猪链球菌选择性培养基优化

目的对原有的猪链球菌选择性培养基进行优化改良,用于猪源样本中猪链球菌的分离。方法比较猪链球菌在其他高营养培养基上的生长适宜性;进一步通过药物敏感实验筛选对猪链球菌2型不敏感的抗菌药物,继而用琼脂平板稀释法测定候选抗菌药物的最小抑菌浓度,组方后用现场标本考核抑菌效果,用模拟样本和猪源标本考核分离效果。结果使用特殊蛋白胨替代原培养基中的酵母粉,可改善猪链球菌生长状态,使菌落更易于挑取。筛选出含有氨曲南50 mg/L,多粘菌素B 10 mg/L,链霉素40 000 U/L,结晶紫0.5 mg/L,呋喃妥因6 mg/L的改良选择性培养基,该培养基对猪源标本中常见的非目标菌抑制作用更强。在实验室模拟样本中,使用直接涂布法,检测猪链球菌灵敏度为1×103CFU/ml;在猪源样本中,经选择性脑心肉汤增菌后,改良选择性培养基可使猪链球菌检出率达到17.1%。结论改良选择性培养基对猪链球菌具有更强的选择作用,使用该培养基可以提高检测灵敏度,更适合动物源性标本中猪链球菌的分离培养。     

崇州市23株副溶血弧菌的病原特征分析

目的分析四川崇州地区2014-2017年6起23株副溶血弧菌食物中毒疫情分离株毒力基因携带,耐药及分子分型特征,为该地区副溶血性弧菌疾病防治提供科学依据。方法采用微量肉汤稀释法(MIC)检测13种抗生素的敏感性;实时荧光PCR法检测(tdh、trh)毒力基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)和Bio Numerics软件对菌株进行分子分型分析。结果 23株副溶血性弧菌PFGE聚类分析共分为18个型别。2起暴发的病人之间分属同一PFGE型别,其余4起暴发病人、食品、环境之间相关性均低于60%;2起暴发病人分离株存在100%相似的带型。食品和环境分离株无毒力基因检出,病人分离株毒力基因检出率88.89%(16/18)。食品环境分离株对头孢唑啉100%(5/5)耐药,对其他12种药物均敏感;临床分离株对氨苄西林27.78%(5/18)耐药、头孢唑啉100%(18/18)耐药,对其他11种药物均敏感。结论该地区近年来由副溶血性弧菌引起的食物中毒事件存在由多种不同型别和相同型别(PFGE带型100%相似)弧菌引起情况。     

胃部手术患者经不同侧鼻孔安置胃管的对比研究

目的 探讨不同侧鼻孔置人胃管对术中胃管调整的影响.方法 将200例胃部手术患者随机分为两组.对照组术前经右鼻孔插人胃管,实验组术前经左鼻孔插入胃管,观察两组患者术中发生胃管调整困难的差异.结果 经左鼻孔插入胃管术中发生胃管涮整困难的患者为1例,经右鼻孔插人胃管术中发生胃管调整困难的患者为24例.对经右鼻孔插入胃管术中发生胃管调整(向里插入一部分)困难的患者实施拔除胃管改为经左鼻孔插入后,成功23例.不同侧鼻孔安置胃管术中发生胃管调整困难的百分率差异有统计学意义(X2=24.18,P<0.05).结论 对行胃部手术的患者,术前经左鼻孔留置胃管可有效降低术中胃管调整的困难,减轻患者鼻咽部及食道黏膜的损伤.     

检测家蝇抗菌肽基因diptericin时间表达模式的实时荧光定量方法的建立

目的建立荧光染料(SYBR Green I)实时荧光定量PCR(real-timePCR)方法检测的家蝇抗菌肽基因diptericin时间表达模式方法。方法基于已克隆出的diptericin基因,利用软件Prmier5.0设计上下游引物,对未诱导,诱导后2h、4h、8h、12h、24h、36h、48h及不同发育阶段的家蝇三龄幼虫进行real-timePCR设计引物,然后利用10倍系列稀释含有目的基因的质粒,进行实时荧光定量PCR反应,制作标准曲线。结果未刺激的三龄幼虫diptericin基因表达量非常低,与诱导后2h的相比,差1个数量级,诱导后2h开始缓慢上升,12h后达到最高峰,24h后缓慢下降,36h后回到诱后2h的水平,在家蝇三龄幼虫的卵、1龄及2龄期的表达量非常低,3龄期达到最高峰。结论实时荧光定量PCR检测家蝇抗菌肽基因diptericin的方法具有特异性好、灵敏度高,为进一步探讨家蝇抗菌肽生物活性,研究新的抗菌药物打下初步基础。     

侧卧位手术中新型双层托手板的设计与应用

目的探讨侧卧位手术中新型手术用双层托手板的应用效果。方法侧卧位患者摆放体位前,"新型手术用双层托手板"活动支撑杆处于隐形状态。患者需左侧位时,其左侧上肢位于双层托手板的下层,由医务人员做完上肢输液、动脉插管等操作后,放下左、右支撑杆,以便挡住托手板下层的上肢不移动,同时加强对上托手板的支撑作用;术中或术后要移动托手板下层的病人上肢时,打开左、右支撑杆即可。反之亦然。结果 2008年12月～2011年12月,经600余例(其中218例输液和动脉插管的上肢位于双层托手板的下层)侧卧位手术使用证明,具有使用方便,操作灵活的优点并杜绝了多次拔、插输液器与留置针的连接、动脉插管的连接而产生的病人感染的危险。结论新型手术用双层托手板能完全克服其他固定双层托手架的不足,值得在临床推广使用。     

贝类GI型扎幌样病毒荧光定量PCR检测

目的 建立贝类中GI型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法 .方法 通过用聚乙二醇6000(PEG6000)对贝类中扎幌样病毒进行浓缩,用序列比对软件设计出针对GI型扎幌样病毒保守序列的通用引物与探针,建立GI型扎幌样病毒荧光定量PeR检测方法 .结果 浓度为106～104,103,102～101拷贝/μL的GI扎幌样病毒检出率分别为3/3,1/3,0/3,因此,常规逆转聚合酶链反应(RT-PCR)最低检出限为103拷贝/μL.此荧光定量PCR方法 对贝类中GI型扎幌样病毒检测高度特异,最低检出限可达102拷贝/μL,比常规RT-PCR的低1个数量级,即灵敏度高10倍,线性范围为102～106拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.998 8.结论 本研究建立了GI型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法 ,可用于贝类中GI型扎幌样病毒污染状况及其突发事件的快速定量检测.     

四川震灾区湿疹病人皮肤菌群分析

2008年5月12日的四川大地震,导致大量房屋倒塌毁坏,使人们的生活环境发生了巨大的变化,帐篷成为许多人的临时住所.调查发现,地震期间,许多居住在帐篷的人患了湿疹性皮肤瘙痒症.为了解细菌等因素在其致病中的作用,我们对皮肤病患者患处的菌群分布进行了调查分析,现将结果报告如下.     

HBV—DNA实时荧光定量检测与HBV免疫标志物结果相关性分析

目的通过对血清中乙型肝炎病毒核酸（HBV～DNA）的实时荧光定量PCR（real—timePCR）（荧光探针法）检测结果与乙肝免疫标志物相关性分析,从而探讨二者在临床诊断中的应用。方法采用real—timePCR法检测HBV—DNA．ELISA法检测血清HBV免疫标志物。结果121例乙型肝炎标本中,FIBsAg＋、HBeAg＋、FIBcAb＋阳性组患者有39例．血清HBV—DNA阳性率67％,平均浓度1．42x10’Iu／rnl;HBsAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋阳性组患者有64例,血清HBV—DNA阳性率45％,平均浓度4．29×10^5IU／ml;HBsAg＋,HBcAb阳性组患者有6例,血清HBV—DNA定量值均为〈500;HBsAg＋,HBeAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋有2例,血清HBV-DNA阳性50％,平均浓度2．96×10^4IU／ml。结论血清中HBV—DNA定量检测结果与乙肝免疫标志物结合能更好地为临床提供准确可靠的诊断数据。     

大鼠动脉粥样硬化模型的建立与评价

目的 采用维生素D3(VD3)联合高脂饲料建立大鼠动脉粥样硬化模型,探讨高脂饲料中胆固醇含量及饲喂周期对造模的影响。 方法 40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、4个模型组(实验开始分4次腹腔注射VD3共70万IU/kg):模型1组与模型2组分别饲喂高脂饲料A(含1%胆固醇)6W与8W,模型3组与模型4组分别饲喂高脂饲料B(含3%胆固醇)6W与8W。测定血脂水平及血清、肝脏抗氧化酶活性,观察肝脏与胸主动脉形态学变化。 结果 造模6W、8W后模型组大鼠血脂水平均明显升高(P<0.05),血清及肝脏抗氧化酶活性显著下降(P<0.05),肝组织累积大量脂肪空泡,胸主动脉内膜明显增厚、细胞排列紊乱,其中模型1组(饲喂高脂饲料A,6W)大鼠血脂水平及抗氧化酶活性较其他模型组差异更为明显。 结论 利用VD3联合高脂饲料(含1%胆固醇)饲喂大鼠6W即可建立稳定的大鼠动脉粥样硬化模型。     

一起鼠伤寒沙门菌暴发疫情快速诊断和溯源分析

2013年6月四川省眉山市发生一起以发热、乏力、头痛、腹泻为主要症状的暴发疫情。为快速诊断致病因子,查找污染来源,控制疫情,结合流行病学调查,采集患者、食堂员工相关样本和食堂留样食品进行检测分析,从6份病例样本检出鼠伤寒沙门菌,2份食品样本检出鼠伤寒沙门菌;来自患者和食品的鼠伤寒沙门菌菌株经XbaⅠ酶切后脉冲场凝胶电泳图谱完全一致,快速准确诊断疫情,为及时有效的控制疫情发展提供技术支持。