c-Met基因过表达脐带间充质干细胞株的构建*

目的 建立c-Met慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞（hUMSC）,为治疗肝衰竭作为种子细胞。方法 培养hUMSC,经流式细胞技术检测细胞表面表型,转染c-Met慢病毒载体,在荧光显微镜下观察转染效率,确定最佳多重感染复数（MOI）。采用嘌呤霉素抗性筛选稳定表达c-Met的hUMSC细胞系,采用Western-blot法检测细胞c-met蛋白表达量。结果 P5代细胞高表达CD44、CD90和CD105抗原,不表达CD31、CD45和CD34相关造血细胞抗原,符合人脐带间充质干细胞的特性;构建成功的c-Met慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞最佳MOI=80,经嘌呤霉素筛药,在荧光显微镜下观察发现荧光阳性率为100%,且经Western-blot法检测证实该细胞过表达c-Met蛋白。结论 成功构建过表达c-Met基因的脐带间充质干细胞,为进一步实验打下了基础。     

外周血单个核细胞分离方法探讨

目的 探讨外周血单个核细胞(PBMC)的不同分离方法对分离效果、贴壁能力以及淋巴细胞的增殖活性的影响。方法 取肝素抗凝血，分别用羟乙基淀粉(hydrixyethylstarch，HES)自然沉降法、HES离心沉淀法、Ficoll密度梯度离心法三种方法分离单个核细胞，直接进行贴壁计数及多种细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer，CIK)培养。结果 HES自然沉降法、HES离心沉淀法、Ficou密度梯度离心法分离的PBMC回收率分别为86．4％、86．0％、85．1％。结论 羟乙基淀粉离心沉淀法可有效地分离PBMC。     

24例肺癌支气管动脉灌注化疗疗效分析

２４例肺癌支气管动脉灌注化疗疗效分析章莉莉，蒋萍（附属二院肿瘤内科２４１０００）支气管动脉灌注（ＢＡＩ）化疗治疗肺癌在国内已逐步推广。我院自１９９２年６月肿瘤科成立以来，对２４例资料齐全并经病理证实的肺癌病人进行ＢＡＩ化疗，现分析如下。１资料与方法１...     

乙型病毒性肝炎患者血清TNFα和CRP在心肌损伤中的相关研究

目的　探讨cTnI、TNFα和CRP在乙型病毒性肝炎心肌损伤中的应用价值及相关研究。方法　序贯搜集整理 4 2 0例乙肝住院和门诊患者的ALT和TBIL资料检测 339例cTnI,分为cTnI阳性组和阴性组 ,按随机选出标本检测TNFα和CRP。结果　cTnI总阳性率为 16 2 % (5 5 / 339)。急性、慢性轻度、慢性中度、慢性重度及肝炎肝硬化患者cTnI阳性分别为 18 5 % (5 / 2 2 )、 11 5 % (17/ 135 )、 19 5 % (17/ 70 )、 2 4 5 % (12 / 3)和 16 7%(4 / 2 0 ) ,均大于正常对照组。除慢性重度和慢性轻度差异有显著性意义外 (P =0 0 2 1) ,余各型肝炎差异均无显著性意义。其中 ,cTnI阳性组和cTnI阴性组患者 ,ALT、TBIL、TNFα和CRP与正常对照组相比差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,cTnI阳性组与阴性组相比差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论　乙型病毒性肝炎的心肌损伤程度与患者临床类型有关 ,与TNFα、CRP和TBIL有关 ,提示循环免疫炎症因子在乙型病毒性肝炎心肌损伤中起重要作用     

肾综合征出血热血清TNF-α、E-选择素、L-选择素、ICAM-1、TGF-β1的变化及其意义

目的:阐明TNF-α、可溶性E-选择素、L-选择素、ICAM-1、TGF-β1在肾综合征出血热(HFRS)发病机制中的作用。方法:34例HFRS患者(轻症组19例,重症组15例)按病期采血,分别用放射免疫法和ELISA检测TNFα、E-选择素、L-选择素、I-CAM-1和TGF-β1,并同期作肾功能和血常规检查。结果:从发热期至多尿期,血清TNF-α、E-选择素、L-选择素和ICAM-1水平均显著增高,而TGF-β1显著降低,TNF-α与BUN呈一致性变化趋势,而与血小板的变化趋势相反。结论:TNF-α、E-选择素、L-选择素、ICAM-1等细胞因子在肾综合征出血热发病机制中起重要作用,而TGF-β1水平下降可能是造成失控性全身炎症反应和多器官功能障碍综合征的重要因素之一;合理的对症治疗和适量使用免疫调节剂可望改善本病的预后。     

2001～2005年间医院内感染念珠菌败血症45例临床研究

目的:探讨念珠菌败血症的临床特点、菌株构成、危险因素及治疗转归。方法:收集2001～2005年间血培养念珠菌阳性的临床病例资料进行回顾性分析。结果:血培养念珠菌阳性共45例,以白色念珠菌为主,其次为热带念珠菌,病原学长期趋势显示白色念珠菌呈下降趋势,而非白色念珠菌逐年上升;药物敏感试验表明耐氟康唑白色念珠菌占58.3%。所有病例均有严重基础疾患,长期使用广谱抗生素(93.3%)、血管内置管(37.3%)为主要易感因素;老年、嗜中性粒细胞减少、低白蛋白血症、肾功能衰竭、感染性休克、多重感染是预后不良的信号。氟康唑为主要治疗药物,总病死率55.6%。结论:氟康唑不能作为所有念珠菌感染的首选药物,应重视病原学及药物敏感试验,合理选用抗真菌药物,采用综合性治疗措施,早期、足量、足疗程进行抗真菌治疗。     

心脏肌钙蛋白I在乙型肝炎心肌损伤中的应用及相关研究

目的　探讨cTnI(心脏肌钙蛋白I)在乙肝心肌损伤中的应用及心肌损伤的机理。方法　序贯收集 4 2 0例乙肝住院和门诊患者的临床资料并检测cTnI。结果　急性、慢性轻度、慢性中度、慢性重度及肝炎后肝硬化cTnI阳性率分别为 18 5 % (5 /2 2 )、11 5 % (17/135 )、19 5 % (17/70 )、2 4 5 % (12 /49)和 16 7% (4/2 0 ) ,总阳性率为 15 9% (45 /2 84 )。慢性轻度与慢性重度进行卡方检验(P =0 0 2 1)有显著差异外 ,余无显著差异。各型肝炎cTnI值与正常对照组秩和检验P <0 0 0 0 1;各型之间比较除慢性重度与慢性轻度、肝炎肝硬化有显著差异 (P =0 0 0 1和P =0 0 37)外 ,余无显著差异。其中 ,15 9例病人心电图异常率 (2 8 9% )与cTnI阳性率 (2 0 1% )卡方检验无显著差异 (P >0 0 5 ) ,且仅有 6例有心慌、心悸表现 3 8% (6 /15 9)。动态观察 36例患者cTnI一个半月表明 ,81%(17/2 1)阳性患者转阴 ,19%阳性患者持续阳性。结论　 (1)cTnI阳性与心电图异常表现并不完全一致 ,cTnI可以作为判断乙肝心肌损伤的敏感和特异性指标。 (2 )乙肝的心肌损伤多表现为一过性损伤且多为亚临床表现 ,与临床肝功能指标相关 ,与病毒复制指标无关 ,提示免疫损伤为乙肝心肌损伤的主要机制。     

肾综合征出血热患者血清MCP-1、IFN-γ、IL-10、E-选择素和ICAM-1的变化

目的 研究单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、γ干扰素(IFN-γ)、E-选择素、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和白细胞介素10(IL-10)在肾综合征出血热(HFRS)发病机制中的作用.方法 29例HFRS患者按病情分为轻症组15例和重症组14例,另取20例健康者作对照.每例均按病期采血,用ELISA方法检测血清MCP-1、IFN-γ、E-选择素和ICAM-1含量,用放射免疫法(RIA)检测IL-10,并同时作肝、肾功能和血常规检查.结果 从发热期至多尿期,血清MCP-1、IFN-γ、E-选择素、ICAM-1均显著高于对照组水平,至恢复期则逐渐趋向正常,其变化曲线与ALT、BUN的变化趋势相似,而与血小板计数(Plt)的变化趋势相反;血清IL-10在病程前四期也见增高,但其增幅远不及IFN-γ;轻、重两组急性期IFN-γ/IL-10比值均显著升高,两组的峰值分别为0.45±0.75和0.23±0.25,均明显高于对照组(0.12±0.16)(P＜0.01).结论 HFRS急性期血清MCP-1、IFN-γ、E-选择素、ICAM-1以及IFN-γ/IL-10比值均显著升高,且与肝、肾损害呈相关性,提示趋化因子与黏附分子之过度表达,加上1型与2型辅助性T细胞(TH1/TH2)之失平衡,在HFRS发病机制中起着重要的作用;合理的对症治疗和适量使用免疫调节剂可望改善本病的预后.     

肾综合征出血热多尿期肾图的变化及意义

目的 :研究肾综合征出血热 (HFRS)多尿期肾图的变化及其意义。方法 :静脉注射 1 31 I-邻碘马尿酸钠 (1 31 I- OIH) 3.7×10 9Bq(10 μCi) ,用闪烁照相法描记 15 min,通过电子计算机自动处理 ,得出肾图的各项参数。结果 :2 0例受检者均已进入多尿期 ,2 4h尿量在 2 0 0 0 ml以上 ,血尿素氮 (BUN)已正常或接近正常 ,但肾图却明显异常 ,表现为半排时间 (TC1 /2 )延长 (>8min) ,15min残留率 (C1 5 /b)超过 5 0 % ,肾脏指数大多低于 45 % ;同期作尿β2 -微球蛋白 (β2 - m )测定 ,也明显高于正常 ;8例作发射型电子计算机扫描 (ECT)检查 ,肾小球滤过率 (GFR)和有效肾血浆流量 (ERPF)分别为 (4 0 .8± 2 1.2 ) ml/min和 (35 0 .8± 10 2 .1) ml/min,均明显低于正常 (P<0 .0 1)。结论 :HFRS患者多尿期肾图大多呈排出不良和功能受损的图形 ,表明该期肾功能以及肾血流量尚未恢复正常 ,对症治疗仍需继续。     

不明原因发热272例分析

目的 分析不明原因发热(FUO)患者的病因构成及实验室检查,为诊断发热提供科学的临床思维方法.方法 回顾性分析272例FUO患者的临床资料,总结病因,并对各病因组实验室指标进行统计分析.结果 272例FUO患者中257例明确诊断,确诊率为94.5％,包括:感染性疾病177例(65.1％),风湿免疫性疾病47例(17.3％),肿瘤性疾病22例(8.1％),药物热4例,亚急性甲状腺炎4例,噬血细胞综合征3例.感染性疾病与非感染性疾病相比,后者具有显著升高的血清铁蛋白及AST水平,且以血红蛋白下降更明显.结论 FUO患者经全面的病史询问、体格检查及针对性的实验室检测绝大多数可明确诊断.