鲍曼不动杆菌耐药性快速检测方法的建立与评估

目的评估对实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)快速检测鲍曼不动杆菌耐药性方法的效果。方法设计鲍曼不动杆菌(ATCC 19606)外膜蛋白A特异性探针,采用实时荧光定量PCR准确测定63株鲍曼不动杆菌经一定浓度庆大霉素、米诺环素、美罗培南、左氧氟沙星和头孢哌酮/舒巴坦孵育后的生长情况,比较抗菌药物孵育0和6h后鲍曼不动杆菌基因组DNA量,判断鲍曼不动杆菌耐药性,并与微量肉汤稀释法结果进行对比。结果建立的实时荧光定量PCR检测鲍曼不动杆菌耐药性方法与微量肉汤稀释法一致性高,Kappa值为0.879,P0.05。以微量肉汤稀释法为参考方法,实时荧光定量PCR的符合率达93.97%,灵敏度为92.53%,特异性为95.74%,阳性预测值为96.41%,阴性预测值为91.22%,Youden指数为0.88。结论实时荧光定量PCR与微量肉汤稀释法结果有高度一致性,且前者灵敏度高、特异性强、检测速度快,可用于快速检测鲍曼不动杆菌的耐药性。     

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型研究

肺炎克雷伯菌是医院和社区感染的重要病原菌 ,产生超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ,对第三代头孢菌素产生耐药性。为了对我院产肺炎克雷伯菌的耐药情况和基因型特征进行调查 ,以便采取有效措施加以控制 ,我们对 1999年 8月～ 2 0 0 1年 12月临床分离的肺炎克雷伯菌 ,进行了耐药性和基因型研究。一、材料和方法1.菌株来源 :试验菌株全部为我院 1999年 8月～ 2 0 0 1年 12月从各类临床感染性标本中分离出来的肺炎克雷伯菌。2 .仪器 :生物梅里埃公司生产的VITEKAMS全自动微生物鉴定及药敏系统 ,美国BIO RAD公司产的基因扩增仪。3 .抗生素敏…     

肠道微生物对大脑和行为的影响

正人体肠道为微生物提供了良好的生存环境,成人肠道微生物的数量多达1012~1014个,不仅远远超过人体表皮微生物的数量,而且10倍于人体自身细胞数目,肠道微生物组中包含的基因数目大概是人体自身基因数目的100倍,因此许多研究者将人体肠道微生物群落看作是人体的一个"器官"或是人体的第二基因组。肠道微生物具有与宿主进行信息交流,消耗、贮藏和重新     

CRE耐药性分析及eCIM联合mCIM的临床应用

目的了解武汉大学人民医院碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)的临床感染特点和耐药性,探讨乙二胺四乙酸-碳青霉烯类失活法(eCIM)联合改良碳青霉烯类失活法(mCIM)的临床应用,为有效防控院内感染和合理使用抗菌药物提供依据。方法分析分离自不同类型临床样本的非重复CRE的药物敏感性试验数据。另随机选取80株亚胺培南和/或美罗培南敏感性降低[最小抑菌浓度(MIC)≥2μg/mL]的CRE,联合mCIM和eCIM判断其产金属β-内酰胺酶和丝氨酸碳青霉烯酶的情况。结果共检出329株CRE,以肺炎克雷伯菌为主(59.0%),分布科室广泛,其中重症医学科和神经外科分别占16.4%和16.1%,感染部位多见于呼吸道(39.2%)。CRE总体对米诺环素和替加环素耐药率较低,分别为25.1%和2.9%,对其他常用抗菌药物的耐药率均高于50.0%。随机选取的80株CRE中有57株产碳青霉烯酶,其中产金属β-内酰胺酶的CRE 28株。结论武汉大学人民医院CRE耐药形势严峻,应随时监测,并根据药物敏感性试验结果合理用药。eCIM联合mCIM检测成本低、操作简单,是一种经济、高效的表型筛选方法。     

大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶现状和基因型研究

目的调查临床分离大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶株的分布情况、基因型特征及耐药现状。方法收集临床分离大肠埃希菌，对头孢西丁耐药株以酶提取物改良三维试验筛选高产AmpC酶株；PCR和DNA测序分析质粒ampC基因型；碱裂解法提取质粒，并用质粒接合试验确证ampC基因是否位于可接合质粒上；最后用K—B法测定菌株对12种常用抗菌药物的敏感度。结果114株大肠埃希菌中共检出产质粒AmpC酶株10株（8．7％）。各质粒ampC基因型中EBC5株，DHA4株，CIT2株，EBC和DHA同时阳性1株。1株EBC阳性株和1株CIT阳性株测序证实为新的ampC基因型。10株菌均含有1个约54．2kb的大质粒，其中7株质粒接合试验阳性。产酶株对除头孢吡肟和亚胺培南外的大多数B内酰胺类抗生素高度耐药。结论大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶检出率已较高，并存在多种基因型，产酶株的多重耐药和交叉耐药现象十分严重，应高度重视产质粒介导AmpC酶细菌的监测与控制。     

多药耐药与泛耐药鲍氏不动杆菌的临床分布及耐药性研究

目的 探讨多药耐药与泛耐药鲍氏不动杆菌(ABA)的临床分布及耐药性特征,为临床抗感染治疗提供试验依据.方法 ABA分离、鉴定按照《全国临床检验操作规程》进行;药敏试验采用K-B法,依据CLSI最新折点判读结果.结果191株ABA在呼吸道标本中检出率占首位,达70.2％;ABA对临床常用抗菌药物均产生了非常严重的耐药性,对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为45.5％、44.5％,ABA泛耐药菌株检出率为15.2％.结论 应坚持动态监测ABA耐药性的变迁,控制ABA耐药性不断增长的不良趋势.     

胆道疾病患者胆汁病原菌谱与耐药监测

目的 了解胆道疾病患者胆汁中病原菌的分布和耐药情况,为临床提供病原学诊断和合理使用 抗菌药物的依据。方法 回顾性分析武汉大学人民医院2016年1月至2018年12月临床胆汁标本中分离的 病原菌,通过Phoenix-100全自动微生物鉴定药敏系统进行鉴定和药敏分析。结果 共分离出1 251株病原 菌,其中革兰氏阳性菌504株（40.29%）、革兰氏阴性菌685株（54.75%）、真菌 62株（4.96%）。前 6位病原菌 依次为大肠埃希菌、屎肠球菌、粪肠球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌,分别占19.90%、 16.55%、8.79%、8.31%、3.84%、3.52%。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检出 率分别为44.98%和18.27%。碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌的检出率为1.20%、 3.85%和6.82%。碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌检出率分别为63.64%和45.83%。结论 胆道感染以肠杆菌科细菌和肠球菌属细菌为主要病原菌。碳青霉烯类耐药的细菌应引起临床高度重视,根据药敏结果合理选用抗生素。     

产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的基因检测及耐药性研究

目的　研究本地区铜绿假单胞菌临床分离株中产金属 β -内酰胺酶流行株的主要基因型和耐药性。 方法　用纸片扩散法进行抗生素协同敏感试验 ,检测产金属 β -内酰胺酶的铜绿假单胞菌 ,用琼脂稀释法检测其最低抑菌浓度 (MIC) ,分别用金属酶IMP - 1,IMP - 2 ,VIM - 1和VIM - 2引物进行聚合酶链反应 (PCR)并对扩增产物进行序列分析。结果　在 82株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中 ,抗生素协同敏感试验阳性 7株 ,PCR检测金属 β -内酰胺酶阳性株也为这 7株 ,且基因型均为VIM - 2型。产酶株对亚胺培南、头孢噻肟、头孢他啶、哌拉西林 /他唑巴坦等常用抗铜绿假单胞菌 β -内酰胺类抗生素不敏感 ,对氨曲南较为敏感。结论　本地区铜绿假单胞菌所产金属 β-内酰胺酶为VIM - 2型 ,且产酶株耐药性强 ,应注意对其进行临床检测和监控。     

主动外排系统MexAB-OprM分离铜绿假单胞菌的分布和表达

铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa,Pa)属假单胞菌属,是一种常见的人兽共患病病原菌,也是医院获得性感染的重要条件致病菌之一,在院内感染病原菌检出率最高〔1〕。该菌耐药性强,耐药谱广,故治疗其所致感染可供选择的有效抗菌药物甚少。目前临床上使用的抗Pa较为有效的药物为碳青霉烯类抗生素。近年来随着碳青霉烯类抗生素在临床上广泛大量使用,Pa对其耐药率有上升趋势。这给治疗带来极大的困难,因此研究Pa对碳青霉烯类抗生素的耐药机制,可以帮助临床医师制定合理给药方案,减少耐药菌的产生。本实验探讨主动外排系统MexAB-OprM中外膜蛋…