三七片DNA条形码分子鉴定及方法学考察

目的为研究DNA条形码技术在中成药鉴定中的应用,以三七片为研究对象,对方法的适用性、专属性与精密度进行考察。方法收集15批次市售三七片样品,考察三七片DNA提取条件,并对"中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则"中PCR扩增、序列获得、结果判定等方法适用性进行确认;收集三七、人参、西洋参,制作三七片及其掺伪品,考察方法的专属性和重现性。结果三七片取样量100 mg,56℃水浴8 h所获得DNA的质量浓度平均值为60.7 ng/μL,PCR扩增、序列获得和结果判定均可获成功;三七、人参和西洋参的ITS2序列长度均为230bp,三七与人参、三七与西洋参的序列间均存在7个稳定的SNP位点,自制三七片和掺伪三七片均可成功获得ITS2序列,不同比例三七与人参、三七与西洋参的测序峰图在SNP位点处呈现相应峰高比的SNP套峰具备专属性;重复性、中间精密度和重现性考察符合《中国药典》2015年版(通则9101)相关要求。结论 ITS2序列作为DNA条形码能够稳定、准确鉴定三七片的原料药材,具备良好的专属性和精密度,三七片DNA条形码分子鉴定法将为保障三七片临床用药安全提供新的技术手段,并对《中国药典》其他收载单方制剂的鉴定提供参考。     

基于战略坐标分析的我国核心期刊药品不良反应领域知识图谱研究

摘要：目的:归纳我国核心期刊药品不良反应(ADR)文献的研究主题、整体结构和发展态势,以期为ADR监测者和研究者把握本领域的研究现状与发展方向提供科学依据。方法:检索CNKI数据库,搜集我国核心期刊的ADR文献,统计高频关键词并输出共词矩阵,利用聚类分析和多维尺度分析划分和验证研究主题,利用战略坐标分析对各主题的地位和发展趋势进行可视化表达。结果:共获得文献12 527篇,关键词50 576个,高频关键词45个。7个研究主题由聚类分析结果形成,并被分配到战略坐标图的不同象限。结论:"ADR监测及其基础与临床研究"成为核心研究主题,"用药安全与ADR风险管理"和"中药ADR"发展态势良好,地位将得到进一步提升;"抗肿瘤药ADR"是新兴主题,但发展态势不佳;其余主题已经或正在被边缘化。核心主题内容过多且繁杂,其他主题与之地位差距过大,未来或将形成"ADR监测与风险管理"这一新的核心研究主题。     

基于网络药理学分析加味归脾汤治疗阴火失眠伴焦虑的机制

目的:借助网络药理学分析技术,探讨加味归脾汤治疗阴火失眠伴焦虑的作用机制。方法:采用中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP),筛选加味归脾汤的主要化合物成分和药物靶基因;通过GeneCards和人类孟德尔遗传综合数据库(OMIM)建立失眠和焦虑的靶基因集;通过STRING 11.0软件分析交集基因之间的相互作用;采用Cytoscape_3.6.1软件分析和马修斯相关系数(MCC)算法筛选核心基因。基于网络分析结果,将48只SD雌性大鼠随机分配为空白组,模型组,右佐匹克隆片组(0.2 mg·kg-1·d-1),加味归脾汤低、中、高剂量组(0.31,1.25,5 g·kg-1·d-1)。采用氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射方法,建立失眠伴焦虑动物模型,并给予相应药物治疗7 d;然后进行自主活动实验观察大鼠活动的次数、时间和路程;实时荧光定量聚合酶链式反应检测大鼠海马组织中RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt1),丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3),丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达。结果:从TCMSP数据库中共筛选出228个化合物活性成分;经与GeneCards和OMIM综合数据库比对,共获取181个疾病与药物的交集基因;STRING软件和MCC算法共获得MAPK3,MAPK8,Akt1,IL-6等9个关键基因。动物实验表明,与模型组比较,加味归脾汤高、中剂量组的活动次数、时间和路程显著减少(P0.01),海马组织中MAPK3,MAPK8,Akt1,IL-6 mRNA表达显著降低(P0.01),低剂量组差异无统计学意义。结论:加味归脾汤治疗阴火失眠伴焦虑作用机制,可能与对MAPK3,MAPK8,Akt1,IL-6基因的调节有关。     

黄芪甲苷调节PI3K/Akt/FoxO1通路抑制糖尿病大鼠肝糖异生

目的:探讨黄芪甲苷对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝损伤保护潜在机制及肝组织磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子1(FoxO1),磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶(PEPCK)和葡萄糖6-磷酸酶(G6Pase)蛋白表达的影响。方法:6周高糖高脂饮食后,链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射(0.035 g·kg^-1)建立T2DM大鼠模型,随机分为正常组、模型组、黄芪甲苷低、中、高剂量组及二甲双胍组。黄芪甲苷低、中、高剂量组灌胃黄芪甲苷0.02,0.04,0.08 g·kg^-1·d^-1,二甲双胍组灌胃二甲双胍0.2 g·kg^-1·d^-1;给药8周后,于末次灌胃24 h禁食不禁水后处死,测血清肝生化指标,肝脏指数等;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织病理形态学变化;马松(Masson)染色观察纤维化程度;过碘酸希夫(PAS)染色反应观察细胞内糖原等变化;免疫组化及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组肝中PI3K/Akt/FoxO1信号蛋白及PEPCK,G6Pase蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组肝脏指数显著升高(P<0.01),肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)的含量显著升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著降低(P<0.01),大鼠体质量显著减轻(P<0.01),PI3K/Akt/Fox O1信号减弱(P<0.01),PEPCK,G6Pase蛋白表达水平显著增强(P<0.01);与模型组比较,黄芪甲苷中、高剂量组及二甲双胍组肝功能指标ALT,AST,TC,TG的含量明显降低(P<0.05,P<0.01),大鼠体质量明显增加(P<0.05,P<0.01),肝组织Fox O1,PEPCK及G6Pase蛋白水平明显降低(P<0.05,P<0.01),Fox O1的磷酸化水平明显增强(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪甲苷可能通过调节PI3K/Akt/Fox O1信号通路抑制高脂高糖加小剂量STZ诱导T2DM肝糖异生,从而起到延缓T2DM大鼠肝脏损伤作用。     

一例横纹肌溶解症合并血小板减少患者气道出血的护理

总结1例横纹肌溶解症患者血小板减少期间气道出血的护理经验。护理上通过合理镇静镇痛、选择合适的吸痰管材质、掌握吸痰时机、套管内外吸痰、选择合理负压值、加强气道湿化、合适体位和导管固定、调整气囊压力大小来管理血小板减少横纹肌溶解患者的呼吸道损伤,以最大程度减少对呼吸道黏膜的刺激,最终患者气道出血停止。     

带线锚钉联合外排钉与锁定钢板内固定治疗肱骨大结节撕脱骨折的疗效比较

目的比较带线锚钉联合外排钉与锁定钢板内固定治疗肱骨大结节撕脱骨折的临床疗效。方法回顾性分析自2015-01—2017-12诊治的90例肱骨大结节撕脱骨折,45例采用带线锚钉联合外排钉内固定(锚钉组),45例采用锁定钢板内固定(钢板组)。结果 90例均获得随访,随访时间平均18.4(6～28)个月。锚钉组术后出现2例(4.4%)并发症,钢板组术后出现10例(22.2%)并发症。与钢板组比较,锚钉组切口更短,术中出血量更少,手术时间、骨折愈合时间更短,术后并发症发生率更低,末次随访时肩关节前屈上举活动度、体侧外旋活动度更大,疼痛VAS评分更低,ASES评分、Constant-Murley评分明显更高,差异有统计学意义(P 0.05)。结论带线锚钉联合外排钉固定与锁定钢板内固定治疗肱骨大结节撕脱骨折均可获得满意的临床疗效,与锁定钢板内固定相比,带线锚钉联合外排钉固定疗效更佳,具有创伤小、并发症少、术后恢复快、对肩关节功能影响小等优点。     

浙江省大学生拒绝无保护性行为的信心评价及其相关因素分析

目的 分析浙江省大学生拒绝无保护性行为的信心状况及其相关因素。方法 采用分层整群抽样的方法，于2018年10-11月，在浙江省13所高校选取有过性行为的大学生3 718名作为研究对象，评价其拒绝无保护性行为的信心。采用χ²检验法分析大学生拒绝无保护性行为信心的一般人口学特征、性态度、性行为及相关干预情况，采用多因素logistic回归模型分析大学生有信心拒绝无保护性行为的相关因素。结果 共调查3 718名大学生，年龄（20.17±1.38）岁，男生占70.5%（2 620/3 718）。有信心拒绝无保护性行为的男生为74.9%（1 963/2 620），女生为77.9%（896/1 098）。有信心拒绝无保护性行为的多因素logistic回归分析结果显示，男生的相关因素包括不接受临时性行为（与接受的相比，OR=2.247，95% CI：1.828~2.762）、不接受男男性行为（与接受的相比，OR=1.810，95% CI：1.302~2.516）、最近1年发生临时性行为（与未发生的相比，OR=1.345，95% CI：1.051~1.721）、知道学校有HIV自检试剂（与不知道的相比，OR=1.381，95% CI：1.011~1.887）、接受过学校开展HIV感染风险自我评估（与未接受的相比，OR=1.707，95% CI：1.374~2.121）；女生的相关因素包括来自城市（与来自农村的相比，OR=1.816，95% CI：1.225~2.693）、≥ 21岁（与≤ 20岁的相比，OR=1.469，95% CI：1.075~2.007）、接受过学校开展HIV感染风险自我评估（与未接受的相比，OR=1.597，95% CI：1.093~2.333）。结论 男生和女生拒绝无保护性行为的信心均较高。有信心拒绝无保护性行为的保护因素，男生为不接受临时性行为、不接受男男性行为、接受过学校开展HIV感染风险自我评估、知道学校有HIV自检试剂、最近1年发生临时性行为；女生为来自城市、≥ 21岁、接受过学校开展HIV感染风险自我评估。高校应加强大学生性健康教育，减少无保护性行为，推广HIV感染风险自我评估。     

3-4岁二孩家庭的教育指导工作的行动研究

自从国家开放二孩政策以来，越来越多的家庭开始将二孩计划拉上日程。因此，不仅两个孩子成长过程中的物质保障要跟上，二孩的家庭教育指导也需要积极开展—幼儿教师需要借助专业的教育知识与二孩家庭的教育现状分析为各位家长提供有效的教育引导，以期借助详细的二孩家庭教育研究为各个生育了两个孩子的家庭提供强有力的教育支持、促使每一位家长都可以得心应手地应对两个孩子在生活和成长中出现的大事小情，进而保证每一位幼儿都在愉快的成长氛围中不断进步。     

人参皂苷Rh2对神经母细胞瘤SH-SY5Y的增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响

目的:针对神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）早期易转移的特性,研究人参皂苷Rh2（ginsenoside Rh2）对神经母细胞瘤的增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。方法:用不同（5、10、20、40、80 μg/ml）浓度人参皂苷Rh2来干预神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y。Cell counting kit-8(CCK-8)法、细胞划痕试验、Transwell小室模型检测细胞增殖、迁移及侵袭能力；蛋白质印迹法（Western-blot，WB）试验检测不同浓度下神经母细胞瘤细胞内基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase2,MMP2）、Bax、Bcl-2、β-catenin蛋白的表达。结果:人参皂苷Rh2可以时间-浓度依赖性地抑制神经母细胞瘤增殖、迁移及侵袭，降低迁移相关蛋白MMP2的表达，上调了促凋亡蛋白Bax的表达水平同时降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。人参皂苷Rh2处理的神经母细胞瘤内β-catenin水平降低。结论:人参皂苷Rh2可以在体外抑制神经母细胞瘤的增殖，下调MMP2蛋白抑制肿瘤细胞迁移及侵袭，通过wnt通路抑制细胞生长。     

低热量肠内营养在急性期重型创伤性脑损伤患者中的临床疗效

目的探究低热量肠内营养在急性期重型创伤性脑损伤患者中的临床效果,分析在脑损伤患者中的临床疗效。方法选取我院2017年1月至2018年1月收治的创伤性脑损伤患者80例,采用随机数表法将所有患者随机分成实验A组和实验B组,实验A组为低热量肠内营养组,实验B组为传统热量肠内营养组,在手术后24～72h给予不同的肠内营养制剂,在营养支持的7d和14d后观察两组患者的血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、血浆血红蛋白(Hb)和空腹血糖(Glu)及胃肠道主要并发症情况。结果实验A组与实验B组在治疗7d、14d后生化指标差异没有统计学意义,可能是由于两组患者均处于急性期,患者体内急性期通常以分解代谢为主,因此两组患者生化指标没有统计学意义(P0.05)。结论在急性期重型创伤性脑损伤患者中,给予低热量肠内营养可以改善患者的不良症状,降低应激性高血糖,临床效果较为满意。