干细胞临床应用安全性评估报告

目的通过对现阶段干细胞治疗技术的安全状况进行系统评价,为各层次决策者包括卫生行政部门和患者等提供合理选择干细胞治疗技术的科学信息和决策依据。
　　方法采用卫生技术评估方法对造血干细胞、间充质干细胞、胚胎干细胞、神经干细胞、脂肪干细胞和诱导多能干细胞在临床研究和应用中的死亡率,伤残率,不良反应的发生率、持续时间以及严重程度等方面进行系统评估。
　　结果造血干细胞移植最常用于治疗血液系统的恶性肿瘤,这一类别研究报告的不良反应较多,多数与合并使用的放化疗和移植前的预处理有关;异体造血干细胞移植易出现急慢性移植物抗宿主病（GVHD）,严重影响患者的预后。自体造血干细胞移植还常用于肿瘤或自身免疫性疾病放化疗后的支持,此时虽然仍会出现一些放化疗的不良反应,但不会出现 GVHD。自体造血干细胞移植尝试治疗一些肝脏和缺血性疾病等,不良反应报道相对较少。②无论是自体还是异体来源的间充质干细胞移植,在临床试验中未见明显的毒性反应和致瘤性报道,无 GVHD 报告。临床上见到的不良反应多数较轻微,短暂发热和注射部位局部疼痛偶有报道,有些不良反应与注射途径和部位有关。③胚胎干细胞移植的动物实验均表明有畸胎瘤的形成,尚未有关于直接用胚胎干细胞进行临床研究的报道。④神经干细胞移植多见于治疗神经系统疾病,未发现严重不良反应,无致瘤性报道。⑤脂肪干细胞移植治疗肛周瘘,未发现严重不良反应,无致瘤性报道。⑥诱导多能干细胞研究目前多数仍为方法的研究,无临床文献报道。动物实验表明诱导多能干细胞移植后其后代会发生肿瘤,同时诱导过程中反转录病毒的使用对安全性的影响仍需研究。
　　结论造血干细胞移植开展最早、研究最为深入和广泛,间充质干细胞是继造血干细胞之后临床应用研究最多的一类干细胞,神经干细胞和脂肪干细胞目前也进入临床试验阶段,胚胎干细胞和诱导多能干细胞因其致瘤性等安全问题,目前还在临床前研究阶段,临床试验报到很少。从目前文献看,自体造血干细胞、间充质干细胞、神经干细胞、脂肪干细胞等成体干细胞移植,相对来说比较安全。由于目前多数干细胞的临床研究尚处于试验阶段,病例数不多,特别是干细胞不似普通药品或生物制品,各项研究采用的制备方法、质量控制不尽相同,一项研究的数据不一定能全面反应所有同类干细胞的安全性,因此,干细胞的安全性需要随着干细胞的研究进展不断加以总结和完善。     

hTERT核心启动子驱动的条件复制型腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建并鉴定一种新型人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动的条件复制型腺病毒载体。方法采用PCR的方法克隆腺病毒E1区基因(E1A,E1B55K)、E1B的启动子(E1Bp)以及人端粒酶逆转录酶亚基启动子(hTERTp),以及2个目的基因:人GM-CSF和GFP(GreenFluorescenceProtein,GFP)。采用一系列分子生物学方法构建pShuttle-GFPSV55K穿梭质粒,应用此穿梭质粒与AdEasy-1腺病毒DNA在BJ5183细菌内重组得到重组腺病毒质粒,将其转染293细胞获得Ad-GFPSV55K重组腺病毒。PCR法鉴定重组腺病毒,噬斑形成实验测病毒滴度。结果经过酶切鉴定成功地构建了分别携带GM-CSF基因和GFP报告基因的腺病毒载体,病毒滴度为7×1010pfu/ml。结论成功获得由hTERT启动子驱动的条件复制型腺病毒载体,为肿瘤的基因治疗打下良好的基础。     

ZT胶闭合瘘管62例

从1986年6月至1990年6月,我们用 ZT胶粘合法闭合各种瘘管共62例,其中肛瘘37例,肠瘘11例,各种胸壁瘘管4例,颈部瘘管3例,乳腺瘘和肝脓肿切开引流后腹壁窦道各2例,腮腺瘘、胆汁瘘和脐尿管瘘各1例。效果较好。治疗方法对成瘘不久的瘘道,用生理盐水彻底冲洗后直接向窦道内注入 ZT 胶,注毕迅速局部加压,使窦道闭合。成瘘较久,管壁变硬者,先刮除瘘道内一切坏死组织,使之成新鲜创面,后注入 ZT 胶将瘘道加压闭合。对个别肛瘘,可将瘘管切开并切除瘘道疤痕组     

腺病毒载体对骨髓间充质干细胞体外分化能力的影响

目的 研究腺病毒栽体对Wistar大鼠骨髓间充质干细胞体外分化能力的影响.方法 密度梯度离心加贴壁培养法自2周龄Wistar大鼠骨髓中分离培养MSC,用携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体(Ad-GFP)感染,48 h后用流式细胞议拴测感染效率;在特殊诱导剂诱导下,用碱性磷酸酶(ALP)染色、ALP活性及油红O染色分别鉴定腺病毒栽体对MSCs成骨和成脂分化潜能的影响.结果 Ad-GFP感染MSC 48 h后97.82%的细胞表达GFP;MSC经特异性诱导剂诱导后可向脂肪及成骨细胞分化,Ad-GFP感染对MSC成脂及成骨分化能力无显著影响.结论 腺病毒载体对大鼠骨髓MSC感染效率高,且不影响其体外多向分化潜能,是基因修饰MSC的理想载体.     

应用ZT胶在外科手术中止血105例报告

从1986年6月至1991年4月,我们在外科手术中将 ZT 胶用于多处止血,收到较好的效果。现总结如下。本组105例。男73例,女32例。年龄2～72岁。其中外伤性脾破裂粘合止血6例,出血量550～2100ml。外伤性肝破裂止血7例,出血量200～2300ml。脾切除脾床止血9例,胆囊切除胆囊床粘合止血28例,肝癌肝叶切除后创面止血11例。直肠癌术中静脉破裂止血11例,脓胸纤维板剥脱胸壁创面止血4例,     

填塞法治疗吻合口颈部瘘

食管癌切除胃食管颈部吻合暴露好 ,吻合较易 ,吻合口瘘预后较好 ,切除肿瘤较彻底。随着颈部吻合病例的增多 ,吻合口颈部瘘的发生率相对增加。自 1990年以来我们应用填塞法处理吻合口颈部瘘效果较好 ,介绍如下。1　临床资料本组 16例 ,其中男 9例 ,女 7例 ,年龄在 4 1至 75岁之间。术后 72小时内发生瘘者 14例 ,72小时至 12 0小时之间 2例。应用填塞 1次 ,2至 3天治愈 ,仅 1例剧咳后油纱条脱出 ,再次填塞后治愈。无吻合口狭窄及颈部切口大瘢痕 ,也无瘘入纵隔内者。以往传统的换药引流伤口愈合至少需 10天以上。曾有 1例病人换药 1个月形成窦…     

中西医结合治疗糖尿病合并下肢溃疡34例

糖尿病人由于微血管及周围神经病变致局部营养障碍,受损后血运更加不良,修复能力差,易继发感染,形成溃疡后经久不愈,致残率高。作者于1990年～1997年间共收治糖尿病合并下肢溃疡患者34例,采用中西医结合治法,收到满意效果,现报道如下。1　临床资料1.1　一般资料　34例中男25例,女9例;年龄40岁～76岁,平均56.60岁;糖尿病病史3个月～14年,平均2.65年;胫部皮肤溃疡3个月～3年,平均8.55月。所有病例均为外伤后伤口经久不愈形成溃疡,其中7例为胫骨开放性骨折术后者,且术后才确诊为糖尿病,余伤前均有糖尿病病史。诊断符合WHO对糖尿病的诊断标准…     

我国免疫细胞治疗临床研究和应用的现状及管理对策

免疫细胞治疗又称细胞免疫治疗或细胞过继免疫治疗,近年来发展迅速,被誉为继手术、化疗、放疗后第四种最有前景的肿瘤治疗方法,其临床研究在国外非常活跃,某些种类的免疫细胞治疗也已经获得临床应用。但我国对免疫细胞治疗的管理尚不明晰,对我国免疫细胞治疗的发展非常不利,甚至给患者带来安全隐患。中国医药生物技术协会会同所属生物技术临床应用专业委员会首次将我国免疫细胞治疗调研结果公布,并在参考国际管理经验基础上对我国相关部门对免疫细胞治疗的管理提出对策,以期起到抛砖引玉的作用,为科学规范此项治疗建言献策。     

微小核糖核酸122(MicroRNA-122)定量检测技术性能评估

目的：对微小核糖核酸122（microRNA-122）的定量检测技术进行评估,探讨其临床应用价值。方法：采用miRFLP技术检测企业校准品、参考品和临床样本,评价该技术的分析性能与临床检测价值。结果：该方法定量下限为183 copies/μL,检测标准曲线183~1500000 copies/μL。高浓度平均回收率113.2%,低浓度平均回收率94.2%,比例系统误差为3.7%。人间精密度变异系数4.2%~1.3%;室间精密度变异系数6.4%~2.5%;批间精密度变异系数4.0%~1.5%;批内精密度变异系数4.1%~1.7%。试剂盒放置4℃ 12小时后的检测结果与预期靶值无明显差异。采集化疗后24小时内43例肿瘤化疗患者的血样,并分离血浆进行miRNA-122检测,将检测结果与现行诊断标准进行ROC方法学分析,CutOff值设定为14136copies/μL,与欧盟公布的PSHT HV健康志愿组（欧洲人群）miRNA-122的13356 copies/μL（95%）基本一致。结论：基于miRNA的微小核糖核酸（miRNA-122）定量检测技术具有性能优良、准确度高、稳定性好等优点,有较高的临床应用价值。