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目的:构建人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达.方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显微镜和免疫印迹检测NPHS2的表达产物podocin.结果:经鉴定目的基因NPHS2全长插入重组质粒,HEK293细胞不表达NPHS2基因,转染后可以检测到绿色荧光蛋白分布于细胞的膜周部,免疫印迹证实为编码蛋白podocin.结论:成功构建重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,有助于进一步研究podocin在足细胞疾病中的作用. 相似文献
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新生儿缺氧缺血性脑病血清中Par-4蛋白测定及临床意义 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨测定缺氧缺血性脑病(HIE)患儿血清中Par-4蛋白的临床意义。方法 采用ELISA法检测42例HIE患儿外周血中Par-4蛋白表达量。设立正常对照组。结果HIE组患儿的Par-4蛋白表达量显著高于正常对照组(P〈0.01)。HIE组内,高阴离子间隙(AG)患儿的Par-4蛋白表达量显著高于正常AG患儿(P〈0.01)。HIE患儿治疗1周后,Par-4蛋白表达量显著下调(P〈0.01)。结论 测定外周血中Par-4蛋白表达量对HIE疾病严重程度和治疗效果的判断有一定的临床价值。 相似文献
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Nehrin在微小病变型肾病大鼠模型中的表达 总被引:4,自引:2,他引:4
目的:观察nephrin在大鼠氨基核苷嘌呤霉素肾病模型(PAN)中的表达变化,探讨其在蛋白尿发生中的作用。方法:通过建立大鼠氨基核苷嘌呤霉素肾病模型,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变,应用免疫组织化学技术和RT鄄PCR观察nephrin在不同时间点肾病模型大鼠蛋白水平和mRNA水平表达改变情况。结果:①PAN注射后第1天和第3天,大鼠24h尿蛋白的排泄量较对照组无显著差异;第10天达高峰,较对照组有显著差异(P<0.01);第20天,尿蛋白排泄量逐渐下降,较对照组仍有显著差异(P<0.05);②在PAN肾病模型第3和第10天,透射电镜显示足细胞足突融合;③nephrin蛋白和mRNA水平的表达在大鼠PAN肾病模型第1天即出现下降,第3天出现明显下降,第10天下降到最低点,第20天,随着蛋白尿的恢复nephrin的表达也逐渐恢复;④肾小球足细胞nephrin表达的变化与肾病模型大鼠24h尿蛋白定量的变化呈负相关。结论:①nephrin表达的改变与大鼠氨基核苷嘌呤霉素肾病模型蛋白尿的发生密切相关;②nephrin是判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。 相似文献
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儿童系统性红斑狼疮(SLE)首发表现为消化道症状比较少见,而合并双肾输尿管积水的更加少见,尤其是儿童患者更是鲜见报道,现就本科收治1例儿童狼疮性肾炎报道如下 相似文献
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肾小球足细胞是高度分化的终末细胞。有关足细胞的认识,近年来进展很快。其在遗传性肾脏疾病和肾小球疾病的慢性进展中发挥重要作用。人们期待通过研究足细胞从分子水平上阐明肾小球疾病的发病机制,从而为更好的进行干预提供依据。本文就遗传性足细胞疾病、细胞生物学、足细胞损伤与肾小球硬化等方面的新进展作一综述。 相似文献
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肾小球足细胞是高度分化的终末细胞。有关足细胞的认识 ,近年来进展很快。其在遗传性肾脏疾病和肾小球疾病的慢性进展中发挥重要作用。人们期待通过研究足细胞从分子水平上阐明肾小球疾病的发病机制 ,从而为更好的进行干预提供依据。本文就遗传性足细胞疾病、细胞生物学、足细胞损伤与肾小球硬化等方面的新进展作一综述 相似文献
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Podocin在大鼠微小病变肾病模型中的表达和分布 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:观察podocin在大鼠氨基核苷嘌呤霉素(PAN)肾病模型中的表达和分布,探讨其在蛋白尿发生中的可能作用.方法:建立大鼠PAN肾病模型,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变,免疫荧光染色图像分析以及半定量RT-PCR的方法,分别检测不同时间点(1、3、10、20天)大鼠肾组织中podocin的表达.结果:①PAN注射后第l、3、10、20天大鼠肾小球podocin的表达强度分别为:45.03±5.10、33.35±6.41、13.58±3.73、42.34±6.65,显著低于正常对照组(54.95±6.25,P<0.01),其中第10天的表达强度最低.podocin的表达与尿蛋白排泄量呈负相关(r=-0.786,P<0.01);②podocin在正常大鼠肾小球沿毛细血管袢呈均匀连续的线样分布;模型第1天podocin在肾小球局部呈颗粒状分布;第3天呈弥散性的颗粒状分布;第10天呈粗大的颗粒状分布;第20天podocin的分布逐渐恢复为线样;③PAN注射后第1、3、10、20天大鼠肾小球podocin mRNA的表达分别为正常对照组的1.2、1.5和1.4倍,第20天大鼠肾小球podocin mRNA水平恢复正常.结论:PAN肾病模型大鼠肾小球podocin蛋白表达分布异常及其量的减少与大鼠蛋白尿的发生密切相关. 相似文献
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目的分析Ⅰ型Bartter综合征患儿SLC12A1基因变异的功能特性, 探索分子伴侣类药物4-苯丁酸钠对SLC12A1基因变异体的纠正作用。方法回顾性分析2017至2018年南京医科大学附属儿童医院收治的3例Ⅰ型Bartter综合征患儿的临床表现、生长发育情况、实验室检查结果及SLC12A1基因变异情况等, 在人胚胎肾293细胞(HEK293)中分别过表达野生型和变异型SLC12A1基因, 运用蛋白免疫印迹法检测各组Na+-K+-2Cl-共同转运体(NKCC2)的表达水平, 免疫荧光技术检测NKCC2的亚细胞定位, 同时用分子伴侣类药物4-苯丁酸钠处理转染SLC12A1基因变异体的细胞, 运用非配对t检验比较处理前后药物对变异体的纠正作用。结果 3例患儿中男2例、女1例, 分别为3.0、4.0、1.2岁。均表现为早产, 母亲孕期羊水多, 生后出现低氯性碱中毒, 伴低钾、低钠血症等。一代测序结果显示3例患儿为SLC12A1基因纯合或复合杂合型变异。在HEK293细胞中发现3种变异体NKCC2(p.L463S、p.L479V和p.507-510del)膜蛋白表达均低于野生型(0.718±0... 相似文献
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目的总结12例儿童过敏性紫癜并发肠套叠的临床特点及护理对策。方法回顾性分析12例并发肠套叠的儿童过敏性紫癜的临床及护理资料。结果 12例患儿均出现典型皮肤紫癜,其中10例以腹痛为首发症状并伴有消化道出血,4例伴有肠坏死,1例并发肠穿孔。9例手术治疗,3例空气灌肠后整复。7例空气灌肠未见肠套叠,术中发现为小肠套叠。所有患儿均有糖皮质激素应用病史,禁食时间超过3d者加用静脉营养。8例腹痛与皮疹反复者加用丙种球蛋白2g/kg,1例行血液灌流。2例合并紫癜性肾炎,随访预后良好。12例患儿均临床治愈。结论过敏性紫癜并发肠套叠以小肠套叠多见,早期诊断,清除炎性介质及外科与护理干预有助于患儿临床恢复。 相似文献
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目的:构建podocin荧光表达载体,并观察其转染HEK293后对CD2AP细胞内分布的影响.方法:PCR扩增NPHS2eDNA全长,通过T/A克隆连接至pGEMT-easy载体,应用Xho Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后,再将NPHS2全长亚克隆人pEGFP-C2.将构建好的荧光表达载体pEGFP-NPHS2转染HEK293细胞,通过免疫荧光的方法观察转染前后CD2AP细胞内的分布情况.结果:①成功构建pEGFP-NPHS2荧光表达载体;②Podocin表达载体转染HEK293细胞后,CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布.结论:Podocin转染HEK293细胞可使CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布. 相似文献