肺炎克雷伯菌分离株毒力基因分布与临床特征的相关性研究

目的：分析肺炎克雷伯菌8种毒力基因在肺炎克雷伯菌肺炎患者临床分离菌株中的分布和临床特征的关系。方法：收集2019年8—9月南京医科大学附属无锡人民医院分离的引起肺部感染的50株肺炎克雷伯菌,PCR法检测毒力基因,统计并分析肺炎克雷伯菌毒力基因阳性率及患者的临床分布特征。结果：50株菌株mrkD、ureA基因阳性率为100%,fimH、entB、ybtA基因阳性率分别为86%、96%、64%,未检测出wabG、uge、clbA基因。携带fimH基因肺炎克雷伯菌菌株的感染者较非携带该基因细菌的感染者更易出现咳嗽咳痰、胸闷气短的症状。最常见的组合为fimH+mrkD+ureA+entB+ybtA,同时检出5种毒力基因的肺炎克雷伯菌感染者临床表现明显,但病死率低。结论：随着毒力基因种类的增加,咳嗽咳痰、胸闷气短症状的比例基本呈上升趋势,发热呈下降趋势。     

金黄色葡萄球菌临床分离株功能基因及其二元分型研究

目的 研究一组金黄色葡萄球菌临床分离株毒力基因和耐药基因的存在状况.方法 连续收集浙江省宁波市第一医院2013年7至9月临床分离的金黄色葡萄球菌共40株,采用聚合酶链反应（PCR）的方法分析42种毒力基因和11种耐药基因,再以10类毒力基因和1种耐药基因mecA检测结果作二元分型.结果 40株金黄色葡萄球对青霉素的敏感率为12.5％ （5/40）,对红霉素的敏感率为42.5％（17/40）,对其余15种抗菌药物的敏感率均大于65.0％.除了人主要组织相容性复合体（M HC）类似蛋白编码基因map未检出,其他几类毒力基因：黏附素、细胞毒素、荚膜抗原、超抗原、丝氨酸蛋白酶均有检出,检出率为2.5％～100.0％.耐β-内酰胺类、氨基糖苷类、红霉素类、四环素类、季铵盐消毒剂、抗菌肽的耐药基因均有检出,检出率为2.5％～37.5％.40株菌株经二元分型可分为16种阳性基因检出模式,每株菌最少检出3类毒力基因,最多检出7类毒力基因和1类耐药基因mecA.结论 本组菌株耐药表型和耐药基因型符合率较高,菌株携带多种毒力基因和耐药基因.     

发现大肠埃希菌喹诺酮耐药株gyrA基因新亚型和aac（6′）-Ⅰ b-Cr、mdfA基因

目的 了解大肠埃希菌(E.coli)对常用抗菌药物的耐药性及喹诺酮类DNA旋转酶基因、多药外排基因及氨基糖苷类修饰酶基因（AMEs）的存在情况。 方法 收集2006年1月~2008年10月本院临床标本分离的E.coli 60株,用K-B法检测细菌对16种抗菌药物的敏感性,用PCR及测序技术分析6种喹诺酮类基因(gyrA、qnrA、qnrB、qnrS、qepA、mdfA)和1种AMEs基因aac(6′)-Ⅰ b。 结果 60株菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均为78.4%（47/60）;55株菌存在gyrA基因突变,其中3株菌gyrA与美国NCBI中已登录的gyrA基因序列不同,为新亚型;mdfA基因均阳性;对9株aac(6′)-Ⅰ b基因PCR阳性产物进行测序,证实5株携带aac（6′）-Ⅰ b-Cr双功能酶基因。 结论 gyrA基因突变是E.coli对喹诺酮类药物最主要的耐药机制,耐喹诺酮类药物的E.coli株中发现aac（6′）-Ⅰ b-Cr基因和gyrA新亚型,E.coli检出mdfA基因为中国大陆地区首次报道。     

表皮葡萄球菌携带甲氧西林等五类抗生素耐药基因分析

本研究就53株MRSE菌进行了β内酰胺类耐药基因（TEM、OXA、SHV、mecA）、大环内酯类耐药基因（ermA／B／C、ermF、mefA）、四环素类耐药基因（tetM）、氨基糖苷类耐药基因（aac6′／aph2″）和糖肽类耐药基因（vanA、vanB、vanC1、vanC2／C3）检测，其目的是了解本院MRSE临床分离株耐药基因携带状况，以指导临床合理用药。     

鲍曼不动杆菌TEM基因及氨基糖苷类修饰酶基因初步研究

目的了解鲍曼不动杆菌TEM基因及氨基糖苷类修饰酶基因存在情况，为耐药性监测提供初步依据。方法在2002年8月—2004年2月间自临床分离20株鲍曼不动杆菌，采用微量稀释法测定其对13种抗菌药物的敏感性，采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析TEM基因及氨基糖苷类修饰酶基因类型。结果20株鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美洛培南全部敏感，哌拉西林／他唑巴坦、头孢吡肟及头孢他啶的耐药率分别为45．0％、65．0％和70．0％，氨基糖苷类抗生素的耐药率为75．0％，对其他抗菌药物的耐药率均在65．O％以上。TEM、aac(3)-Ⅰ、aac(3)=Ⅱ、aac(6”)-Ⅰ和ant(3”)-Ⅰ基因的阳性率分别为45．0％、55．0％、15．0％、35．0％和60．0％，而SHV、AmpC DHA、AmpC MIR基因均阴性。结论本院临床分离的鲍曼不动杆菌多重耐药严重，TEM型基因及氨基糖苷类修饰酶基因携带率较高。由于引物设计不完全，常见的OXA、VEB、PER基因未进入试验，因此第三、四代头孢菌素耐药原因需进一步研究。     

从绿脓假单胞菌中检出GES-5型超广谱β内酰胺酶

美罗培南年度监测项目（MYSTIC）和美国一抗生素耐药监测项目（SENTRY）细菌耐药监测组、中国医院病原菌耐药监测组和中国细菌耐药监测研究组报告显示，绿脓假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）已成为医院感染的重要病原菌，其对β内酰胺类抗生素的耐药性正呈现出逐年上升的趋势，且已呈多重耐药现象。革兰阴性细菌产生的各种质粒介导的超广谱β内酰胺酶（ESBLs）是导致其对新型广谱β-内酰胺类抗生素产生耐药性的重要机制。     

肺炎克雷伯菌中检出16S rRNA甲基化酶基因mtB及β内酰胺酶基因blaLAP-2

肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae,Kpn)是医院感染病原菌中最常见菌种之一,对包括广谱β内酰胺类、氮基糖苷类和氟喹诺酮类在内的常用抗菌药物呈现多重耐药性日趋严重,甚至出现了对碳青霉烯类抗生素耐药的临床分离株[1-2],导致抗菌感染治疗相当困难.     

铜绿假单胞菌亚胺培南及消毒剂耐药相关基因研究

目的了解临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中金属β内酰胺酶基因(blaIMP和blaVIM)、外膜孔蛋白D2(OprD2)基因(oprD)、消毒剂-磺胺耐药相关基因(qacE△1-sulⅠ)存在状况.方法采用ATB′PSE 5药敏试验条板微量肉汤法测定28株铜绿假单胞菌对14种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)技术及序列分析的方法检测耐药基因.结果该28株铜绿假单胞菌对亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、妥布霉素和复方新诺明均完全耐药,对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率最高为64.3%,其余的耐药率在57.1%～92.9%之间.28株Pa中blaIMP和blaVIM基因均阴性,25株(89.3%)oprD基因缺失,24株(85.7%)qacE△1-sulI基因阳性.结论浙江湖州解放军第98医院临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌多重耐药严重,oprD基因缺失是其对亚胺培南耐药的重要原因,qacE△1-sulI基因携带率很高.