没有显著性差异。结论:成功构建TauT转基因大鼠品系，为后续研究TauT在大脑中的作用提供一种较好的动物模型。     

牛磺酸对脑创伤大鼠脑组织代谢的影响

目的:研究牛磺酸对脑创伤后大鼠脑组织代谢的影响情况.方法:将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、脑创伤组(TBI)及牛磺酸治疗组(TAU),每组10只.TBI组和TAU组用液压打击仪制造左侧脑创伤模型,TAU组于伤后立即从尾静脉给予牛磺酸(200 mg/kg)治疗,sham组和TBI组给予等量的生理盐水.用微透析探针收集各组左侧肺组织的1～3 h 、22～24 h、7d的脑组织间液,用CMA600全自动生化分析仪检测细胞间液的葡萄糖、乳酸、甘油和丙酮酸的含量,并计算乳酸/丙酮酸的比值.结果:(1)在损伤后7d内,3组海马区脑组织的葡萄糖含量差异无统计学意义(P＞ 0.05):TBI组的葡萄糖随时间的推移而显著升高.(2)TBI组的乳酸含量在3个时间点内均显著高于sham组;生磺酸在24h后显著降低损伤后的乳酸含量,与sham组比差异无统计学意义(P＞0.05).(3)与sham组比较,脑创伤后伤侧脑组织的甘油无显著变化,而牛磺酸在7d时显著降低其含量.(4)TBI组的乳酸/丙酮酸比值在3个时间点内均显著高于sham组,并随时间延长而显著下降;牛磺酸显著降低损伤后的乳酸/丙酮酸比值,但均显著高于sham组.结论:牛磺酸对调节脑创伤后的代谢紊乱有一定的积极作用.     

亚低温对颅脑创伤大鼠脑线粒体活性氧和ATP酶合成能力的影响

目的:研究亚低温治疗对颅脑创伤(TBI)大鼠线粒体活性氧(ROS)生成和ATP酶合成能力的影响。方法:72只动物随机分为假手术组、常温TBI组(肛温36℃～37℃)、亚低温TBI组(肛温31℃～33℃,亚低温持续2h),后2组利用液压打击(FPI)制作中度TBI模型。各组于脑外伤后2h,24h,3d和7d断头取伤侧大脑组织,差速离心法提取伤侧脑线粒体,酶荧光法检测线粒体ATP合成能力,荧光法测定线粒体ROS的生成。结果:常温TBI组脑创伤后线粒体ATP合成能力显著下降,24h降至最低,至7d时仍显著低于假手术组,ROS在各时间点均显著升高,3d时为最高。亚低温TBI组线粒体ATP合成能力在各时间点均高于常温TBI组,除2h外,其他时间点ROS低于常温TBI组。结论:颅脑创伤后线粒体ATP合成能力显著下降,ROS显著升高,亚低温可以改善线粒体ATP酶合成能力,抑制活性氧大量生成,从而保护脑组织。     

脑蛋白水解物中多肽组分的高效毛细管电泳分析

目的 利用高效毛细管电泳法比较2种水解方法提纯的脑蛋白水解物中的多肽组分,同时监测进口脑蛋白水解物注射液的多肽组分分布.方法 采用固相萃取法提取脑组织中的多肽成分,以PACE/A5500型高效毛细管电泳仪对进口脑蛋白水解物注射液和本实验室提取的脑组织匀浆物进行比较.结果 进口脑蛋白水解物注射液中多肽成分大部分集中在＞14400区域,本实验室提纯的脑蛋白水解物成分中多肽多集中在相对分子质量6000 ～ 14 400区域,且纯度及含量均较高.结论 高效毛细管电泳法可有效地对脑蛋白水解物注射液中多肽组分进行分析和比较,2种提纯方法对脑蛋白的裂解能力相差不大.     

牛磺酸对重型颅脑创伤大鼠脑线粒体呼吸功能的影响

线粒体是产生能量的重要部位.颅脑创伤使得神经元线粒体电子传递链遭到破坏,氧化呼吸功能受损,引起一系列脑供氧减少的级联反应~([1]).     

重型脑创伤患者脑细胞间液甘油浓度研究

目的研究重型脑创伤后影响脑细胞间液甘油(Gly)浓度变化的因素。方法连续监测53例重型颅脑创伤患者近损伤区脑细胞间液Gly浓度和局部脑血流(CBF),同时监测颅内压(ICP)及脑灌注压(CPP)。选择每小时CPP和CBF的最小值及ICP的最大值与该小时的Gly浓度匹配。根据局部CBF、ICP、CPP及预后将所有Gly样品分组。结果(1)Gly、CCP及CBF与预后的关系:与中残或重残组比较,植物生存或死亡组患者Gly显著增高而CCP及CBF显著降低(P<0.05);与恢复良好组比较,中残或重残组Gly显著增高而CCP及CBF显著降低(P<0.05)。(2)ICP,CCP,CBF对Gly的影响:ICP>15mmHg组、CCP<70mmHg组及CBF<50AU分别比ICP<15mmHg组、CCP>70mmHg及CBF50￣150AU组Gly浓度显著增高(P<0.01)。(3)病理类型和Gly浓度的关系:弥漫性轴索损伤Gly浓度最高,比硬膜外血肿及硬膜下血肿显著增高(P<0.05),但与脑挫裂伤患者无显著差异。结论Gly浓度可以反映原发和继发性脑损伤的严重程度,是细胞膜降解和脑缺血的可靠指标。     

重型脑损伤患者脑组织细胞外液成分的变化

目的　研究重型脑损伤患者的治疗结果与伤后早期脑组织细胞外液生化成分间的关系。　方法　对 4 5例格拉斯哥昏迷评分 (GCS) 3～ 8分的患者行脑组织微透析取样监测 10～ 96h ,测定葡萄糖、乳酸、丙酮酸浓度并计算乳酸 /葡萄糖和乳酸 /丙酮酸比值。全部患者在伤后 6个月行格拉斯哥预后评分 (GOS)。　结果　各项指标在GOS良好组、不良生存组和死亡组间差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1) ,GOS与乳酸 /葡萄糖 (r=- 0 .75 6 ,P <0 .0 0 1)和乳酸 /丙酮酸 (r =- 0 .115 ,P =0 .0 4 2 )呈负相关 ,GOS与丙酮酸 (r=0 .5 71,P <0 .0 0 1)、葡萄糖 (r =0 .4 74 ,P <0 .0 0 1)和乳酸 (r =0 .4 80 ,P <0 .0 0 1)呈正相关。　结论　通过微透析监测脑细胞外液成分的变化 ,可以揭示创伤后脑组织的能量代谢特点并有助于判断患者的预后。