Fn14⁃PI3K⁃Akt介导TWEAK促人脐血内皮祖细胞血管生成研究

目的：探讨Fn14?PI3K?Akt信号通路介导的肿瘤坏死因子样弱凋亡因子（tumor necrosis factor?like weak inducer of apoptosis,TWEAK）对人脐血来源的内皮祖细胞（human endothelial progenitor cells,hEPCs）增殖、迁移、血管形成能力的影响。方法：体外培养、分离和鉴定hEPCs,以其受体成纤维细胞生长因子14 siRNA（Fn14 siRNA）及PI3K特异性抑制剂LY294002（LY）作干预处理。细胞分为对照组、TWEAK干预组、TWEAK+ Fn14 siRNA阻断组和TWEAK+LY阻断组。分别采用CCK?8法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移能力,Matrigel小管形成试验评价细胞血管生成能力,Western blot法测定细胞裂解液中p?Akt和T?Akt的表达。结果：hEPCs体外培养实验表明,TWEAK可明显促进hEPCs的增殖和迁移,并能提升hEPCs的血管形成能力,但在TEWAK+Fn14 siRNA及TWEAK+LY组中hEPCs的增殖、迁移及血管形成能力显著降低。且TWEAK组p?Akt表达较对照组显著增加,而TWEAK+Fn14siRNA组、TWEAK+LY组p?Akt表达较TWEAK组显著降低。结论：TWEAK具有调控hEPCs促血管新生的作用,其促血管新生的作用可能受到Fn14?PI3K?Akt信号通路的限制。     

芦荟多糖对大鼠骨关节炎治疗作用的体内和体外研究 #br#

目的 通过体外和体内实验探究芦荟多糖（APS）对大鼠骨关节炎（OA）的治疗作用。方法 体外分离SD 乳鼠的关节软骨细胞,培养至2代后,通过CCK-8法筛选实验组APS安全剂量。后续通过检测DNA含量和糖胺聚糖 （GAG）分泌量评估软骨细胞的增殖和基质降解情况,实时荧光定量PCR检测OA相关基因表达情况,酶联免疫吸附 测定（ELISA）法检测炎症因子水平;通过HE染色、番红O和免疫荧光染色等来观察其抗炎和软骨保护效果;并进一 步在SD大鼠骨关节炎模型中探究其作用效果。结果 通过CCK-8法筛选出剂量为5、10、20 g/L的APS作为低、中、 高剂量组。各剂量组的DNA含量均显著高于模型组（P＜0.05）;高剂量组GAG分泌量高于模型组（P＜0.05）。高剂 量组的蛋白聚糖（ACAN）和Ⅱ型胶原（COL2A1）基因表达水平相对模型组显著上调（P＜0.05）,而肿瘤坏死因子 （TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、基质金属蛋白酶（MMP）-3和MMP-13基因表达显著下调（P＜0.05）。低、中、高剂量 组TNF-α和IL-6的分泌量显著低于模型组（P＜0.05）,HE和番红O染色也显示APS实验组的细胞形态较模型组好, MMP-13免疫荧光显示高剂量组的表达量显著低于模型组（P＜0.05）。体内实验软骨组织番红O染色及国际骨关节 炎研究学会（OARSI）软骨损伤评分结果显示APS干预的实验组关节软骨损伤程度明显低于模型组（P＜0.05）。结论 APS对OA具有一定的抗炎和软骨保护作用。     

负载葛根素的聚己内酯/明胶纳米纤维膜诱导成骨和抗菌的研究

目的：用静电纺丝技术将聚己内酯（PCL）、明胶（GEL）、葛根素（PUE）制备成PCL/GEL@PUE纳米纤维膜，验证其生物相容性、机械性能、成骨及抗菌性能。方法：在电纺前溶液中分别加入0%(W/V）、0.1%(W/V）、0.2%(W/V）的PUE，制成PCL/GEL、PCL/GEL@0.1%PUE、PCL/GEL@0.2%PUE 3组纳米纤维膜。利用扫描电子显微镜（SEM）观察纳米纤维膜的结构；傅里叶红外光谱分析仪（FTIR）确认制备成功；力学性能测试纳米纤维膜机械强度。将骨髓间充质干细胞接种于各纳米纤维膜上，通过细胞计数试剂（CCK-8）法、钙黄绿素/碘化丙啶（Calcein-AM/PI）染色检测细胞相容性；茜素红染色检测成骨性能。将耐甲氧西林金黄色葡萄球菌与各组纳米纤维膜共培养，并涂琼脂板，计数菌落，检测抑菌率。结果：SEM结果显示，加入PUE后纤维变细，孔径变小，表面变粗糙；FTIR结果显示PCL/GEL@PUE纳米纤维膜构建成功；力学测试结果表明，加入PUE后，纳米纤维膜机械性能增强。CCK-8及Calcein-AM/PI染色结果显示，各组纳米纤维膜在第7天时能明显促进骨髓间...