皮肤黑素瘤中miRNA-34c的表达对促血管新生因子VEGF-A、VEGFR-1的影响

目的探讨皮肤黑素瘤中miRNA-34c的表达以及其对促血管新生因子VEGF-A和VEGFR-1的影响。方法 Northern blotting检测原代人黑素瘤细胞、黑素瘤细胞株A375和原代人表皮黑素细胞miRNA-34c表达。构建miRNA-34c基因过表达与基因敲低的黑素瘤细胞株A375细胞系即高表达miRNA-34c组和低表达miRNA-34c组,以空载体转染黑素瘤细胞株A375作为空载体对照组。CCK-8法检测各组细胞增殖活性。qRT-PCR和Western blotting分别检测各组VEGF-A、VEGFR-1 mRNA和蛋白表达。结果与原代人表皮黑素细胞相比,黑素瘤细胞株A375和原代人黑素瘤细胞中miRNA-34c的表达降低(P<0.05)。高表达miRNA-34c组、低表达miRNA-34c组和空载体对照组细胞增殖活性无明显差异(P>0.05)。高表达miRNA-34c组VEGF-A、VEGFR-1的mRNA和蛋白表达较空载体对照组降低(P<0.05)。低表达miRNA-34c组VEGF-A、VEGFR-1的mRNA和蛋白表达较空载体组升高(P<0.05)。结论 miRNA-34c在皮肤黑素瘤中呈现特异性下调,miRNA-34c可能通过对促血管新生因子VEGF-A、VEGFR-1的下调参与皮肤黑素瘤的发生与发展。     

基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱仪快速鉴别甲氧西林耐药和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌的研究

目的：分析基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱仪（ matrix-assisted laser desorption／ionization time-of-flight mass spectrometry , MALDI-TOF MS）快速鉴别甲氧西林耐药和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。方法收集浙江大学医学院附属第二医院已保存的临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）25株和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）30株用于模型的建立。同时选取34株临床分离株（12株MRSA和22株MSSA）用做模型验证菌株。 MALDI-TOF MS对所有菌株进行鉴定,ClinProTools 3．0软件对MALDI-TOF MS鉴定细菌所产生的质谱峰图进行分析。结果 ClinPro-Tools软件的4种算法所得出的结果基本一致,灵敏度均大于95．0％,其中遗传算法（GA）的灵敏度最高（100．0％）;除监督式神经网络算法（ SNN）外,其余3种算法的特异性均大于90．0％。质荷比为3279、6485、6555和3299 m／z的质谱峰是用于区分MRSA和MSSA的最为主要的特征性峰。受试者工作特征曲线（ ROC）显示,这4个特征性峰的曲线下面积（ AUC）均大于0．9;凝胶浏览图显示,MSSA组的3279、6485、6555 m／z峰的蛋白强度高于MRSA组,而3299 m／z峰的蛋白强度低于MRSA组。外部验证显示,GA模型对MRSA组的准确鉴定率为83．3％,对MSSA组的准确鉴定率为90．9％。结论在严格控制实验条件的情况下,MALDI-TOF MS可快速准确地鉴别MRSA和MSSA,具有耗时短,灵敏性高,特异性高的优点。准确鉴定的同时区分MRSA和MSSA,尽早为临床防治MRSA提供参考依据,限制其传播及暴发流行。     

胰岛素注射卡的制作与应用

使用正确的方法注射胰岛素能最大限度地发挥疗效，并能降低患者注射时的不适感。为了提高胰岛素的利用效率和患者的舒适度，我科设计并应用了胰岛素注射卡，不仅提高了护理操作质量，又起到了安全警示作用，得到了患者及家属的好评。现将方法介绍如下。     

单磷酸腺苷激活的蛋白激酶能量代谢通路对心肌肥厚形成的作用

多种分子机制可以导致心肌肥厚,其中能量代谢紊乱是重要的分子机制之一,介导这一机制的关键是单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)能量代谢通路。近年来发现与心肌能量代谢密切相关的过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)通路,介导炎症与纤维化的核转录因子(NF)-κB通路以及神经体液调节因子相关P13K/AKT/GSK3β信号通路都和单磷酸腺苷激活的蛋白激酶密不可分。     

摩根摩根菌中质粒介导KPC-2型碳青霉烯酶的检测

目的 研究碳青霉烯耐药摩根摩根菌的分子流行病学及其耐药机制.方法 2010年10月-2011年2月从杭州市中医院分离到7株碳青霉烯不敏感的摩根摩根菌.脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株之间的同源性;琼脂稀释法测定抗生素对细菌的最低抑菌浓度(MIC);接合试验、质粒图谱分析、特异性PCR扩增和序列分析等研究细菌对碳青霉烯耐药的分子机制.结果 分离自急诊监护病房的6株摩根摩根菌PFGE条带完全相同或相差1～3个条带;分离自重症监护病房的1株摩根摩根菌与其他6株PFGE条带差异明显.7株摩根摩根菌的耐药模式基本相同.亚胺培南、美罗培南和厄他培南的MIC值差异较大,分别为8μg/ml(耐药)、1μg/ml(敏感)和0.25～0.50μg/ml(敏感或中介耐药).7株摩根摩根菌对青霉素类、氨曲南和环丙沙星耐药,对头孢菌素类耐药或敏感,对阿米卡星敏感.接合试验使大肠埃希菌EC600对碳青霉烯类抗生素由敏感变为耐药,对其他β-内酰胺类抗生素也均耐药.摩根摩根菌及转移接合子均含有一个约为60kb的质粒.PCR扩增及测序表明摩根摩根菌及转移接合子均产KPC-2型碳青霉烯酶,且携带qnrS1基因.结论 首次在摩根摩根菌中检测到KPC-2型碳青霉烯酶,KPC-2是引起摩根摩根菌对碳青霉烯类不敏感的主要原因.     

胰性脑病的治疗与护理体会

胰性脑病继发于急性重症胰腺炎,由于大量蛋白水解酶和磷脂酶A等通过血脑屏障损伤脑组织和血管,造成中枢神经损伤的一种脑病,属于多脏器衰竭的一部分。主要表现为神经精神异常,定向力缺乏,精神错乱或伴有幻觉躁狂等。常为一过性,可完全恢复正常。也可遗留精神异常。     

多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素耐药状况分析

目的 了解多重耐药鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素及新药替加环素的耐药状况.方法 收集2008-2009年浙江省4所教学医院的602株临床分离鲍曼不动杆菌,采用琼脂稀释法检测其对13种临床常用抗生素的敏感性,以及对多黏菌素B和替加环素的敏感性.同时,采用PFGE技术对24株多重耐药鲍曼不动杆菌进行同源性分析,以确定菌株间的亲缘关系.结果 浙江省4家教学医院2008-2009年分离的鲍曼不动杆菌主要来自于呼吸道标本,2009年达到277株(86.0%),血液标本数量从2008年的15株(5.4%)下降到2009年的5株(1.5%),而其他标本无明显变化.鲍曼不动杆菌对临床常用的13种抗生素均有不同程度的耐药,耐药率35.0%～85.0%.与2008年相比,除左氧氟沙星和妥布霉素耐药率分别下降0.9%和9.0%以外,2009年其余抗生素耐药率均有不同程度地上升,头孢曲松和头孢吡肟耐药率增加了近10.0%,对碳青霉烯类抗生素亚胺培南和美罗培南的耐药率分别达到74.2%(239/602)和70.8%(228/602).鲍曼不动杆菌对替加环素显示了很高的耐药率,耐药率达到78.9%(475/602),而多黏菌素B耐药率仅为3.7%(22/602).PFGE分型显示2008-2009年24株鲍曼不动杆菌有6个克隆型,其中A型最常见,占50%.结论 鲍曼不动杆菌对替加环素的耐药加大了院内感染控制的难度,临床应加强控制,防止多重耐药菌的传播.     

加味八珍汤治疗人流术后气血两虚型月经量少的临床观察

目的:探讨加味八珍汤治疗人流术后气血两虚型月经量少的临床效果。方法:选取2014年10月~2016年10月我院收治的104例人流术后月经量少患者为研究对象,随机分为对照组和观察组各52例。对照组采用克龄蒙治疗,观察组采用加味八珍汤治疗,比较两组患者临床疗效。结果:观察组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论:采用加味八珍汤治疗人流术后气血两虚型月经量少疗效确切,可明显改善患临床症状。     

正常人左室心肌节段局部三维容量和收缩功能的定量研究

目的　应用动态三维超声心动图技术评价正常人的左室局部三维容量和局部收缩功能。方法　 4 1例健康查体人员 ,男性 2 4例 ,女性 17例 ,年龄 2 0～ 70岁 ,平均 (4 2± 12 )岁。采用 Agilent Sonos 5 5 0 0型彩色多普勒超声心动仪进行心脏二维图像的采集。采用 Tom Tec Gmb H型三维图像处理系统 ,以表面提取法重组心内膜边缘轮廓三维图像 ,自动计算每一节段的容量及收缩功能。结果　各节段局部舒张末容量测值从心尖到心底局部舒张末容量呈递增趋势 ;局部心搏量从后壁、下壁、侧壁、前间隔、前壁依次递增 ,在同一节段局部心搏量基本上是从心尖至心底依次递增 ;局部射血分数按前间隔、前壁、侧壁、后壁、下壁的顺序递减 ;各节段的局部 -整体射血分数按前间隔、前壁、侧壁、后壁、下壁的顺序递减。结论　应用动态三维超声心动图对局部心功能研究表明左室各节段收缩功能的三维分布并非均匀一致 ,收缩功能从后壁、下壁、侧壁、前间隔到前壁依次递增。     

多平面经食管超声心动图探查方法和基本切面的研究

在１９０例患者中进行了多平面经食管超声心动图（ＴＥＥ）探查方法和基本切面的临床研究，结果显示：（１）在１３岁以上的患者中，多平面ＴＥＥ检查具有高度的安全性和成功率；（２）采用探头撤退法、晶片旋转法、管体转动法和尖端扭曲法４种操作手法相结合的探查技术，可迅速获得诊断信息；（３）以解剖学标志作为定位基准，依次在胃底、胃食道交界、食道下段、食道中段、食道中。上段和食道上段６个水平，转动相控阵装置，探查０°、４５°、９０°和１３５°４个基本切面，可在绝大多数患者中显示心血管疾病的解剖学异常；（４）与单平面和双平面ＴＥＥ相比，多平面ＴＥＥ具有学习曲线短、图像易于解释、探头操作和患者不适少等优点，值得进一步推广应用。