基于HPLC-ICP-MS的冬虫夏草(繁育品)干品及鲜品中砷形态、价态研究及风险评估北大核心CSCD

该文首次对冬虫夏草(繁育品)干品和鲜品中砷形态、价态进行对比研究,以期明确冬虫夏草(繁育品)中砷的具体形态、价态及其安全性。采用仿生提取法结合HPLC-ICP-MS对干品和鲜品样品中砷甜菜碱(AsB)、亚砷酸根(AsⅢ)、二甲基砷(DMA)、砷胆碱(AsC)、一甲基砷(MMA)和砷酸根(AsⅤ)进行研究。HPLC色谱柱为DioncxIonPac^(TM)AS7阴离子交换柱,流动相为100 mmol·L^(-1)碳酸铵-水,室温下梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1);HPLC与ICP-MS联用进行测定;结合化学计量学对砷含量特征进行分析;采用暴露限值法(MOE)对样品中无机砷的健康安全风险进行评估。方法学验证结果表明,6种砷化合物在10~500 ng·mL^(-1)线性关系良好(R^(2)>0.999),精密度RSD为1.8%~3.0%,回收率(n=6)为84.15%~98.28%,重复性RSD为6.4%~7.7%,样品在10 h内稳定性RSD为8.3%~14%。30批次冬虫夏草(繁育品)干品及鲜品中检出痕量AsⅢ和AsⅤ,其他形态、价态砷均未检出,其中干品AsⅢ为0.019~0.040 mg·kg^(-1),AsⅤ为0.024~0.061 mg·kg^(-1);鲜品AsⅢ为0.0023~0.0061 mg·kg^(-1),AsⅤ为0.008~0.016 mg·kg^(-1)。风险评估结果表明,干品及鲜品无机砷的MOE均远大于1,无机砷潜在的健康安全风险较小。该研究建立的冬虫夏草(繁育品)中6种砷化合物HPLC-ICP-MS检测方法高效快速、准确性及稳定性较好,研究结果为冬虫夏草(繁育品)安全性及质量可控性奠定基础。     

基于ICP-MS法对4种动物源性药材中16种无机元素的测定及量变规律研究

目的 测定地龙、土鳖虫、九香虫、蜂房4种动物源性药材中无机元素,并探索其元素量变规律。方法 采用微波消解法对样品进行前处理,电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法对地龙、土鳖虫、九香虫、蜂房中铍（Be）、钒（V）、钴（Co）、镍（Ni）、镓（Ga）、硒（Se）、铷（Rb）、锶（Sr）、银（Ag）、铯（Cs）、铀（U）、铜（Cu）、砷（As）、镉（Cd）、汞（Hg）和铅（Pb）16种无机元素进行测定,并采用元素指纹图谱直观分析、元素主成分分析、偏最小二乘判别分析、聚类分析对元素含量差异性进行统计分析。结果 16种无机元素的线性关系良好（R>0.996）,回收率为87.4～113.0%。4种动物药中检测了16种无机元素含量,并绘制无机元素指纹图谱,发现其谱图具有一定的特征性,4种动物药中As、Cd和Pb残留量较高,有害无机元素的量超标应引起关注。通过主成分分析、偏最小二乘法判别分析、聚类分析,发现不同样品元素之间含量变异均能呈现出明显特征,并以此可区分不同种类的动物药。结论 通过无机元素在4种动物药中的组成分布及其量的变化规律研究,为动物药的质量控制及安全性评价提供依据,同时为动物药重金属形态价态研究提供基础参考。     

金银花中镉元素残留量测定能力验证研究

目的：评价参与能力验证实验室的镉元素残留量测定能力，提高残留检测质量水平。方法：根据CNAS相关文件要求，对制备的能力验证用金银花样品进行均匀性和稳定性检验，以参加实验室检测结果的中位值为指定值，采用实验室的检测结果与指定值的百分相对差（D）对能力验证结果进行统计分析，评价标准：|D|≤ 16%，评价结果为"满意"；|D|>16%，评价结果为"不满意"。结果：在252家参加实验室中，有249家实验室按要求提交有效数据，满意率为94.4%，不满意率为5.6%。结论：大多数参加实验室对标准的执行能力和质量保障体系均比较良好。根据收集到的信息，对于产生偏离的原因，从总体上对共性问题进行技术分析，并给出相关的技术建议，有助于提升参加实验室的检验能力。     

丹参多酚酸对照提取物的质量控制

目的:建立丹参多酚酸对照提取物多指标含量测定及指纹图谱的质量控制方法。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸-水溶液为流动相A,0.1%甲酸-乙腈溶液为流动相B,梯度洗脱(0~30 min,20%~21.5%B;30~35 min,21.5%~25%B;35~45 min,25%~40%B;45~50 min,40%~95%B),柱温30℃,流速1 mL·min^-1,检测波长288 nm;采用浓度法测定咖啡酸,丹酚酸E,迷迭香酸,紫草酸,丹酚酸B,丹酚酸Y的相对校正因子,并测定丹参多酚酸对照提取物各指标成分含量,与单体对照品外标法测定结果进行比较;同时建立指纹图谱方法,并对10批次提取物进行相似度评价。结果:咖啡酸,丹酚酸E,迷迭香酸,紫草酸,丹酚酸B,丹酚酸Y在各自的检测质量浓度范围内线性关系良好(r>0.9999),进样精密度RSD在0.1%~1.2%,重复性RSD在1.2%~1.6%,6种成分的加样回收率在82.03%~98.68%,样品溶液在36 h内各成分稳定性良好。经测定各指标成分的相对校正因子分别为咖啡酸(2.92),丹酚酸E(1.10),迷迭香酸(1.61),紫草酸(1.07),丹酚酸B(1.00),丹酚酸Y(0.83)。考察不同方法、浓度、仪器、色谱柱、波长等因素的影响,发现测得的相对校正因子适用性较好。校正因子法测定结果和单体对照品外标法测定结果差异较小。建立了丹参多酚酸对照提取物的HPLC特征指纹图谱,确定了5个共有特征峰,并根据对照品对色谱峰进行确认,10批次提取物指纹图谱相似度较高,质量差异较小。结论:该研究建立的多指标含量测定方法和指纹图谱方法简便、快速、准确性高、重复性好,可用于丹参多酚酸对照提取物的质量控制。     

金沙藤对照提取物的质量控制研究

目的 建立基于多指标含量测定及特征图谱的金沙藤Lygodii Herba对照提取物的质量控制方法。方法 采用Waterssymmetry shield^TM RP18（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈为流动相A、0.4%磷酸为流动相B,梯度洗脱（0～40 min：90%～75% B,40～45 min：75%～60% B,45 ～ 50 min ： 60%～ 10% B ）,柱温30℃,体积流量为1 mL·min^-1,检测波长为354 nm;测定3批次金沙藤对照提取物中咖啡酸、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷和紫云英苷的含量;建立特征图谱方法,并对3批次提取物特征峰进行指认;同时考察引湿性和水分含量。结果 咖啡酸、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷和紫云英苷各化合物在检测质量浓度范围内线性关系良好（r＞0.999 9）,进样精密度RSD在0.2%～0.3%,重复性RSD在0.4%～0.5%,4种成分的加样回收率在92.5%～101.0%,样品溶液中各成分在48 h内稳定性良好。3批次对照提取物中,咖啡酸质量分数为0.50%～0.64%,异槲皮苷质量分数为0.14%～0.21%,山柰酚-3-O-芸香糖苷质量分数为0.11%～0.36%,紫云英苷质量分数为0.66%～0.80%。通过建立的提取物HPLC特征图谱,确定了4个共有特征峰,并根据对照品对色谱峰进行确认,3批次提取物质量差异较小。金沙藤对照提取物水分含量为1.4%～2.3%,具引湿性。结论 建立的多指标含量测定方法和特征图谱方法简便、快速、准确性高、重复性好,可用于金沙藤对照提取物的质量控制。     

基于免疫亲和-高效液相色谱-柱后光化学衍生法的菊苣药材中黄曲霉毒素残留量研究

摘要：目的:首次分析菊苣药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的残留量,并对其安全性风险进行探讨,为菊苣药材质量评价提供数据支撑。方法:样品经匀浆处理后采用免疫亲和柱进行净化,以高效液相色谱-柱后光化学衍生法为检测方法,色谱柱为Venusil MP C18柱（150 mm×4.6 mm, 5μm）,以甲醇-乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,柱温为40℃,荧光检测器激发波长为360 nm,发射波长为450 nm。对收集的42批次菊苣地上部分及根进行分析,根据黄曲霉毒素的含量对其潜在的风险进行探讨。结果:黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2检测方法的线性关系、精密度、回收率及重复性均较好。由测定结果可看出,所有批次的菊苣药材不同药用部位中,仅1批次菊苣地上部分检出黄曲霉毒素B1和B2,其他批次药材均未检出,检出率为2.4%。参照中国药典2020年版黄曲霉毒素的限量标准,检出样品中黄曲霉毒素B1残留量超标,总量同样超过限度规定。结论:菊苣药材黄曲霉毒素整体检出率较低,潜在的安全性风险较小。     

五灵脂中重金属及砷形态、价态的研究和安全性评价

目的 研究五灵脂中重金属及有害元素和砷形态、价态，并对其安全性进行评价。方法 采用微波消解法结合电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法对五灵脂中铅（Pb）、镉（Cd）、砷（As）、汞（Hg）、铜（Cu）5种重金属及有害元素进行测定，参照现行《中国药典》2020年版植物药重金属及有害元素的限量标准、采用单项污染指数法对有害元素潜在的安全性风险进行评价；另外采用高效液相联用电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICP-MS）法对一甲基砷（MMA）、二甲基砷（DMA）、亚砷酸（AsⅢ）、砷酸（AsⅤ）、砷甜菜碱（AsB）、砷胆碱（AsC）6种砷形态、价态进行研究。结果 2种方法的线性关系、精密度、重复性、回收率均良好。五灵脂中5种重金属及有害元素的安全性较高。HPLC-ICP-MS结果表明，部分药材中检出微量的无机砷（AsⅢ和AsⅤ），结果相对安全可控。结论 为五灵脂重金属及有害元素限量标准制定提供了数据支持，同时有助于未来准确评价有害元素带来的安全性风险。     

冬虫夏草繁育品中重金属及有害元素分布特征研究及风险评估

目的：对冬虫夏草繁育品干品和鲜品中重金属及有害元素分布特征进行研究，以期为无公害冬虫夏草的繁育提供技术支持。方法：采用微波消解法对干品和鲜品样品进行有机破坏处理，以ICP-MS法为检测方法，对干品和鲜品共30批次的样品中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)5种重金属及有害元素进行测定，结合化学计量学对测定结果的含量特征进行分析；结合课题组前期建立的风险评估方法(HI或MOE法)从食用及药用两方面对分析结果进行风险评估。结果：分析过程中各元素在线性范围内线性关系良好，进样精密度RSD在0.34%～0.79%之间，各元素的回收率在93.0%～103.0%之间。30批次样品中，Cu、Cd全部检出，含量范围分别是2.1～8.98 mg·kg^-1和0.02～0.25 mg·kg^-1;As有26批检出，含量范围是0.10～0.48 mg·kg^-1;Pb有16批检出，含量范围是0.10～0.50 mg·kg^-1;Hg仅有4批检出，含量范围是0.02～0.05 mg·kg^-1