pEGFPN1-dnEGFR对胃癌细胞的放疗增敏作用

目的探讨人表皮生长因子(EGFR)显性负性突变体真核表达载体(pEGFPN1-dnEGFR)对胃癌细胞放疗敏感性的影响。方法用pEGFPN1-dnEGFR转染人胃癌细胞株SGC-7901和NCI-N87并联合放疗,将两种胃癌细胞分别分为3组,即未处理组、pEGFP-N1空载体质粒转染组(空质粒组)、pEGFPN1-dnEGFR质粒转染组(目的质粒组),用MTT法测定对两种胃癌细胞增殖效应的影响,RT-PCR检测细胞中Bax、Cyclin D1的mRNA表达情况,Western blot检测细胞中Bax、Cyclin D1蛋白表达情况。结果两种胃癌细胞目的质粒转染组的抑制率较空质粒组和未处理组显著提高(P<0.05)。RT-PCR显示两种胃癌细胞目的质粒组Bax mRNA相对表达强度较空质粒组和未处理组升高;目的质粒组Cyclin D1mRNA相对表达强度较空质粒组和未处理组降低(P<0.05)。Western blot显示两种胃癌细胞目的质粒组Bax蛋白表达相对强度较空质粒组和未处理组明显升高;目的质粒组Cyclin D1蛋白表达相对表达强度分别较空质粒组和未处理组降低(P<0.05)。结论 pEGFPN1-dnEGFR能够提高胃癌细胞对放疗的敏感性。     

人SOX7启动子荧光素酶报告质粒构建及HMGA2对其活性影响的研究

目的 研究发现,HMGA2促进肿瘤细胞发生EMT与其下游基因SOX7有关.为进一步验证转录因子HM-GA2与其下游基因SOX7之间的调控关系,本研究通过构建人SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒,采用荧光素酶报告实验观察HMGA2对SOX7基因启动子荧光素酶活性的影响,为研究HMGA2转录表达的调控机制提供必要的实验基础.方法 采用PCR技术扩增人SOX7基因启动子序列(-1 549～+79nt),将SOX7基因启动子插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中构建质粒pGL3-SOX7-promoter;再分别将pGL3-SOX7-promoter、pGL3-basic-SOX7-promoter和对照质粒(pLV-UbC-IRES2-EGFP)、pGL3-SOX7-promoter和HMGA2表达质粒(pLV-UbC-HMGA2-IRES2-EGFP)3组质粒共转染293T细胞,培养48 h后,检测3组荧光素酶的表达情况,观察HMGA2对SOX7基因启动子的调控作用.结果 通过菌落PCR和核酸测序证实,人SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒pGL3-SOX7-promoter构建成功;将pGL3-SOX7-promoter和HMGA2表达质粒(pLV-UbC-HMGA2-IRES2-EGFP)共转染293T细胞48 h后,与对照组相比,SOX7基因启动子介导荧光素酶的活性降低约31％,受到明显抑制(P=0.003),提示HMGA2可能调控SOX7基因启动子的活性.结论 本研究成功构建了SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒,初步验证了SOX7是HMGA2下游的作用靶点.     

纺锤菌素抑制胃癌细胞的侵袭和转移

目的探讨纺锤菌素(netropsin)对胃癌细胞侵袭和转移能力的影响及其分子机制。方法用Transwell检测胃癌细胞侵袭和转移能力,用Western blot检测EMT相关标志物E-cadherin和vimentin表达,用免疫荧光检测β-catenin的细胞定位,验证netropsin作用前后Wnt/β-catenin信号通路活性。结果 Netropsin浓度25μmol/L时对MKN28细胞增殖有抑制作用,netropsin可以降低上皮标志物E-cadherin的表达,上调间质标志物vimentin的表达;netropsin可以通过抑制胃癌细胞的EMT,降低胃癌细胞侵袭和转移能力(P0.05),同时可阻止β-catenin进入细胞核。结论 Netropsin可以通过与HMGA2竞争结合转录因子结合位点抑制Wnt/β-catenin信号通路,降低胃癌细胞EMT的发生,从而抑制胃癌细胞侵袭能力。     

胃癌中HMGA2与HDAC6表达的临床意义及其相关性

目的检测胃癌中高迁移率族蛋白2(HMGA2)和组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在胃癌中的表达情况及相关关系,分析其与临床病理特征的关系。方法分别用免疫组织化学法、Western blot和real-time PCR检测82例配对人胃癌、癌旁及正常组织中HMGA2和HDAC6的蛋白及mRNA表达,并分析其与临床病理参数的关系及两者表达的相关性。结果胃癌组织中HMGA2和HDAC6蛋白阳性表达率分别为69.51%(57/82)和65.85%(54/82),明显高于癌旁组织14.63%(12/82)、12.20%(10/82)和正常组织9.76%(8/82)、7.32%(6/82)(P0.05);胃癌组织HMGA2、HDAC6蛋白和mRNA表达较癌旁组织及正常组织高(P0.05),且两者表达水平与肿瘤的临床分期和淋巴结转移相关(P0.05);HMGA2和HDAC6在胃癌组织中的表达呈明显正相关(r=0.56,P0.05)。结论 HMGA2和HDAC6基因在胃癌组织中存在高表达且共存现象,可能与胃癌恶性程度有关。     

消化系统整合课程改革的实施及其存在的问题和建议

以器官系统为中心的医学整合教学模式已经成为现代医学教育的趋势。该模式将基础医学与临床医学紧密结合,以培养合格的临床医师为主要任务,目前在国内外已广泛开展。本文通过总结消化系统整合课程改革在重庆医科大学实施中的经验,分析参与教育改革的学生成绩,结合重庆医科大学实际情况,发掘教学改革中出现的问题,并探讨可能的解决方案,为进一步深化整合课程改革积累经验。     

KLF4对人胃癌细胞株SGC-7901体外增殖及迁移侵袭能力的影响

目的探讨Krüppel样因子4(KLF4)对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和迁移侵袭能力的影响。方法以人胃癌SGC-7901细胞株为研究对象,脂质体法转染pcDNA3.1IE-KLF4重组质粒并建立KLF4稳定过表达细胞株,以未转染KLF4基因和转染空质粒载体的胃癌细胞株为对照。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测KLF4mRNA的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后SGC-7901细胞的增殖情况,划痕试验和Transwell小室检测胃癌细胞迁移侵袭能力。结果与未转染组和空载体组比较,转染组细胞KLF4mRNA表达明显,MTT法检测显示48h和72h细胞增殖抑制明显(P<0.05),24、48、72h的增殖抑制率分别为12.90%、23.85%、25.56%。未转染组、空载体组和转染组细胞迁移率分别为(78.15±4.86)%、(73.75±4.03)%、(60.84±5.56)%,侵袭穿膜细胞数分别为(163.53±13.95)个、(158.07±12.54)个、(73.87±8.70)个,转染组细胞迁移率和侵袭穿膜细胞数较对照组均降低(P<0.05)。结论 KLF4对胃癌SGC-7901细胞的体外增殖及迁移侵袭具有抑制作用。     

恶性肿瘤中高迁移率族蛋白A2的功能研究进展

高迁移率族蛋白A2(high mobility group A2, HMGA2)是一种非组蛋白染色体蛋白,本身无转录活性,但是可以通过改变染色质结构来调节其他基因的转录.HMGA2在正常组织中低表达或不表达,而在胚胎期以及恶性肿瘤组织中的表达明显上调.在一些恶性肿瘤中,HMGA2可以作为诊断分子标志物或判断预后的独立因子.此外,HMGA2能够促进上皮-间质转化以及维持干细胞的分化潜能和自我更新能力,在肿瘤的发生、生长和转移等方面可能发挥着重要作用.     

急性出血性坏死性小肠炎1例

1 病例资料患者陈某,男性,28岁,因“上腹部疼痛1周,复发加重15 h”于2010年11月26日3时急诊入院.入院前1周,患者无明显诱因出现上腹部持续性隐痛,伴恶心、呕吐,无畏寒、发热,无返酸、嗳气,无黄疸及厌食.社区医院按“急性胃炎”治疗后,患者腹痛有所缓解.15 h前,患者上腹部疼痛复发加重.体格检查:生命体征平稳.中上腹及右下腹压痛,无反跳痛及肌紧张,未扪及包块,Murphy's征(-),Rovsing征可疑阳性;叩诊鼓音,移动性浊音(-),肠鸣音约5次/min.     

Ⅲ_B期胃癌合并胃间质瘤1例

1 临床资料 患者,男性,53岁,因"反复上腹部饱胀不适1个月"于2009年12月18日入住我院.体格检查:生命体征平稳;腹部平坦,未扪及包块;无胃肠型及蠕动波,肠鸣音3～5次/min,直肠、肛门指检未发现异常包块.