调节性B细胞与1型糖尿病

1型糖尿病主要是由T细胞介导的针对胰岛β细胞的自身免疫性疾病,然而B细胞在1型糖尿病发生、发展中也发挥重要作用,B细胞去除可用于治疗1型糖尿病.调节性B细胞是近来研究发现的一群具有免疫负向调控作用的B细胞亚群.在1型糖尿病中存在调节性B细胞数量和功能的异常.探索调节性B细胞在1型糖尿病发病机制中所起的作用将提供更多的理论依据,为1型糖尿病免疫治疗提供新靶点和新思路.     

新诊断1型糖尿病患者胰岛功能及其影响因素的临床研究

目的:探讨新诊断1型糖尿病患者胰岛功能水平及其影响因素。方法：选取2010年1月—2015年12月在南京医科大学第一附属医院内分泌科住院治疗的新诊断1型糖尿病患者105例,测糖化血红蛋白、胰岛自身抗体及HLA-A和-DR位点,控制血糖<10 mmol/L后行混合餐试验,测血糖、胰岛素及C肽,计算峰值C肽≥0.2 nmol/L的比例,并采用Logistic回归分析影响新诊断1型糖尿病患者胰岛功能的因素。结果：89.5%的患者初诊时峰值C肽≥0.2 nmol/L。初诊年龄≤18岁（OR=0.08,95%CI：0.01~0.90）,酮症或酮症酸中毒起病（OR=0.08,95%CI：0.01~0.83）,携带高危HLA-A-DRB1基因单倍型（OR=0.07,95% CI： 0.01~0.61）,胰岛自身抗体阳性数>2（OR=0.10,95%CI：0.01~0.87）者峰值C肽≥0.2 nmol/L率更低。结论：1型糖尿病患者初诊时仍有部分胰岛功能。因此,胰岛功能不能作为鉴别诊断1型或2型糖尿病的唯一依据。新诊断1型糖尿病患者胰岛功能与初诊年龄、酮症或酮症酸中毒起病、HLA-A-DRB1基因单倍型及胰岛自身抗体有关。     

体外高效扩增人外周血调节性T细胞技术的建立

目的：建立一种调节性T细胞（regulatory T cells,Tregs）体外高效扩增技术。方法：流式细胞仪分选健康人外周血CD4+CD25+CD127low T细胞,CD3/CD28磁珠刺激联合高浓度白介素?2（interleukin 2,IL?2）培养14 d。通过细胞计数评估Tregs体外扩增能力,采用流式细胞仪鉴定扩增Tregs的表型,采用混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction,MLR）实验检测Tregs的抑制功能。结果：CD4+CD25+CD127low T细胞培养14 d后增殖（755.5 ± 213.5）倍。流式细胞鉴定扩增后的细胞：CD4分子表达为（98.3 ± 1.04）%,CD19分子表达为（0.039 ± 0.021）%,CD8分子表达为（0.443 ± 0.239）%,CD25分子表达为（97.6 ± 1.35）%。FOXP3分子表达为（87.7 ± 5.5）%,Helios分子表达为（73.3 ± 2.9）%。MLR实验显示：Tregs以不同比例与外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）共培养,当Tregs∶PBMC为1∶1时,PBMC增殖抑制率最高,为（84.39 ± 1.98）%。结论：成功建立一种体外高效扩增Tregs技术。扩增后细胞保留原有的细胞表型,并具备免疫抑制功能,为临床运用Tregs治疗自身免疫性疾病、抑制移植排斥反应提供了广阔的应用前景。