儿童支气管哮喘患者外周血Th17百分数及FOXP3水平的变化及意义

目的探讨外周血Th17细胞百分数和叉头状转录因子P3(FOXP3)水平在儿童支气管哮喘患者中的变化及意义。方法选取支气管哮喘患儿(哮喘组)和健康儿童(对照组)各30例,采用流式细胞术检测外周血Th17细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的百分数、实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3mRNA的表达,ELISA法检测血浆中IL-17和IL-10的表达水平。结果哮喘组外周血Th17细胞百分数及血浆IL-17水平均高于对照组(P<0.05);哮喘组外周血FOXP3表达及血浆IL-10水平均低于对照组(P<0.05)。结论 Th17/FOXP3的失衡可能在儿童支气管哮喘的发病机制中起重要作用。     

2018－2020年江南大学附属医院血流感染病原菌分布及耐药率分析

目的:探讨2018－2020年江南大学附属医院细菌室血培养检出的阳性菌株的分布及其相关药敏的数据,为医院科室挑选抗微生物用药提供理论数据。方法:收集2018－2020年江南大学附属医院收治的住院患者血培养阳性菌株,采用仪器法或手工法进行药敏试验,从而得出2018－2020年血培养分离出临床病原菌的分布情况及耐药性。结果:3年间检验科微生物室共分离出血培养病原菌1816株,其中革兰阴性杆菌1058株,占58.26%,革兰阳性球菌682株,占37.56%,真菌76株,占4.18%。其中前几位主要为肺炎克雷伯菌(461株,25.38%)、凝固酶阴性葡球菌(301株,16.58%)、大肠埃希菌(335株,18.44%)、金黄色葡萄球菌(205株,11.29%)和肠球菌属(118株,6.48%)。药物敏感试验发现:革兰阴性杆菌对哌拉西林、头孢唑啉以及氨苄西林的耐药率高于其他抗菌药物;G-细菌对阿米卡星以及多黏菌素B、碳青酶烯类敏感度较高。另外,革兰阳性球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的耐药率分别为40.63%和65.32%。革兰阳性球菌对大部分青霉素相关药物、环丙沙星、四环素等抗菌药物的耐药性逐渐上升,对万古霉素、利奈唑胺均敏感。结论:2018－2020年江南大学附属医院住院患者血培养阳性细菌大部分为G-细菌,其中肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌这三种细菌的耐药率逐渐上升。因此,临床细菌室和必须定期监测阳性细菌的耐药率,从而为临床合理用药提供理论依据。     

FOXP3在儿童I型糖尿病患者中的表达及临床意义

目的:通过研究儿童Ⅰ型糖尿病患者中转录因子FOXP3的表达,探讨其在儿童Ⅰ型糖尿病发病的临床意义?方法:选择患儿与正常人各30例,用电化学发光法检测血清中C肽的含量;全自动生化分析仪检测空腹血糖;流式细胞仪检测外周血CD4+ CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的数量;实时定量PCR(RT-PCR)检测FOXP3的mRNA表达?结果:Ⅰ型糖尿病患儿组中血清C肽含量(0.71 ± 0.06)ng/ml明显低于正常对照组(2.45 ± 0.28)ng/ml;血糖含量(7.51 ± 5.06)mmol/L明显高于正常对照组(4.85 ± 0.68)mmol/L;外周血中CD4+ CD25+ Treg约占CD4+ T细胞(1.57 ± 0.15)%,低于正常对照组(3.13 ± 0.29)%(P < 0.05);Ⅰ型糖尿病患儿组外周血CD4+ CD25+ Treg细胞低表达FOXP3?结论:儿童Ⅰ型糖尿病患者外周血FOXP3表达降低,导致机体不能抑制效应性CD4+ T细胞的增殖对胰岛的破坏,从而参与了Ⅰ型糖尿病的发生?     

大肠埃希菌表达的含PTD穿膜序列的融合蛋白3种复性方法比较

目的:探索融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP纯化以及复性的条件,以提高其复性效率,为后续融合蛋白生物学功能的研究做准备。方法:表达、提取并纯化包涵体形式的融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP,分别用稀释复性、透析复性、柱上复性的方法,对融合蛋白进行复性,分析不同方法的特点及包涵体复性率,采用流式细胞术检测融合蛋白的穿膜活性。结果:3种复性方法得到的融合蛋白复性率依次为:柱上复性得率最高,其次是透析复性,稀释复性得率最低。柱上复性后蛋白的穿膜效率最高,相对较低的是稀释复性,而未复性的融合蛋白穿膜效率极低。结论:3种复性方法均能对PTD穿膜蛋白复性,但以柱上复性最佳。     

重度烧伤患者细胞因子水平的变化及其临床意义

目的:通过研究重度烧伤患者体内细胞因子水平的变化,初步探讨其与疾病严重程度的关系及其临床意义?方法:选择烧伤面积≥35%烧伤总面积(TBSA)的患者与正常对照组(与烧伤组平行处理)各49例,分别收集烧伤患者伤后6 h?12 h?1 天?2天?7天?14天的外周静脉血?ELISA试剂盒检测细胞因子IL-2?IL-4?IL-6?IL-8的分泌水平;CCK-8试剂盒检测T淋巴细胞增殖能力?结果:与正常对照组比较,重度烧伤患者伤后6 h?12 h?1天?2天?7天?14天T淋巴细胞增殖能力与IL-2?IL-4的分泌水平均显著下降(P均 < 0.05),而IL-6?IL-8的分泌水平则显著升高(均P < 0.05)?结论:重度烧伤患者体内T淋巴细胞免疫功能处于抑制状态,促炎细胞因子(IL-6?IL-8)参与烧伤后炎症应答的病理生理过程?     

利多卡因在双侧会阴阻滞麻醉中的作用

目的探讨利多卡因在双侧会阴阻滞麻醉中的松弛扩张作用。方法采用回顾性调查2010年1月至2010年12月间我院妇产科住院患者妊娠37～42周288例的会阴裂伤情况。结果会阴松弛扩张效果满意,患者疼痛减轻,侧切率降低。结论会阴松弛麻醉在减轻患者疼痛,减少伤口出血,缩短缝合时间,减少工作人员的心理压力,缩短住院天数,减少感染,增加满意度方面效果显著。     

某空气净化机对医院病房空气净化效果观察

摘要 目的 〖JP2〗观察某空气净化机对医院病房内空气净化效果,为实际应用提供依据。方法 采用仪器检测法,对某空气净化机对医院病房内空气的净化效果进行评价。结果 安装有空气净化机的病房内空气中PM5.0、PM2.5、PM0.5浓度在开机10 min后即呈现明显下降趋势。对照组和观察组两组间颗粒物浓度比较结果显示,两组在各区域的PM5.0、PM2.5、PM0.5浓度在开机前并无显著差异(P＞0.05),在开机10 min后病房各区域PM5.0、PM2.5、PM0.5浓度远低于开机前。结论 在医院病房采用空气净化机可以有效提升病房空气洁净度,有助于空气质量管控。     

带PTD的小鼠Foxp3 PRD缺失突变体对小鼠脾混合淋巴细胞反应的影响

目的：构建和表达带蛋白转导结构域（protein transduction domain,PTD）的Foxp3（forkhead boxP3）PRD缺失突变体（PTD-ΔPRD）融合蛋白,并探讨其对脾混合淋巴细胞反应的影响。方法：应用PCR技术扩增获得小鼠ΔPRD片段核酸序列,将其分列插入到带PTD的pET28a-PTD和pET28a-PTD-eGFP原核表达载体中,并在大肠埃希菌Rosetta（DE3）中表达融合蛋白,利用镍柱获得并复性融合蛋白;Western印迹鉴定目的蛋白表达的正确性、流式细胞术和Western印迹检测融合蛋白穿膜进入小鼠T淋巴细胞瘤株EL-4细胞中的能力、双向混合淋巴细胞反应分析融合蛋白对T淋巴细胞增殖的影响。结果：融合蛋白可在大肠埃希菌Rosetta（DE3）中表达,并获得了大量纯化的融合蛋白。流式细胞术和Western印迹显示融合蛋白穿越细胞膜进入EL-4细胞核中,混合淋巴反应初步证明融合蛋白具有抑制T淋巴细胞增殖的功能。结论：成功表达小鼠PTD-ΔPRD Foxp3融合蛋白,该融合蛋白能有效进入细胞核内,抑制T淋巴细胞增殖。     

胃癌患者外周血云韵载孕猿的检测及临床意义

目的:通过研究胃癌患者外周血中FOXP3的表达,初步探讨其在胃癌发病机制中的临床意义?方法:选择胃癌患者与正常对照各31例,用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+T细胞的数量;ELISA检测胃癌患者和正常对照外周血单个核细胞培养上清中Th2型细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-10和Th1型细胞因子IL-2的表达;RT-PCR检测FOXP3的mRNA表达?结果:胃癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞约占CD4+T细胞(30.4 ± 1.9)%,显著高于正常人外周血中CD4+CD25+T细胞的比例(3.5 ± 0.8)%(P < 0.05);胃癌患者外周血CD4+CD25+T细胞高表达FOXP3;胃癌患者外周血单个核细胞培养上清主要分泌IL-10,而IL-2分泌无显著变化?结论:FOXP3表达的增加对肿瘤免疫具有抑制作用,可能参与胃癌的发生?     

支气管哮喘患者外周血IL-4､IL-9､IL-21的测定及临床意义

目的:探讨哮喘患者血清细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-4?IL-9?IL-21在支气管哮喘患者中的表达及与哮喘的相关性?方法:选取48例急性发作期?41例缓解期哮喘患者及48例性别和年龄相匹配的健康对照作为研究对象,进行肺功能检查?采用ELISA和实时荧光定量PCR方法,分别从蛋白和基因转录水平测定血清中IL-4?IL-9?IL-21表达和单个核细胞mRNA的表达水平?结果:①急性发作期哮喘患者IL-4?IL-9?IL-21在蛋白和基因水平上均显著高于缓解组,且差异具有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)? 缓解组血清IL-4?IL-9水平高于对照组 (P < 0.05),并且IL-4?IL-9 mRNA水平显著高于对照组(P < 0.01)?而血清IL-21以及mRNA水平在缓解组与对照组间差异均无统计学意义(P > 0.05)?② 哮喘患者血清IL-9 与IL-4 水平呈正相关(P < 0.05),IL-21 与IL-4,IL-9与IL-21间无明显相关性(P均> 0.05)?血清IL-4?IL-9水平均与患者FEV1%成负相关(P < 0.05),与总IgE水平呈正相关(P < 0.05)?而血清IL-21水平与FEV1%?血清总IgE水平无明显相关性(P > 0.05)?结论:Th2?Th9?cTfh细胞特征细胞因子IL-4?IL-9?IL-21均参与了哮喘发病,检测IL-4和IL-9水平可评估哮喘病情发展状态,指导临床治疗?