成纤维样滑膜细胞的生理功能及其在炎性关节病诊疗中的应用进展

运动障碍的主要原因是各类炎性关节病(IJD),关节滑膜的功能改变影响着患者的运动功能.滑膜组织中的滑膜成纤维样细胞(FLS),在生理状态下参与了骨关节的润滑和免疫调节及维持关节腔稳态;在病理状态下,参与了IJD的发生、发展,诱发关节炎症,破坏滑膜、关节软骨、关节.FLS在IJD病理过程中扮演着重要角色,为了深入研究FLS在IJD中的作用,搞清楚IJD的发病机制和寻求治疗靶点,FLS体外研究IJD是国内外热点.为此,本文将对FLS在生理和病理状态的功能及FLS在IJD诊疗中的应用进展进行综述,以期为IJD的病理机制研究和治疗靶点的探讨提供帮助.     

纳络酮对失血致低血容量性休克大鼠的治疗作用

目的 :探讨纳络酮 （naloxone,NAL）对失血致低血容量性休克大鼠的治疗作用。方法 :颈总动脉放血 ,使平均动脉压 （MAP）降至 6 .0 k Pa,稳定 1h,完成失血致血容量性休克大鼠模型 ,2 1只大鼠随机均分为 :休克组、纳络酮治疗组、正常对照组。观察 NAL 治疗前后及各时相点大鼠呼吸频率 （RR）、MAP、血液指标等各参数的变化。结果 :纳络酮组给药后 ,MAP即刻升高 ,5 min后 MAP升至 （13.6± 2 .0 ） k Pa,较休克组增高明显 （P<0 .0 1） ,休克组、纳络酮治疗组失血后 RR明显减慢 ,纳络酮给药后 30 min RR升至高峰 （84± 10 ） / min,与休克组相比明显增加 （P<0 .0 1）。NAL 降低了肺体指数和肺含水率 ;升高 p H,Pa O2 ,降低 Pa CO2 ,改善酸中毒和心肺功能。结论 :纳络酮在失血致低血容量性休克大鼠治疗过程中有重要作用 ,能有效减轻休克的严重程度     

核因子-κB及其抑制剂对创伤失血性休克大鼠肝脏的作用

目的 从组织受体水平探讨核因子-κB(NF-κB)R其抑制剂在创伤失血性休克过程中肝损伤与抗损伤中的作用机制.方法 采用双侧股骨骨折伴失血性休克模型,并对NF-KB进行抑制后再致伤.NF-KB抑制剂采用二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)腹腔注射.动态观察伤后8 h大鼠肝组织NF-KB、肝脏病理、肝功能、TNF-α、IL-6等变化.肝组织NF-KB采用凝胶迁移试验(EMSA)法测定结合活性.TNF-α、IL-6通过酶联免疫吸附分析(ELISA)检测.结果 NF-KB的活性伤后迅速升高,伤后2 h即与正常对照相比差异有统计学意义,伤后6 h达到高峰,伤后8 h仍维持较高水平;TNF-α、IL-6伤后逐渐升高,并于伤后6 h达到高峰,休克后8 h仍维持较高水平;光镜下伤后4-8 h肝窦内淤血明显,有大量炎性细胞浸润;血清ALT、TB伤后4 h开始增高,6-8 h达到峰值.抑制NF-κB再致伤后,TNF-α、IL-6伤后各个时相点均迅速回落;肝脏大体淤血、肿胀明显减轻;光镜下伤后4～8 h可见肝小叶排列基本正常,肝细胞变性明显好转,肝窦内见淤血减轻,仅见少许淋巴细胞及中性粒细胞浸润;血清ALT、TB明显下降,与未抑制组相比差异有统计学意义.结论 NF-κB参与了严重创伤失血性休克后肝损伤的发生,NF-κB增高越多,肝损害越重,抑制NF-κB的活性有助于减轻创伤失血性后肝脏的急性损害,提示NF-κB及其抑制剂在严重创伤休克后肝组织细胞损伤与抗损伤机制方面起着重要作用.     

严重创伤时GR和HSP70的变化及其与继发性肝损伤的关系

我们用严重胸部撞击伤伴单侧股骨骨折模型,观察了伤后糖皮质激素受体     

糖皮质激素受体与严重创伤后早期肝脏损害

目的：探讨糖皮质激素受体（GR）在严重创伤后肝脏继发性损害中的作用。方法：采用成年雄性Wistar大鼠，建立严重胸部撞击伤伴单侧股骨骨折模型，并对GR进行阻断后再致伤。动态观察创伤后肝组织GR，肝脏病理，血浆肝功能生化指标，致伤24h后大鼠死亡率等变化，结果：创伤后肝组织GR的最大结合容量即开始下降，12h降至最低，24h有所回升，但肝脏病理，血浆丙氨酸转氨酶（ALT），乳酸脱氢酶（LDH）及白蛋白无显著改变，当使用GR阻断剂后，肝瘀血明显，光镜下见肝窦内有较多炎性细胞浸润，且病理改变与GR阻断程度有关，血浆ALT，LDH在伤后早期即有明显升高，白蛋白明显下降；GR阻断24h后死亡率明显升高，结论：GR不足对严重创伤后继发的肝功能不全的发生具有重要意义。     

Wistar大鼠c-ski基因部分序列的克隆、测序及实时荧光定量PCR的建立

目的 测定Wistar大鼠c-ski基因部分序列,并应用于检测大鼠c-ski基因表达的实时荧光定量PCR的建立.方法 提取培养的Wistar大鼠皮肤成纤维细胞总RNA,通过RT-PCR扩增,将扩增产物克隆到PMD-18T载体上并测序.根据获得的c-ski基因部分序列设计实时荧光定量PCR引物,建立SYBR green定量PCR检测方法,并检测培养的大鼠皮肤成纤维细胞c-ski mRNA表达水平.结果 获得的Wistar大鼠c-ski基因cDNA序列长561bp,为未曾报道的新序列,其与人、小鼠具有较高的同源性,Gen-Bank收录(收入号DQ409171).建立的SYBR green定量PCR检测标准品在103～109拷贝范围内的相关系数为0.991 49.体外培养的Wistar大鼠皮肤成纤维细胞样晶中c-ski mRNA水平为(1.024±0.18)×106拷贝/μl.结论 新获得了Wistar大鼠c-ski基因部分序列,该序列可用于实时荧光定量PCR的建立.     

肝细胞色素p450 1A1在大鼠非酒精性脂肪肝形成中的作用

目的研究肝细胞色素p450 1A1在非酒精性脂肪肝大鼠形成中的作用.方法Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组和高脂饲料2、4、8和12周组(其中每组各8只);HE染色光镜观察肝脏组织病理改变;硫代巴比妥酸法测定肝脏组织丙二醛(MDA)的含量变化;免疫组织化学和Western blot方法研究高脂饲料诱导的大鼠脂肪肝形成中肝细胞色素p450 1A1表达变化.结果高脂饲料组大鼠肝脏内MDA含量明显高于对照组,随着脂肪肝程度的加重,MDA含量逐渐增强,肝细胞色素p450 1A1蛋白表达亦明显增强.结论非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素p450 1A1表达变化与脂肪肝引起的脂质过氧化损伤程度密切相关.     

大鼠脑创伤对学习记忆及海马环磷腺苷反应元件结合蛋白的影响

目的 观察脑创伤早期的脑含水量、环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)及其磷酸化水平,探讨脑创伤和磷酸化CREB(p-CREB)水平的改变对学习记忆的影响.方法 将54只成年雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分为正常组、对照组、创伤性脑损伤(TBI)组,每组18只.采用改良的Feeney法和前期实验参数建立TBI大鼠模型,Western blot观察创伤后12h脑海马组织CREB和p-CREB表达、干湿质量法测定脑组织含水量和Morris水迷宫实验.结果 大鼠TBI后12 h脑组织含水量,与正常组和对照组相比,TBI组升高明显(P＜0.01).与正常组和对照组比较,TBI组大鼠TBI后12h海马CREB和p-CREB蛋白的表达量降低明显;潜伏期增加,2 min内寻求正确次数减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 TBI后脑水肿明显,CREB和p-CREB水平降低,可能是使认知和学习记忆功能受损的原因之一.     

地塞米松对哮喘豚鼠肺组织G蛋白α亚族的调控研究

抗哮喘药物种类繁多并不断增加 ,但糖皮质激素 (ＧＣ)作为临床一线用药其地位至今无法替代。ＧＣ的抗哮喘机制是复杂的 ,要想准确解释其平喘机制仍待时日。近来发现 ,许多药物通过与Ｇ蛋白藕联的受体相互作用发挥药效 ,我们发现哮喘豚鼠肺组织Ｇα亚族表达增高与其发病有关[1] ,ＧＣ的抗哮喘作用是否与调控Ｇ蛋白的表达有关尚少见报道。我们的实验用卵蛋白致敏复制豚鼠哮喘模型 ,用地塞米松 (ＤＥＸ)进行干预 ,通过测定Ｇ蛋白α亚族的表达变化 ,以期从信号转导的角度阐述ＧＣ的抗哮喘机制。材料与方法　雄性豚鼠 18只 (本校动物中心提供 ) ,…     

G蛋白在大鼠心血管对去甲肾上腺素脱敏反应中的作用

为了研究鸟嘌呤核苷酸结合蛋白（Ｇ蛋白）在慢性输入去甲肾上腺素（ＮＥ）所致大鼠心脏和主动脉对ＮＥ脱敏反应中的作用，采用大鼠皮下植入微量泵持续输入ＮＥ（０．１ｍｇ·ｋｇ－１·ｈ－１）模型，Ｇ蛋白α亚基及其ｍＲＮＡ水平用相应的抗体和ｃＤＮＡ探针按Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法测定．结果显示：输注６ｄＮＥ的大鼠主动脉中Ｇｓα，Ｇｉα和Ｇｏα均显著下降，但其ｍＲＮＡ无显著改变；心房及心室中Ｇｉα显著升高，Ｇｓα，Ｇｏα维持不变，而Ｇｉ２αｍＲＮＡ升高，心房中ＧｓαｍＲＮＡ下降．输入ＮＥ３ｄ的大鼠心房及心室Ｇｉα，Ｇｏα无改变，Ｇｓα４５和４２ｋＤ带显著下降，但５２ｋＤ带升高；心室中ＧｏαｍＲＮＡ的３．８和３．４ｋｂ带显著升高，而心房中５．４ｋｂ带升高，心室Ｇｉ３αｍＲＮＡ下降．上述结果表明输入ＮＥ可引起Ｇ蛋白的动态变化，提示Ｇ蛋白在ＮＥ慢性刺激引起的心血管反应性降低中可能起一定的作用，其早期以Ｇｓ下降为主，６ｄ时则以Ｇｉ升高为主