EP3受体各亚型对肝癌Huh-7细胞生长和侵袭的作用

目的:探讨在肝细胞肝癌Huh-7细胞中前列腺素E2 EP3各受体亚型对肿瘤细胞生长与侵袭的作用?方法:对常规培养的人肝细胞肝癌Huh-7细胞,瞬时转染EP3受体的4个亚型EP3-4R?EP3-5R?EP3-6R?EP3-7R,应用RT-PCR实验检测转染细胞EP3受体各亚型的mRNA表达水平;应用Western blot实验检测相关蛋白水平?对转染后的Huh-7细胞,分别给予不同浓度的EP3受体激动剂sulprostone作用24 h,用WST-8细胞增殖测定试剂检测细胞的增殖情况;应用划痕实验检测细胞的侵袭性;应用Western blot实验检测细胞内ERK蛋白磷酸化水平的变化?结果:RT-PCR及Western blot实验结果显示Huh-7细胞EP3受体表达水平明显增高?WST-8实验显示,经10 μmol/L sulprostone处理24 h后,过表达EP3-4R?EP3-5R和EP3-7R亚型的细胞增殖率分别达到126.7%?124.0%?123.8%?划痕实验结果显示,过表达细胞的侵袭性分别增加到135.8%?123.5%?128.7%?Western blot显示,EP3-4R?EP3-5R和EP3-7R转染细胞内ERK磷酸化水平分别上调了54.8%?33.4%?44.3%?而过表达EP3-6受体亚型细胞的增殖率?侵袭率和胞内ERK磷酸化水平改变不明显?结论:Huh-7肝癌细胞中,EP3-4R?EP3-5R及EP3-7R这3种受体亚型对细胞的生长及侵袭有显著促进作用,而EP3-6R亚型则无明显的促进作用?EP3受体促进肝癌细胞生长和侵袭的作用与ERK激活的现象一致?     

一个新的家兔高脂血症相关基因的筛选、克隆和序列分析

目的 寻找新的高脂血症相关基因，探讨其分子机理。方法用高脂饲料复制家兔高胆固醇血症模型，采用抑制性消减杂交技术克隆高脂血症相关基因，快速扩增cDNA末端技术扩增全长，用基因芯片和荧光半定量聚合酶链反应技术检测其表达，并用逆转录一聚合酶链反应法观察该基因的组织分布。结果获得一个新的家兔高脂血症相关基因，GenBank登录号为AY24719，长1386bp，编码321个氨基酸，与人类G蛋白α亚基同源性达92％。该基因在家兔心、肝、骨骼肌等组织中广泛表达，其中以胰腺的表达最强。结论对AY248719基因的研究有助于进一步揭示高脂血症的分子机理。     

家兔新基因Gnas的鉴定及其在高脂血症中的功能

目的探讨家兔新基因Gnas在高脂血症中的功能。方法用高脂饲料复制家兔高胆固醇血症模型,分别用胆固醇、25羟胆固醇、低密度脂蛋白刺激HepG2细胞,采用荧光半定量逆转录聚合酶链反应技术检测GenBank中登录号为AY248719的家兔新基因表达情况。结果高胆固醇兔动物模型复制成功,该组血浆和肝脏的总胆固醇及肝脏甘油三酯水平增加均超过10倍,血浆甘油三酯也显著增高。高脂组Gnas基因表达水平明显高于对照组。胆固醇、25羟胆固醇刺激HepG2细胞后Gnas表达无明显改变,400 mg/L低密度脂蛋白刺激HepG2细胞后Gnas表达增强2.15倍。结论对家兔新基因Gnas的研究有助于进一步揭示高脂血症的分子机理。     

米索前列醇用于足月妊娠引产给药途径的临床探讨

目的探讨米索前列醇(简称米索)足月妊娠引产的最佳给药途径.方法对108例足月妊娠、单胎头位、无阴道分娩禁忌症者,随机分为两组:米索口服组55例,米索阴道组53例,分别用米索25 mg口服与阴道置药,3～4h无效后重复给药,48h为一疗程,总量不超200ug.比较两组不同途径给药的引产成功率,总产程、分娩方式、急产发生率、剖宫产率、产后两小时出血量、新生儿窒息发生率.结果,米索口服引产成功率为94.55%,高于米索阴道组79.25%(P＜0.05);阴道组总产程显著较口服组短(P＜0.01),阴道组急产发生率21.42%,高于口服组1.96%(P＜0.01),阴道组剖宫率22.64%,显著高于口服组7.27%(P＞0.05).两组产后出血量,新生儿窒息发生率均无明显差异(P＜0.05).结论小剂量米索(25ug)口服用于足月妊娠引产是一种简便、易行、安全有效的给药最佳途径.     

米索前列醇用于足月妊娠引产给药途径的临床探讨

目的　探讨米索前列醇 (简称米索 )足月妊娠引产的最佳给药途径。方法　对 10 8例足月妊娠、单胎头位、无阴道分娩禁忌症者 ,随机分为两组 :米索口服组 5 5例 ,米索阴道组 5 3例 ,分别用米索 2 5mg口服与阴道置药 ,3～ 4h无效后重复给药 ,4 8h为一疗程 ,总量不超 2 0 0ug。比较两组不同途径给药的引产成功率 ,总产程、分娩方式、急产发生率、剖宫产率、产后两小时出血量、新生儿窒息发生率。结果 ,米索口服引产成功率为 94 5 5 %,高于米索阴道组 79 2 5 %(P <0 .0 5 ) ;阴道组总产程显著较口服组短 (P <0 .0 1) ,阴道组急产发生率 2 1 4 2 %,高于口服组 1 96 %(P <0 .0 1) ,阴道组剖宫率 2 2 6 4 %,显著高于口服组 7 2 7%(P >0 .0 5 )。两组产后出血量 ,新生儿窒息发生率均无明显差异 (P <0 .0 5 )。结论　小剂量米索 (2 5ug)口服用于足月妊娠引产是一种简便、易行、安全有效的给药最佳途径。     

COX-2选择性抑制剂valdecoxib对LPS刺激牙龈成纤维细胞生成PGE2的影响

目的:观察valdecoxib对细菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)生成前列腺素(prostaglandin E2,PGE2)水平的变化?方法:采用ELISA法定量检测LPS及valdecoxib处理后对体外培养的HGFs生成PGE2水平的改变?结果:1~100 ng/ml LPS处理可明显促进HGFs产生PGE2,其作用效果呈浓度依赖和时间依赖关系;6.25~100 μmol/L valdecoxib 能够明显抑制LPS促HGFs产生PGE2的作用,且其抑制作用呈剂量依赖性关系?结论:valdecoxib能明显抑制LPS促HGFs产生PGE2的作用?     

Huh7细胞中边缘群细胞分选及其增殖分裂能力的研究

目的:探讨Huh7细胞中边缘群细胞的分选及边缘群细胞在增殖及分裂能力方面与非边缘群细胞的差异,为肝癌的治疗探索新的思路。方法:采用流式细胞仪分选Huh7细胞中的边缘群细胞和非边缘群细胞,用荧光显微镜观察其胞内Hoechst33342荧光染色强度差异;以半定量RT-PCR测定ABCG2 mRNA表达水平的差异;应用免疫荧光染色检测ABCG2蛋白表达的差异并观察其增殖和不对称分裂能力的差异。结果:非维拉帕米处理组边缘群细胞比例约为2.22%,经维拉帕米阻断后边缘群细胞比例减少至0.74%;边缘群细胞中Hoechst33342的荧光强度明显较非边缘群细胞弱,在边缘群细胞中ABCG2 mRNA表达水平是非边缘群细胞的4.32倍(P<0.01),增殖能力是非边缘群细胞的2.7倍(P<0.01),且边缘群细胞能产生ABCG2(+)和ABCG2(-)子代细胞,而非边缘群细胞只能产生ABCG2(-)子代细胞。结论:Huh7细胞中存在少量边缘群细胞(2.22%),其增殖能力较非边缘群细胞强且具有不对称分裂能力(自我更新和定向分化),具有肿瘤干细胞的特性;因此边缘群细胞分选可以作为肿瘤干细胞分离的一种方法,并且在肿瘤的耐药和进展...     

血清透明质酸(HA)测定在慢性肝病中的应用

为探讨血清透明质酸（ＨＡ）在慢性肝病中的应用,笔者用放射免疫法测定了慢性迁延性肝炎（慢迁肝ＣＰＮ）、慢性活动性肝炎（慢活肝ＣＡＮ）和肝硬化（ＬＣ）共２１１例慢性肝病患者血清中的透明质酸浓度,并与正常对照组作了比较,现将测定结果报告如下：１材料和方法１．１检测对象正常对照组来源于体检的正常健康人群。测定组来源于本院肝病科的住院病人。病种和病例数见表１。１．２标本静脉采血,分离血清后置－２０℃冷冻保存。１．３仪器用ＦＪ－２００８ＰＳ,γ－计数器。１．４试剂由上海海研所提供的放射免疫试剂盒,严格按说明…     

病理学双语教学初探

摘要：双语教学是高校一项重要的教学改革，蕴涵着全新的教学理念。学生只有娴熟地掌握外语，才能方便地吸收先进的医学知识。从双语教学面临的困难，病理学实施双语教学的优势等方面入手，对病理学双语教学进行初步探讨。     

当前病理学理论教学的思考

病理学是现代医学基础理论学科之一,属于医学的桥梁学科.优化病理学理论课教学,提高教学质量,应该从结合临床、科研、与其他学科贯穿等多个方面入手,进一步提高师资水平,改革教学内容和方式方法,完善考试手段,以便于更好地培养出大批合格的创新型医学人才.