新生儿脐膨出12例报告

脐膨出 (ｏｍｐｈａｌｏｃｅｌｅ)是一种较常见的先天性腹壁发育畸形。 1990～ 1999年苏州大学附属儿童医院外科共收治 12例新生儿脐膨出 ,现报告如下。1　临床资料1.1　病例　男 10例 ,女 2例。入院年龄在生后 3～ 2 0ｈ ,平均 10 .8ｈ。患儿为第 1胎者 1例 ,第 2胎及第 2胎以上者 11例。足月顺产 11例 ,早产 1例。就诊时囊膜均完整。脐部缺损直径 <5ｃｍ 9例 ,>5ｃｍ 3例。并发肠旋转不良 11例 ,美克尔憩室 8例 ,肝囊肿 1例 ,双侧马蹄内翻足 2例 ,尿道下裂 2例 (Ⅱ°、Ⅲ°各 1例 ) ,隐睾 4例 (单侧 3例 ,双侧 1例 ;Ⅰ°2例 ,Ⅱ°2例 )。1…     

超声和微泡超声造影剂介导核因子κB圈套寡核苷酸抗大鼠肝移植后的急性排斥

目的:观察经超声介导的核转移因子κB圈套寡核苷酸作用后大鼠移植肝的肝功能变化、急性排斥的病理情况及受体的生存时间,探讨超声介导的核因子κB圈套寡核苷酸抗大鼠肝移植急性排斥的作用。方法:实验于2005-04/11在南京医科大学第一附属医院动物实验中心完成。①DA大鼠和Lewis大鼠各36只随机分为3组;每组DA大鼠(供体)、Lewis大鼠(受体)各12只,行DA大鼠至Lewis大鼠的原位肝移植。①对照组:对供肝无干预处理。②生理盐水组:生理盐水1mL 核因子κB圈套寡核苷酸100μg灌注供肝,并在冰水浴中经超声(频率2MHz)处理1min。③10%声诺维组:10%声诺维生理盐水1mL 核因子κB圈套寡核苷酸100μg灌注供肝,并在冰水浴中经超声(频率2MHz)处理1min。④检测各组受体大鼠(n=4)术后第1,4,7天的肝功能(天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶)变化、病理组织学检查术后第4天移植肝的排斥情况(n=4,按Banff标准进行程度分级,分为0,Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,0级:无排斥证据;Ⅲ级:严重排斥)、统计各组受体大鼠生存率。结果:生理盐水组和10%声诺维组各有1只受体大鼠在术后3d内死亡,未纳入统计。进入结果分析34只。①肝移植术后各组受体大鼠天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶术后第1天便有不同程度的升高;10%声诺维组各时间点的天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶值明显低于对照组和生理盐水组(P<0.01);对照组和生理盐水组的转氨酶变化差异无显著性。②术后第4天病理组织学检查各组急性排斥情况:10%声诺维组急性排斥较对照组轻(P<0.05),与生理盐水组比较差异无显著性(P>0.05)。③10%声诺维组肝移植术后受体生存时间较对照组和生理盐水组明显延长(P<0.01);对照组与生理盐水组之间术后生存时间差异无显著性。结论:超声和微泡超声造影剂介导的核因子κB圈套寡核苷酸处理大鼠移植肝,能够改善术后移植肝功能、减轻术后移植肝的急性排斥反应、延长受体大鼠的术后生存期。     

大鼠肝移植急性排斥反应时基因表达谱的变化

研究显示,肝移植后的排斥反应涉及多个基因表达的改变[1],如何高效地筛选出这些特异性表达基因,对排斥反应的诊治具有重要意义.本实验采用基因芯片技术筛选肝移植后急性排斥反应时的相关基因,以期能发现预测排斥反应的标志物.     

自发免疫耐受大鼠移植肝内调节性T细胞的生物学特性

目的研究大鼠肝移植后自发免疫耐受的形成与移植肝内CD4~ CD25~ 调节性T细胞(Tr细胞)的关系。方法按供、受者不同将实验分为3组。急性排斥组:DA大鼠为供者,LEW大鼠为受者;自发耐受组:LEW大鼠为供者,DA大鼠为受者;同基因组:供、受者均为DA大鼠。各组均建立大鼠原位肝移植模型。分别在肝移植术后4、7、14、30和90 d时采用密度梯度离心法分离移植肝内淋巴细胞,免疫磁珠分离(MACS)法分选出CD4~ CD25~ Tr细胞;用流式细胞术(FCM)检测细胞纯度,同时分析CD4~ CD25~ Tr细胞比例的变化;体外细胞增殖试验研究CD4~ CD25~ Tr细胞对CD4~ CD25~-T细胞的免疫抑制作用。结果肝移植早期,急性排斥组和自发耐受组移植肝内CD4~ CD25~ Tr细胞比例均明显增加,其中急性排斥组增加更为明显;移植后4 d左右,两组CD4~ CD25~ Tr细胞比例开始下降,急性排斥组的下降幅度较大;移植后30 d,自发耐受组受者的移植肝内CD4~ CD25~ Tr细胞比例达到第2次高峰,约在移植后90 d时下降至正常生理水平。移植后7 d左右,急性排斥组受者均因发生排斥反应而死亡,而自发耐受组受者均存活。此外,CD4~ CD25~ Tr细胞能有效抑制CD4~ CD25~-T细胞的增殖。结论CD4~ CD25~ Tr细胞是一种具有特异免疫调节功能的T细胞亚群,其主动的免疫抑制功能可能是诱导大鼠肝移植自发免疫耐受的机制之一。     

大鼠CD4+ CD25+ T调节细胞的分离培养及其功能分析

目的:研究大鼠CD4 CD25 T调节细胞(Tr)的分离培养,并对其功能进行初步分析。方法:无菌条件下切取大鼠脾脏分离脾淋巴细胞。用免疫磁珠细胞分离系统(MACS)分选CD4 CD25 T细胞,并以流式细胞术检测其纯度后,对其进行扩增。采用混合淋巴细胞反应研究CD4 CD25 Tr细胞对CD4 CD25-T细胞的免疫抑制作用。用ELISA法检测培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-10水平的差异。结果:MACS分离的CD4 CD25 T细胞的纯度达86%~93%。该细胞与CD4 CD25-T细胞相比能特异性地表达Foxp3基因。体外培养中能明显抑制效应T细胞增殖及其分泌IFN-γ、IL-2,但其自身能分泌Th2型细胞因子IL-10。结论:采用MACS系统阴性加阳性分选,可高效快速的获得理想纯度和免疫抑制功能的大鼠CD4 CD25 T调节细胞,该细胞对CD4 CD25-T细胞具有明显的免疫抑制作用,并能特异性的表达Foxp3基因。     

腔静脉成形改良背驮式肝移植1例报告

近二十年来,随着肝移植技术的不断发展和深入,在经典原位肝移植的基础上,发展了背驮式肝移植、改良背驮式肝移植等手术方式。其中腔静脉成形改良背驮式肝移植因其手术时间短,出血少,不需静脉转流、流出道并发症少等优点而被越来越多的移植中心采用。我院于2003年5月27日采用该方法治疗原发性肝癌合并门静脉高压1例,现报告如下。1临床资料患者,男性,49岁,盐城人,发现“乙型肝炎”4年,有“乙型肝炎”家族史。因“全身乏力伴腹胀1个月”入院。查体:肝性面容,消瘦,皮肤无瘀点瘀斑,巩膜无黄染,浅表淋巴结不肿大。心肺无异常。腹部稍胀,肝肋下未触…     

大鼠肝移植自然耐受模型移植术后Foxp3基因表达的变化

目的 探讨大鼠肝移植自然耐受模型移植术后Foxp3基因表达的变化及意义.方法 分别建立大鼠急性排斥(DA→LEW)、自然耐受(LEW→DA)、同基因组(DA→DA)肝移植模型,收集术后7、14、28d外周血、脾脏、肝脏标本,FCM检测标本淋巴细胞中CD4 CD25 Tr (regulatory T cell)比例变化,RT-PCR, Western blot分别检测肝脏内Foxp3基因及其scrufin蛋白的表达.结果 术后7d,各组外周血、脾脏、肝脏中CD4 CD25 Tr细胞比例无明显差异.术后14d自然耐受组脾脏、肝脏内CD4 CD25 Tr细胞比例明显高于同基因组(P<0.05),外周血中差异无统计学意义(P>0.05).术后28d自然耐受组与同基因组间无差异(P>0.05).术后7d,自然耐受组移植物Foxp3 mRNA水平明显高于排斥组和同基因组(P<0.05);术后14d,自然耐受组移植物Foxp3 mRNA水平明显高于同基因组(P<0.05);术后28d,自然耐受组与同基因组移植物Foxp3 mRNA表达无差异(P>0.05).自然耐受组与同基因术后14、28d scrufin蛋白条带明显强于7d,且自然耐受组表达强于同基因组.结论 大鼠肝移植术后1～2周内,移植肝内Foxp3基因表达可诱导机体对移植物产生免疫耐受.     

单人操作建立大鼠原位肝移植模型的学习曲线分析

目的:分析单人操作大鼠原位肝移植(rat orthotopic liver transplantation,ROLT)模型建立术的学习曲线.方法:将作者学习制作该模型最初的100例资料分为5阶段(各20例),对操作时间,无肝期,手术成功率,长期存活率及并发症率进行分析.结果:Ⅲ,Ⅳ,V阶段操作无肝期较Ⅰ,Ⅱ阶段明显减少(P=0.000),手术成功率从35%稳定上升至100%,长期存活率经历Ⅲ阶段55%～60%的平台期,达到95%;并发症率大大降低,模型稳定.结论:初学者经过耐心反复的训练,可通过学习曲线,熟练掌握ROLT术,成功建立肝移植基础研究需要的各种模型.     

改良二袖套法大鼠小体积肝移植模型的建立

目的 探讨建立稳定的小体积(30%)大鼠肝移植模型的方法.方法 SD大鼠为模型动物,体内切肝方法获取30%小体积供肝,采用改良二袖套法共完成100例大鼠小体积肝移植模型.结果 小体积肝移植术后,受体2天和7天生存率分别为78%和62%.结论 采用改良二袖套法结合体内切肝技术,可以建立稳定的小体积大鼠肝移植模型.熟练的显微外科技术和细致的操作是成功建立小体积大鼠肝移植模型的关键.     

经CT引导微波消融治疗小肝癌合并严重肝硬化的价值

目的探讨小肝癌合并严重肝硬化经CT引导微波消融治疗的安全性及应用价值。方法选择小肝癌患者55例(肝癌瘤体64个),用国产ECO-100微波刀,经CT定位引导后在局麻下将微波针头经皮肝穿刺进入瘤体进行微波消融。结果 55例64个肝癌瘤体经过消融治疗,全部瘤体原位毁损。随访期间复发9例:原肿瘤区边缘复发4例,肝内复发3例,肺部转移和骨转移各1例。30例患者治疗后出现肝功能障碍,经对症处理均好转。结论小肝癌合并严重肝硬化经过保肝治疗后可以耐受微创微波治疗,但是需要CT精确引导。