2020年赣州市白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性研究

目的 掌握赣州市白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗性水平,为合理使用杀虫剂提供依据.方法 采用世界卫生组织推荐接触筒法和浸渍法测定成蚊和幼虫的抗药性.结果 南康区和瑞金市白纹伊蚊成蚊对毒死蜱、杀螟硫磷、马拉硫磷、残杀威、噁虫威24h后死亡率均为100％,表现为敏感;对高效氟氯氰菊酯24h后死亡率分别为85.61％、93.33％,均表现为可疑抗性;对溴氰菊酯和0.08％高效氯氰菊酯24h后死亡率均低于80％,表现为抗性;另外,对氯菊酯和0.4％高效氯氰菊酯24h后死亡率,南康区白纹伊蚊分别为78.47％和69.01％,表现为抗性,而瑞金市白纹伊蚊分别为86.71％和96.00％,表现为可疑抗性.南康区和瑞金市白纹伊蚊幼虫对残杀威的LC50分别为0.4968mg/L和0.7890mg/L,抗性倍数分别为2.19倍和1.37倍,对双硫磷的LC50分别为0.0040mg/L和0.0030mg/L,抗性倍数分别为2.50倍和1.88倍,对两种药均表现为敏感.结论 赣州市两地白纹伊蚊成蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂均产生了不同程度的抗药性,应减少该类杀虫剂的使用,采取综合防治措施.     

室间隔缺损膜部瘤组织内细胞增殖和生存能力分析

目的:通过对室间隔缺损合并的膜部瘤组织内细胞的增殖和存活能力进行组织学分析,了解膜部瘤这一特殊组织的病理学特性?方法:采用HE染色对假性和真性膜部瘤组织进行组织结构分析,采用Ki67和磷酸化Akt(pAkt)免疫组织化学染色对膜部瘤组织细胞的增殖和存活能力进行分析?结果:HE染色表明假性膜部瘤组织内细胞数量显著多于真性膜部瘤,但细胞外基质较少,结构比较疏松?Ki67染色结果提示假性膜部瘤细胞增殖能力强于真性膜部瘤,而磷酸化的Akt表达仅见于假性膜部瘤组织内部分细胞,真性膜部瘤组织无表达?结论:假性膜部瘤组织具有较强的细胞增殖和存活能力,是一种处于活跃状态的组织?     

人SMOC1重组腺病毒载体的构建及其在主动脉瓣间质细胞中的表达

目的:利用AdEasyTM vector system构建携带人SMOC1基因的重组腺病毒表达载体,感染人主动脉瓣间质细胞(hAVICs)并检测外源性SMOC1在细胞中的表达和对细胞增殖的影响?方法:用PCR的方法扩增SMOC1 cDNA,将其克隆到pGEM-T Easy载体中并测序鉴定?经NotⅠ和XhoⅠ双酶切后接入pShuttle-CMV穿梭载体,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-CMV-SMOC1?将经PmeⅠ线性化的pShuttle-CMV穿梭载体与pAdEasyTM DNA电穿孔共转化BJ5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒pAdEasy-SMOC1,再将经PacⅠ线性化的重组病毒骨架质粒转染HEK293A包装细胞,包装并扩增重组腺病毒(Ad-SMOC1)?用Ad-SMOC1感染hAVICs,以Western blot法和免疫荧光染色法检测重组SMOC1在hAVICs中的表达与定位,用MTS法检测SMOC1对主动脉瓣间质细胞增殖的影响?结果:成功构建并包装表达SMOC1蛋白的重组腺病毒,该重组腺病毒在体外能有效感染hAVICs并高表达SMOC1蛋白,且其介导表达的SMOC1蛋白主要定位于hAVICs的胞浆和胞膜上,MTS分析表明重组SMOC1能够显著促进主动脉瓣间质细胞的增殖? 结论:成功地构建了携带人SMOC1基因的重组腺病毒,并证实SMOC1具有促进增殖的作用?本研究为进一步研究SMOC1在瓣膜间质细胞中的作用奠定了实验基础?     

PI16重组腺病毒表达载体的构建及其在人主动脉瓣间质细胞中的表达

目的构建携带人肽酶抑制蛋白16(PI16)基因的重组腺病毒表达载体,并研究其在人主动脉瓣间质细胞(hAVICs)中的表达。方法合成带有EcoRⅠ酶切位点的PI16引物,PCR扩增PI16基因,将目的基因克隆到穿梭载体pAV-MCMV-GFP-3FLAG中,PCR及测序鉴定穿梭质粒pAV-MCMV-PI16-GFP-3FLAG。将穿梭质粒与辅助质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK 293细胞,获取重组腺病毒Ad-MCMV-PI16-GFP-3FLAG。转染HEK 293细胞大量扩增后,采用CsCl梯度离心法纯化病毒,半数组织培养感染剂量(TCID50)法测定病毒滴度。用Ad-MCMV-PI16-GFP-3FLAG感染hAVICs,Western blot检测PI16在hAVICs中的表达。结果成功构建了表达PI16蛋白的重组腺病毒,滴度达到5.01×1010 TCID50/ml,转染hAVICs后能高效地表达PI16蛋白。结论成功构建携带人PI16基因的重组腺病毒,为进一步研究PI16基因的作用提供了基础。     

2020年赣州市白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性研究

目的 掌握赣州市白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗性水平,为合理使用杀虫剂提供依据.方法 采用世界卫生组织推荐接触筒法和浸渍法测定成蚊和幼虫的抗药性.结果 南康区和瑞金市白纹伊蚊成蚊对毒死蜱、杀螟硫磷、马拉硫磷、残杀威、噁虫威24h后死亡率均为100％,表现为敏感;对高效氟氯氰菊酯24h后死亡率分别为85.61％、93.33％,均表现为可疑抗性;对溴氰菊酯和0.08％高效氯氰菊酯24h后死亡率均低于80％,表现为抗性;另外,对氯菊酯和0.4％高效氯氰菊酯24h后死亡率,南康区白纹伊蚊分别为78.47％和69.01％,表现为抗性,而瑞金市白纹伊蚊分别为86.71％和96.00％,表现为可疑抗性.南康区和瑞金市白纹伊蚊幼虫对残杀威的LC50分别为0.4968mg/L和0.7890mg/L,抗性倍数分别为2.19倍和1.37倍,对双硫磷的LC50分别为0.0040mg/L和0.0030mg/L,抗性倍数分别为2.50倍和1.88倍,对两种药均表现为敏感.结论 赣州市两地白纹伊蚊成蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂均产生了不同程度的抗药性,应减少该类杀虫剂的使用,采取综合防治措施.