虚拟仿真实验室在民办高校病理学实验教学中的应用

随着现代科学技术的不断发展,基础医学高等教育的进程在不断加快,虚拟仿真实验室的建立为医学基础学科的教学在传统模式的基础上提供里有力的补充和提高,尤其是作为基础医学桥梁学科的病理学实验课程.通过虚拟实验室丰富的图片、视频、资料库以及虚拟仿真操作,可以有效的提高学生学习病理学的积极性、主动性和学习效果,提高分析和解决问题的能力,为学习临床学科打下坚实的基础.     

镰形棘豆脂溶性生物碱含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及周期的影响

目的研究藏药镰形棘豆脂溶性生物碱(OFLA)含药血清对人肺腺癌A549细胞活力、凋亡及生长周期的影响。方法将SD大鼠随机分为5组:空白对照组,OFLA低、中、高剂量组(90,135,270 mg·kg~(-1))和阳性药组(环磷酰胺,36 mg·kg~(-1)),连续给药5 d,制备含药血清。采用CCK-8法检测细胞活力;Annexin-VFITC/PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期。结果与空白对照组比较,OFLA各给药组的A549细胞活力在12,24,48 h均明显降低(P0.01),不同浓度的OFLA含药血清均对A549细胞的活力有不同程度的抑制作用,呈现剂量依赖性,并且与作用时间呈正相关趋势。作用24 h后,OFLA各给药组均出现不同程度的细胞凋亡,低、中、高剂量组的细胞凋亡率分别为41.1%、57.6%、60.9%,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P0.01,P0.001)。与空白对照组比较,OFLA含药血清中、高剂量组的G0/G1期细胞比例显著提高(P0.05,P0.01),S期细胞比例显著降低(P0.05)。结论 OFLA可以抑制人肺癌A549细胞的活力,诱导细胞凋亡以及延缓细胞周期进程,将细胞生长周期阻滞在G0/G1期。     

参苓白术散含药血清影响A549/DDP的顺铂耐药的研究

目的:研究参苓白术散含药血清对肺腺癌顺铂细胞株(A549/DDP)顺铂耐药的影响.方法:动物随机分组,制备参苓白术散大中小剂量血清(给药剂量分别为11.34,5.67,2.83g·kg-1·d-1),将A549,A549/DDP细胞体外分为顺铂(DDP)组,空白血清+DDP组,含药血清大剂量+DDP组,含药血清中剂量+DDP组,含药血清小剂量+DDP组,细胞对照组,经过15%各组血清联合DDP不同浓度(10,20,40,80,100,200μmol·L-1)作用48 h,采用MTT法检测参苓白术散不同浓度含药血清对A549/DDP顺铂耐药的作用;结果:与DDP组比较,参苓白术散不同浓度含药血清作用于A549/DDP后IC50和耐药倍数均有显著降低(P<0.05),以中剂量组(等临床剂量组)作用最为显著(P<0.01).结论:参苓白术散能增强A549/DDP对顺铂的敏感性.     

CTGF特异性siRNA慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的:构建CTGF特异性siRNA慢病毒表达载体并观察其介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)对人肝癌细胞CTGF(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响?方法:针对已经筛选确定的人CTGF基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与Plk0.1-GFP-SP6载体连接产生shRNA 慢病毒载体,经PCR筛选阳性克隆进行DNA测序鉴定?用脂质体转染法将质粒共转染293T 细胞,将包装产生的慢病毒颗粒感染HepG2细胞,Real-time PCR?Western-blot检测CTGF mRNA和蛋白的表达?结果:PCR与DNA测序证实合成的含CTGF shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确?经RNA干扰后的靶细胞CTGF mRNA以及蛋白表达水平明显降低?结论:成功构建人CTGF基因RNA干扰慢病毒载体,体外感染HepG2细胞可有效降低CTGF mRNA和蛋白的表达,为以CTGF基因为靶点的肝癌基因治疗研究奠定了基础?     

脑卒中后患者抑郁的心理护理

脑卒中在我国发病率的不断上升,患者情绪障碍尤其是脑卒中后抑郁对原发疾病的负性影响以及心理社会因素在疾病的发生、发展和预后过程中的作用不容忽视.因此,我们急需寻找一种针对抑郁患者的心理护理系统有效的方法.     

镰形棘豆对SMMC-7721细胞线粒体膜电位和凋亡相关蛋白表达的影响

目的?研究藏药镰形棘豆对SMMC-7721人肝癌细胞活性、线粒体膜电位,细胞色素C(Cyt C)及Caspase-3蛋白表达的影响与细胞凋亡的关系。方法?以镰形棘豆总黄酮0.05、0.075、0.1g/L处理肝癌细胞SMMC-7721,24h后观察细胞的生长状况;镰形棘豆总黄酮作用于SMMC-7721细胞后,流式细胞仪检测细胞总体凋亡率和线粒体膜电位,Western blot检测对凋亡相关蛋白Cyt C及Caspase-3表达的影响。结果?结果表明,镰形棘豆总黄酮抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长,呈浓度依赖关系;镰形棘豆作用后可观察到凋亡细胞的比例升高;可导致细胞的线粒体跨膜电位明显降低,与药物浓度呈负相关。中、高剂量组的细胞中Cyt C及Caspase-3蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论?镰形棘豆总黄酮诱导SMMC-7721细胞的凋亡可能是通过线粒体途径,并且与影响Cyt C及Caspase-3的表达有关。为镰形棘豆抗肿瘤的作用机制的实验和临床研究提供依据。      

藏药镰形棘豆醇提物酸碱分离及抗小鼠Lewis肺癌活性筛选

摘要：目的 筛选藏药镰形棘豆醇提物中对Lewis肺癌荷瘤小鼠具有抑瘤作用的活性部位。方法 利用酸碱处理对镰形棘豆醇提物进行分离，并对所得碱性部位（AlF）和酸性部位（AcF）进行定性、定量分析。建立Lewis肺癌C57BL/6小鼠模型，随机分为模型组，CTX组（20 mg·kg-1），AlF高、低剂量（180，90 mg·kg-1）组，AcF高、低剂量（180，90 mg·kg-1）组，连续给药10 d；通过测定小鼠瘤体质量、抑瘤率、胸腺指数、脾指数来比较AlF、AcF的抑瘤作用；HE染色，显微镜下观察各组肿瘤细胞的形态学变化。结果 AcF主要含黄酮类成分，含量为18.9%；AlF主要为生物碱成分，含量为64.1%。AcF高剂量组对雌性小鼠的抑瘤率为36.3%，对雄性小鼠的抑瘤率为32.8%，与模型组比较，差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01）；AlF高剂量组对雌性小鼠的抑瘤率为29.7%，与模型组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较， CTX组小鼠的脾脏、胸腺指数均明显降低，差异有统计学意义（P<0.01，P<0.05）；而AcF、AlF各剂量组与模型组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。肿瘤组织病理形态学观察显示AcF、AlF各给药组肿瘤细胞出现不同程度的坏死。结论 镰形棘豆醇提物AlF、AcF均对Lewis肺癌荷瘤小鼠具有明显的抗肿瘤作用，黄酮类成分的作用比生物碱略强，其抗肿瘤机制还有待进一步研究。