转基因番茄可食防龋疫苗免疫大鼠的实验研究?

目的用表达变异链球菌表面蛋白PAcP和霍乱毒素B亚单位融合蛋白的转基因番茄免疫SD大鼠,检测其免疫原性,探索研制安全、有效的可食用防龋疫苗的可能性。方法选择雌性 SD 大鼠18只,建立龋齿模型,随机分成3组(n=6),分别为转基因番茄组(实验组)、变异链球菌灭活全菌免疫组(阳性对照组)、非转基因番茄组(阴性对照组),免疫方式为灌胃免疫,每周免疫1次,连续免疫4周。分别于首次免疫前1 d 和每次免疫1周后采集血液、唾液样品,用酶联免疫吸附实验法检测血清中免疫球蛋白 G(IgG)、唾液中分泌型免疫球蛋白 A(SIgA)抗体水平;鼠龄70 d 时处死动物,并取上下颌骨进行龋齿计分。结果免疫后,实验组和阳性对照组大鼠血清中 IgG、唾液中 SIgA 抗体水平与阴性对照组比较差异有统计学意义(P <0.05);实验组和阴性对照组在 Dx 级外的各级差异有统计学意义(P <0.05)。结论转基因番茄防龋疫苗具有免疫原性,能够诱导实验动物产生有效的免疫应答,降低龋齿的发生。     

转基因番茄中外源目的基因检测方法的筛选

目的用普通PCR和real-time PCR两种方法检测转基因番茄中的外源基因,通过优化条件建立一种灵敏、准确检测转基因番茄中外源基因的方法。方法以防龋用转基因番茄为实验材料,通过SDS和植物基因组DNA提取试剂盒两种方法提取植物总DNA,用普通PCR和real-time PCR检测转基因番茄中的外源目的基因。结果植物基因组DNA提取试剂盒提取样品在琼脂糖凝胶电泳图上出现单一条带,条带清楚无拖尾,而用SDS法检测时常会出现拖尾现象。用普通PCR法重复检测40株转基因番茄平均检出率为88.75%,出现假阴性结果,而用real-timePCR法检测相同样本未出现假阳性或假阴性结果,检出率为100%。结论植物基因组DNA提取试剂盒结合real-time PCR技术是检测转基因番茄中外源目的基因的一种准确、灵敏的方法。     

转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因拷贝数的检测

目的：采用SYBR Green实时荧光定量 PCR方法检测转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因的拷贝数。方法：用本课题组前期构建的重组质粒pEAC10、pEPC10作为标准品,SYBR Green实时荧光定量PCR法对含外源目的基因pacA-ctxB、pacP-ctxB的转基因番茄植株总基因组样本重复检测,取平均值作为目的基因拷贝数。结果：含pacA-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为1.3,含pacP-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为3.2。结论：构建的转基因番茄植株属低拷贝转基因植物,具有较好的稳定性。     

志愿者参与小学口腔健康教育课的效果评价*

目的对小学生进行口腔健康教育,对志愿者的教育效果与口腔专业教师的教育效果进行比较,为大学生志愿者参与小学口腔健康教育课提供依据。方法在珠海市金湾区随机选取3所小学,整群抽取一年级学生为研究对象,分为专业组和志愿者组,分别对他们开展口腔健康教育,并采取问卷调查方式评价健康教育效果。结果实施健康教育后,两组小学生在每天刷牙2次、睡前不吃东西等口腔卫生行为方面,差异无统计学意义(P0.05),仅在牙线使用方面专业组好于志愿者组(P0.05)。对口腔知识知晓情况,志愿者组与专业组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论大学生志愿者对小学生开展口腔健康教育可以提高小学生的口腔健康水平,并达到与口腔专业人员宣教相同的效果,该种方式可以有效地缓解因专业人员不足导致的学校口腔健康宣教无法广泛深入开展的问题,适合在本地区推广。     

学龄儿童不同口腔健康教育方式的效果评价

目的了解不同口腔健康教育措施的效果,探索学校口腔健康教育的最佳方法。方法随机选取一所小学3年级的162名学生,按班级随机分为授课组和参与组。授课组85人,对学生开展健康教育课。参与组77人,组织学生参与口腔健康知识小游戏、互动式问答、有效刷牙训练、菌斑染色自我评价。两组均在健康教育前后进行口腔卫生行为问卷调查、菌斑染色检查。结果在口腔卫生行为方面,授课组和参与组对刷牙的频率、时间、含氟牙膏的使用等回答正确率都有明显的提高。授课组健康教育前、后菌斑指数分别为2．809±1．147和2．451±1．276,差异无统计学意义（t=0．497,P=0．621）。参与组健康教育前、后菌斑指数分别为2．982±1．188和1．180±0．434,差异有统计学意义（t=2．417,P=0．017）。两组菌斑指数差异在健康教育前无统计学意义（P〉0．05）,健康教育后有统计学意义（t=2．522,P〈0．05）。结论学校口腔健康教育措施能够有效改善学龄儿童口腔卫生健康行为,儿童参与型的健康教育方式更有助于刷牙效果的改善。     

针对口腔种植修复牙列缺损的美学观察及效果探究

目的 研究口腔种植修复牙列缺损的美学观察及效果.方法 选取2012年1月—2015年1月银川市口腔医院临床收治牙列缺损患者中随机抽取的78例.将上述78例牙列缺损患者随机分为传统组39例和新型组39例.传统组采取传统义齿修复的方法进行治疗,新型组采用口腔种植修复进行治疗.比较①牙列缺损修复效果;②修复后牙槽骨近中、远中骨吸收量;③修复稳固性良好性、美观度的差异.结果 ①新型组较之传统组牙列缺损修复效果更高,新型组为95.24%,传统组为75.61%(P<0.05);②新型组较之传统组修复后牙槽骨近中、远中骨吸收量更小(P<0.05),其中,新型组分别为(0.50±0.13)、(0.55±0.11)mm,传统组分别为(0.57±0.22)、(0.59±0.21)mm;③新型组较之传统组修复稳固性、咀嚼功能良好性、美观度评分(8.51±1.41)分、(8.51±1.61)分、(9.62±0.21)分更高(P<0.05).结论 口腔种植修复牙列缺损的美学效果确切,可减少骨吸收,稳固性良好,还可改善患者咀嚼功能,美观度好,值得推广.     

防龋用转基因番茄生态安全性的评价研究

目的:观察本课题组培育的防龋用转基因番茄中外源目的基因parA-ctxB、pacP-ctxB是否通过花粉和根系分泌物造成基因漂移,初步探讨该转基因番茄防龋疫苗的生态安全性.方法:田间种植转基因番茄,距转基因植株的边缘0.5、1、3、10m处种植非转基因对照番茄作为基因漂移的受体,开花期自由授粉,结果期在距离转基因番茄植...     

牙周炎基因疫苗pVAX1⁃HA2⁃FimA、pVAX1⁃HA2⁃FimA/IL⁃15对大鼠实验性牙周炎保护作用研究

目的：观察牙周炎基因疫苗pVAX1?HA2?FimA、pVAX1?HA2?FimA/IL?15对SD大鼠实验性牙周炎的保护作用。方法：54只雄性SD大鼠随机分为9组,对照组：生理盐水组（A组）、空载质粒pVAX1组（B组）、牙周病组（C组）;实验组：50 μg、100 μg、150 μg pVAX1?HA2?FimA 组（D、E、F组）和50 μg、100 μg、150 μg pVAX1?HA2?FimA/IL?15组（G、H、I组）。 鼻滴免疫SD大鼠后建立实验性牙周炎模型,采用RT?qPCR法检测牙龈中炎症因子肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor?α,TNF?α）、基质金属蛋白酶8（matrix metalloproteinase?8,MMP?8）mRNA相对表达量;立体显微镜观察并测量牙槽骨吸收量。结果：①各实验组牙龈组织中TNF?α、MMP?8 mRNA低于牙周病组,且差异有统计学意义（P＜0.05）;②相同剂量的pVAX1?HA2?FimA/IL?15组较pVAX1?HA2?FimA组大鼠牙槽骨吸收量少,且差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：牙周炎基因疫苗pVAX1?HA2?FimA和 pVAX1?HA2?FimA/IL?15对SD大鼠实验性牙周炎具有保护作用。     

转基因番茄防龋疫苗的致突变性和生殖毒性研究

目的 研究表达变异链球菌表面蛋白PAcA、PAcP和霍乱毒素B亚单位(CTB)的转基因番茄防龋疫苗的致突变作用和生殖毒性作用.方法 将42只5周龄清洁级昆明小鼠随机分为7组,分别为高(5g/kg)、低(2 g/kg)剂量阴性对照(正常番茄汁)组和PAcA/CTB、PAcP/CTB蛋白-番茄汁染毒组以及阳性对照(100m...