清洁级SD大鼠体重和主要脏器系数正常参考值研究及相关性分析

目的:建立本实验室清洁级SD大鼠体重、主要脏器湿重及脏器系数的正常值参考范围。方法:取不同周龄清洁级SD大鼠主要脏器并称重,计算各脏器重量和脏器系数的正常参考值范围,并与体重作相关性分析。结果:多数指标受年龄和性别的影响,性别对较大周龄大鼠所测指标影响明显,年龄对雄性大鼠所测指标影响明显。肝重、肾重、心重和肝系数分别与体重呈正相关(P<0.01或P<0.05),睾丸系数与体重呈负相关(P<0.05)。结论:在科学研究、实验结果评价时,要充分考虑性别和年龄对实验动物脏器重量及脏器系数的影响。     

五味子乙素对染矽尘大鼠肺组织一氧化氮水平和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达动态变化的影响

目的观察五味子乙素(Sch-B)对染矽尘大鼠肺组织一氧化氮(NO)水平和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA动态变化的影响。方法将96只大鼠随机分为对照组、染矽尘组、Sch-B组,每组32只,气管暴露法建立大鼠矽肺模型,造模后d 1开始灌胃给予Sch-B治疗,药物治疗3 d、7 d、14 d和28 d后,HE染色检测肺组织病理改变;硝酸还原酶法测肺组织NO含量;RT-PCR检测肺组织iNOS mRNA的表达。结果 HE染色显示Sch-B组大鼠肺损伤较染矽尘组明显减轻。NO含量和iNOS mRNA表达在染尘后各个时间点均较相应的对照组明显升高(P<0.01),其中NO含量在d 7时达到高峰后开始下降,iNOS mRNA的峰值出现在d 14。五味子组与染矽尘组相比,各时间点NO含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),而iNOS mRNA表达仅在d 3和d 7时降低明显(P<0.05)。结论染矽尘大鼠肺组织存在着NO含量和iNOS mRNA的动态变化。Sch-B能减轻染矽尘大鼠肺组织的纤维化程度,其机制可能与染尘初期Sch-B降低iNOS mRNA转录水平,抑制NO炎症介质的合成与释放有关。     

氟对大鼠肝组织中caspase-3和caspase-9基因表达的影响

目的 观察氟对大鼠肝组织caspase-3和caspase-9基因表达的影响,探讨其对肝组织损伤的作用机制. 方法 将48只SD雄性大鼠随机分为：对照组、低氟组、中氟组和高氟组,每组12只,分别饮用含0,50,100,200 mg/L氟化钠去离子水,采用自由饮水方式进行连续染毒120 d.测定肝系数;采用荧光定量PCR检测肝组织中caspase-3、caspase-9基因表达水平.结果 染氟组与对照组相比,体重差异无统计学意义.染氟组大鼠肝脏脏器系数与对照组相比差异无统计学意义.低、中、高染氟组caspase-3基因表达量分别是对照组的0.34±0.10、1.37±0.43和2.27±0.73倍;低、中、高染氟组caspase-9基因表达量分别是对照组的1.03±0.36、3.05±0.68和5.85±0.52倍. 结论 氟化物对肝细胞DNA损伤以及诱导细胞的凋亡,可能是通过激活caspase-3和caspase-9而促进了它们的发生.     

复方苦参注射液生物安全性检查法的研究

患者,女,28岁。常感腰困、腹胀,行常规妇科超声检查中发现盆腔有一独立于膀胱、子宫及右附件的囊性管状结构,于膀胱右后方呈一盲端终止。遂沿此管状回声向上探查,见此管状结构逐渐增宽,内径约2．3cm,在右侧腹迂曲向上与一大小约9．8×5．0cm的近似椭圆形囊性包块相通,彩色多普勒血流显像（CDFI）囊性包块及管状结构内未见明确血流信号;此包块紧邻右肾内上部,右肾大小形态正常,实质回声均,肾盂未见分离,右侧输尿管未见扩张,同时探查左肾,见位置、大小、形态正常,内部结构未见异常,左侧输尿管未见扩张。超声诊断：考虑①右肾重复肾重度积水;②重复肾之输尿管扩张并末端闭锁。后经住院行手术证实。     

清洁级SD大鼠血液生理及生化指标正常参考值的观察

目的建立本实验室清洁级SD大鼠正常驻生理生化指标参考范围,为科学研究、实验结果评价提供准确、可靠科学的参考依据。方法采用全自动生化检定仪及血细胞分析仪对不同周龄段、不同性别的清洁级SD大鼠的血液生理指标及生化指标值进行测定。结果得到6-8周龄和10-12周龄不同性别SD大鼠血液生理及生化值的平均值及正常参考范围。多数生化指标受年龄和性别的影响,生理指标受性别影响不大,但年龄对此有一定影响。结论在科学研究、实验结果评价时,要充分考虑性别和年龄对实验动物血液生理及生化指标的影响。     

五味子乙素对染矽尘大鼠血清唾液酸和铜蓝蛋白的影响

目的 观察五味子乙素(schisandrin B,Sch-B)对染矽尘大鼠血清唾液酸(sialic acid,SA)和铜蓝蛋白(cerulopasmin,CP)的影响. 方法 将48只大鼠随机分为对照组、染矽尘组、Sch-B干预组,每组16只.采用暴露式气管内注入法给染矽尘组和Sch-B干预组大鼠一次性染矽尘(50 m...     

染矽尘大鼠肺组织中MMP-2/9和TIMP-1/2蛋白的表达

目的探讨肺组织中基质金属蛋白酶(MMP-2/9)和其抑制物基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1/2)在SiO2致矽肺纤维化中的表达及意义。方法清洁级Wistar大鼠64只,随机分为对照组和染尘组。采用暴露式气管内注入法染尘,染尘组每只大鼠注入1 ml SiO2混悬液,对照组注入1 ml灭菌生理盐水。染尘后3,7,14和28 d处死取其肺组织,光镜观察其病理切片;通过ELISA法,测定大鼠肺组织中MMP-2、MMP-9和TIMP1、TIMP-2蛋白的表达。结果与正常对照组比较,染尘组大鼠染毒后3 d肺组织发生局灶性病变,肺泡间隔增厚,间质细胞明显肿胀,局部可见肺泡腔形成细胞性结节,28 d时染尘组大鼠肺泡结构破坏或消失,肺组织以胶原沉积、肺纤维化改变为主,可见巨大纤维性结节;染尘组肺组织内MMP-2,MMP-9,TIMP-1和TIMP-2表达均较对照组增高,结果经秩和检验差异具有统计学意义(P<0.05)。结论矽肺组织内MMP-2/9和TIMP-1/2的高表达,说明其参与了矽肺纤维化的形成。     

中国地鼠线粒体基因组与微卫星遗传标记的研究

中国地鼠在生物医学研究中占有重要的地位,但中国地鼠的分子遗传标记研究尚少。本研究运用生物信息学和比较基因组学等方法分析了中国地鼠的线粒体基因组的碱基组成、基因组结构、基因进化等特征,为中国地鼠应用于人类疾病动物模型提供基因组数据。建立了中国地鼠近交系遗传质量控制体系,为中国地鼠种质资源科学评估、合理开发利用奠定了基础。     

糖代谢异常大鼠肝组织中内质网应激相关分子CHOP和Caspase-12的表达变化

目的观察高脂饮食诱导的糖代谢异常大鼠肝脏糖原沉积与内质网应激(ERS)相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)在肝脏中的表达变化。方法 SD雄性大鼠60只,随机分为糖耐量受损组(IGT,n=20),IGT对照组(n=10),2型糖尿病组(T2DM,n=20)及T2DM对照组(n=10)。采用高脂饮食饲养12周诱导IGT大鼠,高脂饮食饲养4周后腹腔注射链脲佐菌素诱导T2DM大鼠。过碘酸雪夫氏(PAS)染色观察各组大鼠肝脏糖原改变;real-time PCR技术检测肝脏组织中CHOP mRNA的表达;Western blot技术检测肝脏组织中Caspase-12蛋白的表达。结果 IGT组和T2DM组大鼠肝脏糖原含量丰富。IGT组和T2DM组肝组织CHOP mRNA的表达水平与各自对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),而Caspase-12蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与IGT组相比,T2DM组Caspase-12蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论糖代谢异常大鼠肝组织糖原含量明显增多,ERS相关分子Caspase-12表达水平增高,肝组织中存在内质网应激,肝糖原沉积可能是内质网应激的诱因之一。     

五味子乙素对染矽尘大鼠肺组织转化生长因子β1信号转导通路分子mRNA表达的影响

目的 观察五味子乙素(sehisandrin B,Sch-B)对染矽尘大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)信号通路分子mRNA表达的影响,探讨其防治矽肺纤维化的作用及机制.方法 将96只Wistar大鼠随机分为对照组、染矽尘组、Sch-B干预组,每组32只,气管暴露法一次性染尘建立大鼠矽肺模型,染矽尘组和Sch-B干预组每只大鼠气管内注入1 ml(50 mg/ml)SiO2混悬液,对照组注入1 ml灭菌生理盐水.染尘后第1天开始灌胃干预,Sch-B组给予Sch-B(80mg·kg-1/d-1),染矽尘组和对照组给予等体积的橄榄油.不同处理3、7、14和28 d后,各组处死8只大鼠,对肺组织HE染色观察病理改变;用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定大鼠肺组织中TGF-β1、转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)和Smad4基因表达.结果 染矽尘组肺损伤明显,在3和7 d时表现为明显的肺泡炎,可见肺泡间隔水肿,大量炎性细胞浸润,在14d时,肺泡间隔明显增宽,成纤维细胞和胶原基质明显增多;在28 d时,肺泡结构破坏,肺泡壁明显增厚,肺组织以胶原沉积和肺纤维化改变为主.Sch-B组肺泡炎和肺纤维化程度均较染矽尘组明显减轻.染矽尘组3、7、14、28 d时大鼠肺内TGF-β1、TGF-βRⅡ和Smad4的mRNA表达(TGF-β1:1.03±0.31、1.33±0.39、1.08±0.26、0.82±0.16,TGF-βRⅡ:0.65±0.11、0.80±0.16、0.83±0.24、0.62±0.15,Smad4:0.87±0.15、0.68±0.11、0.78±0.19、0.30±0.08)均明显高于对照组(TGF-β1:0.59±0.22、0.55±0.25、0.56±0.20、0.55±0.12,TGR-βRⅡ:0.28±0.13、0.31 ±0.15、0.34±0.15、0.27±0.09,Smad4:0.23±0.11、0.40±0.12、0.39±0.12、0.18±0.06),差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05),其中TGF-β1在第7天时达高峰后开始下降.Sch-B干预组各时间点TGF-β1和Smad4(TGF-β1:0.68±0.28、0.88±0.25、0.75±0.11、0.61±0.14,Smad4:0.25±0.12、0.45±0.09、0.44±0.07、0.21±0.04)均低于染矽尘组,差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).与染矽尘组相比,Sch-B干预组TGF-βRⅡmRNA表达无明显改变,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Sch-B能减轻染矽尘大鼠肺组织的纤维化程度,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1和Smad4的mRNA表达上调,从而干扰TGF-β1/Smad4信号通路对靶基因的激活来实现的.

Abstract：

Objective To investigate the effects of schisandrin B (Sch-B) on expression of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) and signal transduction molecule mRNA in rat lungs exposed to SiO2,and explore the intervention mechanism of Sch-B on pulmonary fibrosis induced by SiO2. Methods Ninety six Wistar rats were randomly divided into control (normal saline) group, SiO2 group and SiO2 plus Sch-B group.The rats were exposed to SiO2 by direct tracheal instillation to establish the silicotic animal models. SiO2 group and SiO2 plus Sch-B group were treated with 1ml SiO2 (50 mg/ml) for each rat From the first day after model establishment, SiO2 plus Sch-B group were orally given Sch-B (80 mg/kg) a day, control group and silica group were orally given olive oil. On the 3rd, 7th,14th and 28th days after treatment, 8 rats in each group were sacrificed and samples were collected. The histo-pathological examination of lung was performed by HE staining. The expression levels of TGF-β1 、TGFβR Ⅱ and Smad4 mRNA in the lung tissues were detected by RT-PCR. Results The results of histo-pathological examination showed that in SiO2 group, lung tissues were injured obviously; the alveolar inflammation with alveolus interval edema and inflammation cell infiltration appeared on the 3rd and 7th days; the alveolus interval became thicker, became thicker, fibroblast and collagen matiix increased markedly on 14th day; the alveolar structure was damaged, alveolar wall thickened obviously,collagen aggradation and pulmonary fibrosis displayed on 28th day. The alveolar inflammation and pulmonary fibrosis in SiO2 plus Sch-B group were significantly less than those in SiO2 group. The expressions levels of TGF-β1、TGFβR Ⅱ and Smad4 mRNA (TGF-β1: 1.03±0.31 、1.33±0.39、1.08±0.26、0.82±0.16,TGF-βR Ⅱ:0.65 ±0.11、0.80 ±0.16、0.83 ±0.24、0.62 ±0.15, Smad4: 0.87 ±0. 15、0.68 ±0.11、0.78 ±0.19、0.30 ±0.08) in SiO2group were significantly higher than those in the control group (TGF-β1:0.59±0.22、0.55 ±0.25、0.56±0.20、0.55 ±0.12,TGR-βR Ⅱ:0.28 ±0.13、0.31 ±0. 15、0.34 ±0.15、0.27 ±0.09,Smad4:0.23 ±0.11、0.40 ±0. 12、0.39 ±0.12、0.18±0.06)(P＜0.01 or P＜0.05), but the expression level of TGF-β1 mRNA was the highest on the 7th day. The expression levels of TGF-β1 and Smad4 mRNA (TGF-β1: 0.68 ±0.28、0.88 ±0.25、0.75 ±0.11、0.61 ±0. 14,Smad4:0.25 ±0.12、0.45 ±0.09、0.44 ±0.07、0.21 ±0.04) in SiO2 plus Sch-B group were significantly lower than those in SiO2 group (P＜0.01 or P＜0.05),but there were no significant differences of the TGFβR Ⅱ mRNA expression levels between SiO2 group and SiO2 plus Sch-B group. Conclusion Sch-B can reduce the pulmonary fibrosis induced by SiO2 through inhibition of the mRNA express of TGF-β1 and Smad4 in the lung tissue, modulating the TGF-β1/Smad4 signal transduction pathway and inhibiting the target gene activation.