探讨金线莲对非酒精性脂肪肝病血脂的影响

目的探讨金线莲鲜草汁对高脂饮食所致小鼠脂质代谢紊乱的治疗作用。方法将60只C57小鼠随机分成5组:正常组,模型组,金线莲高剂量组,金线莲中剂量组,金线莲低剂量组,测定小鼠血清TC、TG、LDL等生化指标,观察金线莲对该模型的影响。结果金线莲鲜草可以显著降低由高脂饮食引起的小鼠血清胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)水平,对甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)效果不明显。结论金线莲鲜草汁对高脂饮食所致小鼠胆固醇及低密度脂蛋白的升高具有明显的保护作用。     

13-甲基十四烷酸对氧反常诱导大鼠胚脑皮质神经元凋亡和形态学损伤的保护作用

目的探讨13-甲基十四烷酸(13-MTD)对氧反常诱导大鼠胚脑皮质神经元凋亡和形态学损伤的保护作用。方法原代培养大鼠胚脑皮质神经元,并以神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫荧光法鉴定。将神经细胞随机分为正常对照组、模型组和不同剂量13-MTD组,每组设6个复孔。氧糖剥夺3h/再复氧糖24h(OGD3h/R24h)方法制备神经元氧反常模型,于再复氧糖即刻分别给予13-MTD 5、10、20、40mg/L干预。倒置相差显微镜下观察神经细胞形态改变;磺酰罗丹明B(SRB)法测定神经细胞存活率;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色法观察神经细胞凋亡;透射电子显微镜下观察神经元超微结构的改变。结果与正常组比较,模型组神经元呈现病理改变,神经细胞存活率显著下降(P0.01),细胞凋亡显著增多(P0.01),神经元超微结构损伤明显,可见核内染色质边集或凝聚成块状,胞质内细胞器明显减少甚至消失,线粒体肿胀、嵴断裂甚至消失等;与模型组比较,不同剂量的13-MTD可有效改善上述变化(P0.05,P0.01),使神经元形态及其超微结构损伤明显恢复,且存在剂量依赖关系,以13-MTD 20mg/L改善更显著(P0.01)。结论 13-MTD对氧反常诱导的大鼠胚脑皮质神经元损伤具有明显保护作用,其可能通过改善神经细胞形态和线粒体超微结构损伤,减少神经元凋亡,提高细胞存活率。     

双炔失碳酯α、β单体体外抗前列腺癌作用比较

目的比较双炔失碳酯（ANO）的两个差向异构体β、β-ANO体外抗前列腺癌作用的差别。方法氧化铝柱层析法分离纯化仅、B单体,薄层分析法定性检测所分离的产物;在常规培养液中,以4～32μmol·L^-1的β、β-ANO分别作用于人前列腺癌非激素依赖型细胞DU145、PC－3和激素依赖型细胞LIA、LNCaP、RV1,作用时间分别为3d,5d,SRB法测细胞生存率;在去除激素培养液中,以不同浓度的α、β－ANO分别作用于激素依赖型细胞,同时加入雄激素拟似剂（R1881）,SRB法测细胞生存率;以32μmol·L^-1的α、β-ANO分别作用于LNCaP、DU145细胞,相差显微镜观察细胞形态和数量的变化。结果对于非激素依赖型和激素依赖型细胞,α-ANO作用均强于α—ANO,且二者作用差距具有时间和剂量依赖性;α—ANO对抗雄激素的促细胞生长作用强于β—ANO,具有时间和剂量依赖性;相差显微镜观察结果表明,α-ANO作用后,细胞形态及数量变化较之β—ANO更为显著。结论α-ANO体外抗前列腺癌作用强于β—ANO。     

喜树碱类抗癌物质对拓朴异构酶Ⅰ的作用研究进展

喜树碱(CPT)是从植物喜树中分离到的一种生物碱,其化学结构见图1,临床试用发现毒副作用较大,限制了它的应用。近年来由于对其专一作用于拓朴异构酶Ⅰ(Topo-Ⅰ)机制的深入研究,以及合成了一系列具有比喜树碱更强的抗癌活性衍生物和同类物,人们对其进一步发展又引起极大的兴趣。本文就喜树碱及其衍生物研究的最新进展包括作用机制、耐药性和构效关系作扼要介绍。     

α-双炔失碳酯抗激素依赖型与非激素依赖型前列腺癌的作用比较

 目的 比较α-双炔失碳酯（α-Ano）对激素依赖型与非激素依赖型前列腺癌体内外作用强弱的差别。方法 应用SRB细胞染色法检测α-Ano对人前列腺癌激素依赖型细胞LNCaP、RV1、L1A和非激素依赖细胞DU145、PC-3生长的影响；裸鼠皮下接种人前列腺癌细胞RV1、PC-3，构建实体瘤模型，成瘤后分组并灌胃给药，观察测量肿瘤体积及质量变化，计算肿瘤增长百分率和抑瘤率，比较α-Ano对激素依赖型和非激素依赖型人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。结果 α-Ano作用后，LNCaP、RV1和L1A细胞生存率均低于DU145、PC-3细胞；α-Ano高低剂量组均对裸鼠皮下RV1细胞移植瘤具有较强的抑制生长作用，而对PC-3细胞移植瘤作用较弱，仅高剂量组有一定抑制作用。 结论 α-Ano对激素依赖型前列腺癌的抑制作用强于非激素依赖型前列腺癌。     

内皮抑素对胶质瘤病理特征影响的实验研究

目的探讨内皮抑素对胶质瘤病理特征的影响及分子药理学机制。方法利用经抗性筛选可表达内皮抑素的C6细胞裸鼠皮下注射制作胶质瘤模型,光镜和电镜观察其病理特征,ELISA法检测瘤组织中VEGF含量。结果转染有内皮抑素cDNA片段的C6胶质瘤组织中VEGF含量明显低于仅转染有空载体的C6胶质瘤组(P<0.01)。前者肿瘤边界清楚,瘤体未见明显的出血和囊性变,瘤体和瘤周均无明显的水肿;瘤组织内血管稀少,未见类微血管样结构;瘤体内可见大片不规则坏死,但坏死灶周和瘤周均无明显的血管反应,瘤周侵袭少见,可见凋亡瘤细胞;血管内皮细胞胞质内未见内VVO样结构,基板不连续,基底膜疏松。而仅转染有空载体的C6胶质瘤瘤周血管反应明显,瘤体和瘤周水肿严重,瘤细胞可侵袭瘤周组织,瘤内组织明显出血坏死,且可见瘤细胞形成类微血管样结构,血管内皮细胞胞质内VVO样结构较多,水肿越明显VVO样结构越多见,并与移植瘤组织中VEGF表达相一致,血管基板完整、连续,多数基质疏松,呈多层排列,外层可见少量胶原纤维。所观察的几种肿瘤中的微血管内皮细胞孔窗及血管周胶原纤维与转染的目的基因无明显的关系,且内皮细胞的凋亡均不明显。结论内皮抑素不会直接诱导胶质瘤组织内血管内皮细胞的凋亡,但可通过诱导VEGF的表达的下调而抑制瘤周血管反应和肿瘤新血管的生成。     

大鼠内皮抑素cDNA真核表达载体的构建及C6细胞上的分泌表达

目的构建分泌型大鼠内皮抑素(endostatin,endos)基因真核表达载体,并在C6细胞上获得表达。方法利用RT-PCR法从1日龄大鼠脑组织总RNA中扩增出endos基因,并将获得的基因重组入真核表达载体pBudCE4.1上。抽取经双酶切、PCR及测序鉴定后的重组子质粒,利用脂质体方法转染C6细胞,在Zeoc in抗性下筛选稳定表达endos的C6细胞克隆,W estern-b lot法检测阳性克隆子上清液中endos,免疫细胞化学鉴定endos在阳性克隆子上的定位,MTT法鉴定阳性克隆子分泌的endos的生物学活性,ELISA方法检测阳性克隆子上清液中的血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量。结果从1日龄SD大鼠脑组织总RNA中扩增出endos基因,构建重组质粒endo-pBud,经酶切、PCR和测序鉴定,产物大小及基因序列与预期值相符。经抗性筛选的阳性克隆子可分泌具有生物学活性的endos,同时其VEGF表达下调。结论成功获得endos基因,构建endos重组质粒,并在C6细胞上获得分泌性表达。     

常见的前列腺癌基因和抑癌基因研究进展

前列腺癌发生发展与多种基因的异常表达有关,其癌变的形成和发展与多种癌基因的激活和抑癌基因的失活或缺失密切相关。本文综述了几种与前列腺癌关系密切的癌基因和抑癌基因的作用机制,癌基因主要有bcl-2基因、c-myc基因r、as基因、HER-2/neu、前列腺癌诱导基-因1(PTI-1)和HPG1等6种癌基因;抑癌基因包括PTEN、p16、p53、Rb、KLF6和RASSFIA等6种抑癌基因。这些癌基因和抑癌基因在前列腺癌发展过程中的表达量的变化和肿瘤分级、预后相关。     

大鼠内皮抑素cDNA的克隆与鉴定

目的获取大鼠内皮抑索的cDNA片断，并构建融合蛋白的原核表达载体。方法以大鼠脑组织总RNA为模板，采用RT—PCR法从中扩增内皮抑素基因。并将获得基因重组入pThiohis表达载体，重组子经双酶切、PCR及测序鉴定。结果从大鼠脑组织中成功扩增内皮抑素的cDNA片断，并将其克隆入pThiohis载体，经双酶切、PCR及测序鉴定，产物大小及基因序列与预期值相符。结论成功构建大鼠内皮抑素基因的重组克隆pThiohis-Endo。