黄芪治疗复发性阿弗他溃疡疗效分析及作用机理探讨

目的:观察黄芪治疗复发性阿弗他溃疡(RAU)的临床疗效,并探讨黄芪对RAU患者失衡表达转录因子T-bet/GATA-3的调节作用.方法:健康对照组25例,RAU患者65例随机分为RAU常规治疗组和黄芪治疗组,观察治疗后1年溃疡复发情况;酶联免疫吸附测定法检测血清中白细胞介素(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)含量;Western blot法检测外周血单个核细胞中T-bet和GATA-3蛋白表达.结果:黄芪治疗组总有效率为90.91%,显著高于常规治疗组25%(P＜0.01).血清IL-4含量,对照组(25.45±3.69)pg/ml,显著低于RAU常规治疗组(42.32±4.47)pg/ml,(P＜0.01),治疗组(32.35±5.24)pg/ml显著高于对照组(P＜0.01).血清IFN-γ含量,对照组(24.53±2.69)pg/ml显著高于常规治疗组(17.57±0.68)pg/ml(P＜0.01),黄芪治疗组(21.60±3.03)gp/ml显著低于对照组(P＜0.01),显著高于常规治疗组(P＜0.01).外周血单个核细胞中T-bet蛋白表达,健康对照组(0.75±0.17),显著高于常规治疗组(0.21±0.09)(P＜0.01),黄芪治疗组(0.56±0.23),显著高于常规治疗RAU组(P＜0.01),显著低于对照组(P＜0.01);外周血单个核细胞中GATA-3蛋白表达,健康对照组(1.06±0.20),显著低于常规治疗组(1.82±0.17)(P＜0.01),黄芪治疗组(1.04±0.27),显著低于常规治疗组(P＜0.01),与对照组比较无统计学差异(P＞0.05).结论:黄芪通过调节转录因子T-bet和GATA-3的平衡表达,纠正RAU患者Th1/Th2细胞亚群失衡的免疫异常,有效治疗RAU溃疡复发.     

量子点标记技术在生物医学中的研究进展

量子点（QDs）又称半导体纳米微晶体，是一种由Ⅱ～Ⅵ族或Ⅲ～Ⅴ族元素组成的约2～20nm的纳米晶粒，具有可调节和对称的发射光谱、光化学稳定性好、激发光谱宽且连续、粒度的不同发射光的颜色也不同等特点，可用于多种标记物的同时检测，极大地促进了荧光标记在生物医学中的应用。该技术具有当前体外和体内标记所没有的独特优势，根据特定的检测对象，可选择合适的生物分子进行修饰。     

Med19基因沉默对p53野生型和突变型乳腺癌细胞紫杉醇化疗疗效的影响

目的：探讨下调中介体（mediator,Med）19表达是否增加紫杉醇(pacliatxel, PTX)对p53野生型和突变型乳腺癌细胞化疗的疗效。方法：构建Med19RNA干扰（RNAi）慢病毒,分别感染p53野生型的乳腺癌细胞MCF-7和p53突变型的乳腺癌细胞MDA-MB-231,两种细胞均分为Med19基因敲减组（KD组：细胞感染pGcscil-Med19-siRNA-GFP ）、空载体感染组（NC 组：细胞感染pGcscil-Med19-NC-GFP）、对照组（CON组：未感染慢病毒的乳腺癌细胞）,荧光显微镜观察慢病毒感染效率。Western blotting检测Med19基因沉默后各组细胞内P53、磷酸化P53（pP53）、P21蛋白表达水平的变化。紫杉醇分别作用于Med19基因沉默前后的MCF-7和MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的变化。结果：KD组和NC组细胞的荧光感染效率均大于90%,表明获得了满意的感染效率。与CON组和NC组相比,两种细胞KD组的Med19蛋白表达水平均下降,差异有统计学意义（均P<0.05）。MCF-7细胞KD组P53、pP53、P21蛋白表达上调,差异有统计意义（均P<0.05）。在0.01～50 μg/ml 范围内,紫杉醇抑制两种乳腺癌细胞的生长增殖并呈浓度依赖性（P<0.05）,对KD组的抑制率和细胞凋亡率均高于NC组及CON组,差异有统计学意义（均P<0.05）;但MDA-MB-231细胞各组间抑制率差异无统计学意义（均P>0.05）。10 μg/ml紫杉醇导致两种细胞的KD组和NC组均出现G2/M期阻滞,并且MCF-7细胞KD组G0/G1期细胞较NC组显著增加（P<0.05）。结论：Med19基因沉默增强紫杉醇对p53野生型乳腺癌MCF-7细胞化疗的疗效,其机制可能为增强了p53基因的表达活化,通过其下游基因p21 调节细胞周期、促进细胞凋亡。     

微柱凝胶技术检测血型抗体IgG亚型试验方法的建立

目的:建立微柱凝胶技术用于检测血型抗体IgG亚型(IgG_1、IgG_2、IgG_3、IgG_4)的试验方法。方法:筛选6种不同规格的葡聚糖凝胶(颗粒直径在25~100μm)制备微柱凝胶卡,对添加的IgG亚型单抗的最佳稀释度、特异性、重复性和灵敏度进行对比试验,采用正交试验对试剂红细胞浓度及加样量进行筛选。结果:通过筛选抗球蛋白IgG亚类单克隆抗体的效价、亲和力以及与凝胶微粒最佳混合比例,建立凝胶微柱反应体系。选择颗粒直径为75μm(G-75)的葡聚糖凝胶作为灌注凝胶,添加A厂家的IgG亚型单抗4倍稀释后与凝胶混合能够满足检测特异性和灵敏度的要求,加样量选择25μl被检血清与50μl浓度0.8%~1.0%的悬浮红细胞反应,试验结果满意。结论:通过对试验体系的优化组合,成功研制了用于检测血型抗体IgG亚型的微柱凝胶检测技术方法。     

红霉素预防兔气管损伤后气管狭窄研究

目的 探讨红霉素在预防兔气管损伤后气管狭窄的作用及机制.方法 18只新西兰大耳白兔随机分为阴性对照组、模型对照组、红霉素治疗组,每组均行气管切开,阴性对照组气管切开后直接缝合气管,其余2组气管切开尼龙刷刮除气管黏膜后缝合气管.红霉素治疗组术前7d开始给予红霉素13.6mg/kg,每日灌胃至术后10 d,阴性对照组、模型对照组每日灌胃等量生理盐水.术后10 d处死兔子,收集气管组织,HE染色检查气管组织病理学改变并测量气管狭窄率;实时定量PCR检测各组气管组织转化生长因子β1 (TGF-β1) mRNA表达;免疫组化法检测气管组织Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白的表达.结果 红霉素治疗组气管狭窄率为(35.11±4.50)％,阴性对照组气管狭窄率为(11.96±3.26)％,模型对照组气管狭窄率为(53.95±7.09)％,红霉素治疗组气管狭窄率低于模型对照组(t=13.98,P＜0.05).组织病理学结果显示,模型对照组气管狭窄组织中较多炎性细胞浸润,成纤维细胞大量增殖,大量小血管生成,而红霉素治疗组炎性细胞浸润、成纤维化细胞增殖、小血管生成均减少.红霉素治疗组TGF-β1 mRNA相对表达量较模型对照组减少(t=4.55,P＜0.05).免疫组化结果显示,红霉素治疗组的工型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白的表达量均较模型对照组明显降低(P值均＜0.05).结论 红霉素可能通过抗炎,下调TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白表达,减轻兔气管损伤后气管狭窄.     

新生儿溶血3项试验与血型抗体 IgG亚型的相关性分析

目的 探讨新生儿溶血3项试验与血型抗体IgG亚型的相关性,评价IgG抗体亚型检测的临床价值,为临床后续治疗提供理论依据。方法 对2018年7月～2019年7月在笔者医院分娩的65例产前血型抗体高效价的孕产妇进行产后新生儿血型血清学检测(ABO 58例,Rh 7例),采用微柱凝胶技术分别检测新生儿血型、溶血病3项试验和血型抗体IgG亚型含量。结果 65例新生儿中有42例溶血试验证实为与血型有关的新生儿溶血病。31例患儿血清中检测到IgG1亚型含量升高,27例IgG2升高,10例IgG3升高,IgG1和IgG3亚型升高的新生儿均出现重症高胆红素血症,而5例仅IgG4亚型升高的新生儿均未出现溶血相关的高胆红素血症,提示新生儿IgG1和IgG3抗体亚型的含量与高胆红素血症的危重程度密切相关。溶血3项试验对诊断新生儿溶血病具有一定的参考价值,但对判定新生儿溶血病的严重程度,其结果的准确性不高,临床上不能以此作为评估患儿黄疸严重程度和干预治疗的指标。结论 新生儿溶血3项试验与血型抗体IgG亚型含量具有一定的相关性,溶血病严重程度与血型抗体IgG1和IgG3亚型含量呈正相关、对溶血3项试验阳性的新生儿有必要进行IgG抗体亚型分析,从而实现个体化精准治疗。