瘦素促进低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞增殖及HIF-1α、NF-κB表达

目的研究瘦素对低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法分常氧、低氧2种状态体外培养大鼠ASMC,按随机数字表法将低氧组细胞分为低氧组、50μg/L瘦素联合低氧组(L50组)、100μg/L瘦素联合低氧组(L100组)、200μg/L瘦素联合低氧组(L200组)、200μg/L瘦素联合低氧和瘦素受体抗体组(ob-R抗体组)。各组均孵育24 h,CCK-8法检测细胞增殖率,反转录PCR检测HIF-1α、NF-κB的mRNA的表达,Western blot法检测HIF-1α、NF-κB的蛋白表达。结果与常氧组相比,各低氧组细胞增殖活性明显增强;与低氧组相比,L50、L100、L200组细胞增殖活性增强,并与浓度呈正相关(r=0.992);与L50、L100、L200组相比,ob-R抗体组细胞增殖明显降低。与常氧组相比,各低氧组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加;与低氧组相比,L50、L100、L200组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加,并与浓度呈正相关;与L50、L100、L200组相比,ob-R抗体组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达降低。结论瘦素能促进低氧状态下ASMC增殖,并且能够促进HIF-1α、NF-κB的表达。     

瘦素促进肺成纤维细胞向肌纤维母细胞的转分化

目的探讨瘦素对肺成纤维细胞向肌纤维母细胞转分化的影响及其作用机制。方法体外培养HFL-1人胚肺成纤维细胞,用(0~200)ng/m L重组人瘦素(r HL)干预或联合转化生长因子β1(TGF-β1)处理HFL-1细胞,Western blot法测定α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)的表达。CCK-8法测定细胞增殖,ELISA测定细胞上清液1型胶原蛋白含量。结果 (50、100、200)ng/m L的r HL处理HFL-1细胞48 h,α-SMA的蛋白表达水平均较对照组明显上调;与200 ng/m L r HL或5 ng/m L TGF-β1单独处理的细胞相比,200 ng/m L r HL和5 ng/m L TGF-β1联合处理HFL-1细胞48 h,HFL-1细胞α-SMA蛋白表达水平显著上调。r HL能够上调HFL-1细胞p-AKT的表达,LY294002可抑制r HL对HFL-1细胞α-SMA表达的诱导作用。与对照组相比,(12.5、25、50、100、200)ng/m L作用72 h,细胞存活率无显著性差异。(50~200)ng/m L r HL作用48 h,细胞上清液中1型胶原蛋白含量明显升高。结论瘦素能够促进肺成纤维细胞向肌纤维母细胞转分化,其作用机制与激活PI3K/AKT信号通路有关。     

糖皮质激素受体β在肥胖哮喘大鼠气道平滑肌中的表达

目的观察糖皮质激素受体β在肥胖哮喘大鼠气道平滑肌中的表达情况,探讨肥胖哮喘易发生激素抵抗的可能机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为正常体重组和肥胖组,正常体重组进一步分为正常体重对照组(A组)和正常体重哮喘组(B组),肥胖组进一步分为肥胖对照组(C组)和肥胖哮喘组(D组)。正常体重组大鼠给于基础饲料,肥胖组大鼠给于高能饲料,B、D两组鸡卵蛋白(OVA)多次腹腔注射和反复雾化激发以建立哮喘模型,A、C组以生理盐水代替OVA。末次激发后24h处死大鼠,体外原代培养大鼠ASMC,Western-blot法检测各组GRβ蛋白表达。结果 Western blot检测显示:B、C两组细胞GRβ蛋白表达量(分别为0.40±0.02,0.37±0.05)均较A组蛋白表达量(0.17±0.03)明显增加(均P<0.05),均较D组蛋白表达量(0.48±0.02)明显减弱(均P<0.05),而B、C两组蛋白表达量之间无明显差异(P>0.05)。结论肥胖哮喘大鼠较正常体重大鼠ASMCGRβ的表达明显升高,其可能是肥胖哮喘易发生激素抵抗的作用机制之一。     

总气道阻力与FEV_1在检测哮喘气道可逆性中的比较

目的目前国内常用的诊断哮喘的方法为呼吸量检查法,但是其存在一定缺点,比如哮喘或阻塞性肺疾病患者急性加重期时无法配合。而脉冲振荡肺功能测量法的优点就是不需要用力呼吸,平静呼吸下就可以测量。本研究通过对呼吸总阻抗等指标与FEV1相比较,对脉冲振荡肺功能进行了更详细的应用研究。方法入选2015年2月到12月我院呼吸内科急性哮喘发作成年患者120名,在用药前后同时进行呼吸量肺功能法和脉冲振荡肺功能法的测量,对两种不同方法测量结果的相关性进行比较,比较两种肺功能在检测哮喘患者用药前后改善率的敏感性。结果用药后FEV1有较大的幅度的升高,而脉冲振荡技术所得的R5敏感度明显优于FEV1(P0.05)。结论在检测哮喘患者用药前后的改善率方面,R5能够更为准确的反应哮喘患者的气道可逆性的改善率,且脉冲振荡肺功能操作简单,更适合支气管哮喘急性发作期的患者。     

阿奇霉素对大鼠气道平滑肌细胞瘦素和白介素-8、肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:观察大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)经哮喘致敏血清刺激后炎性细胞因子的表达变化并探讨阿奇霉素对哮喘的干预作用。方法:贴壁法体外培养大鼠ASMC。建立大鼠哮喘模型,采血收集致敏血清,以此血清刺激体外培养的ASMC,分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)、阿奇霉素组(C组),采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组上清中瘦素(LP)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western-blot法检测各组LP蛋白的表达;逆转录聚合酶链反应半定量(RT-PCR)法检测各组LPmRNA表达。结果:B组上清中LP、IL-8及TNF-α表达较A组增加(P<0.05),LP表达水平与炎性细胞因子的表达水平呈正相关(r=0.995,0.946,P<0.05);C组上清中LP的表达及ASMC中LP蛋白及mRNA的表达较B组明显下降(P<0.05)。结论:ASMC在致敏状态下LP的表达显著增强,参与哮喘发生过程;阿奇霉素可以部分抑制哮喘ASMC分泌炎性因子,提示阿奇霉素可能对哮喘起抗炎作用,为哮喘的防治提供新的观点。     

阿奇霉素抑制大鼠气道平滑肌增殖及PI3K的表达

目的 观察不同浓度阿奇霉素对于体外培养大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)的增殖以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达的影响,探讨大环内酯类药物抑制气道平滑肌增殖的途径.方法 将ASMC传代培养,取第4代细胞加入各种浓度的阿奇霉素刺激48 h,CCK-8法检测光密度(OD)值,计算ASMC的抑制率,免疫印记(Western-bl0t)法检测PI3K的蛋白含量.结果 3×10-6mol/L、6×10-6mol/L以及1×10-5mol/L阿奇霉素组细胞的OD值较正常对照组降低,PI3K蛋白表达减少,差异有显著性(P＜0.05),PI3K的表达与气道平滑肌细胞的抑制率呈线性负相关(P＜0.05).结论 阿奇霉素能够减少PI3K的表达,抑制大鼠气道平滑肌的增殖.     

痰热清注射液联合治疗支气管哮喘急性发作临床观察

目的观察痰热清注射液对支气管哮喘急性发作患者的临床疗效。方法将80例支气管哮喘急性发作患者随机分为两组，均予西医基础治疗，治疗组加用痰热清注射液静滴；两组疗程均为7d。结果两组疗效有差异。结论痰热清注射液治疗支气管哮喘急性发作患者疗效肯定。     

不同肥胖程度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者的临床特征研究

背景　肥胖是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）的常见危险因素,绝大多数OSAHS患者超重或肥胖,不同肥胖程度的OSAHS患者临床特征可能存在差异。目的　比较不同肥胖程度OSAHS患者的临床特征,进一步明确不同肥胖程度对OSAHS病情的影响。方法　选择自2014年1月-2018年9月在徐州医科大学睡眠医学中心经多导睡眠监测（PSG）检查确诊的OSAHS患者为研究对象,收集患者的临床资料包括一般人口学资料、临床合并症和主要睡眠参数等。参照中国人肥胖标准,根据体质指数（BMI）将OSAHS患者分为正常体质量（<24.0 kg/m2）、超重（24.0~27.9 kg/m2）和肥胖组（≥28.0 kg/m2）。比较三组患者的临床特点、合并症和主要睡眠参数的差异,并分析BMI与主要睡眠参数的相关性。结果　共纳入研究对象1 586例,男1 259例（79.38%）,有1 062例（66.96%）吸烟,平均BMI（28.20±4.19）kg/m2。高血压（44.89%,712/1 586）、脑血管疾病（20.62%,327/1 586）、心脏疾病（13.55%,215/1 586）是OSAHS的常见合并症。根据BMI将患者分为正常体质量组206例、超重组616例和肥胖组764例。 3组患者年龄、BMI、Epworth嗜睡量表（ESS）评分、合并高血压者占比、合并糖尿病者占比、合并心脏疾病者占比、合并脑血管疾病者占比、氧减饱和指数（ODI）、呼吸暂停低通气指数（AHI）、平均血氧饱和度（MSaO2）、最低血氧饱和度（LSaO2）及微觉醒指数比较,差异有统计学意义（P<0.05）。进一步两两比较可知：超重组患者MSaO2、LSaO2低于正常体质量组（P<0.05）,BMI、ODI、AHI及微觉醒指数高于正常体质量组（P<0.05）,合并脑血管疾病者占比高于正常体质量组（P<0.016 7）;肥胖组患者平均年龄小于正常体质量组（P<0.05）,合并脑血管疾病者占比高于正常体质量组（P<0.016 7）;肥胖组患者MSaO2、LSaO2低于正常体质量组和超重组（P<0.05）,BMI、ESS评分、ODI、AHI及微觉醒指数高于正常体质量组和超重组（P<0.05）,合并高血压、糖尿病、心脏疾病者占比高于正常体质量组和超重组（P<0.016 7）。Pearson相关分析显示,OSAHS患者BMI与AHI呈线性正相关（r=0.312,P<0.001）;与MSaO2和LSaO2呈线性负相关（r=-0.501和-0.566,P<0.001）。结论　OSAHS患者的BMI与AHI呈正相关,肥胖和超重患者病情重且合并症更多见,提示肥胖增加OSAHS的严重程度。     

瘦素对矽肺大鼠肺组织纤维化的影响及与HIF-1α的相关性分析

目的观察瘦素(LP)在矽肺模型大鼠肺组织的表达和对肺组织纤维化的影响以及与低氧诱导因子1α(HIF-1α)的相关性。方法 120只SD大鼠随机分为正常对照组、矽肺模型组、LP干预组(根据LP浓度分为LP5干预组、LP10干预组、LP20干预组)。对照组大鼠气管内灌注1 mL生理盐水,其余各组大鼠气管内灌注1 mL SiO2混悬液(40 mg/mL),从造模后1 d开始,LP5、LP10及LP20干预组分别给予5 ng/kg·d、10 ng/kg·d、20 ng/kg·d LP腹腔注射,第7天、14天、21天、28天各组分别处死6只大鼠。采用ELISA检测4个时间点各组大鼠肺组织LP的表达以及第28天羟脯氨酸含量。应用Western blot法测定矽肺模型组大鼠肺组织LP及HIF-1α蛋白表达。结果相同时期各组肺组织LP表达差异均有统计学意义(P0.05),矽肺模型组显著高于正常对照组,3个不同浓度LP干预组均高于矽肺模型组(P0.05)。第28天羟脯氨酸含量在正常对照组、矽肺模型组、LP5干预组、LP10干预组、LP20干预组分别为(0.89±0.16)mg/g、(3.14±0.40)mg/g、(3.78±0.27)mg/g、(4.35±0.13)mg/g、(4.87±0.16)mg/g,矽肺模型组LP表达较正常对照组明显增加(P0.05),LP干预组LP表达均显著高于矽肺模型组(P0.05)。各时间点模型组HIF-1α与LP的表达均呈正相关(r=0.88,0.79,0.86,0.85,P0.05)。结论 LP在矽肺模型大鼠肺组织表达增加,增加外源性LP,能增加矽肺大鼠肺组织胶原蛋白沉积,且LP与HIF-1α蛋白表达呈正相关。