人源抗TLR4抗体IgG的制备及其中和特性分析

目的:构建全人源抗人Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)抗体轻?重链表达载体,在293Free style 细胞中表达并纯化,分析该重组全分子抗体的生物学活性?方法:设计引物扩增全人源抗人TLR4抗体可变区编码序列,将其分别克隆到真核表达载体pFUSE-CHIg-hG1和pFUSE-CLIg-hl中,共转染至293Free style 细胞,表达产物用protein A亲和层析柱纯化?应用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)?Western blot?免疫共沉淀?质谱分析及蛋白芯片检测抗体的免疫学特性,并检测该抗体对人单核细胞淋巴瘤THP1细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α表达的影响?结果:成功构建全人源抗人TLR4抗体真核表达载体,获得的全分子抗TLR4抗体保持了与抗原的结合活性,对THP-1细胞TNF-α表达的抑制率可达85.7%?结论:重组全人源抗TLR4 IgG保持了与TLR4的结合特异性,并具有明显的中和作用,对炎症治疗具有潜在的应用价值?     

颅脑损伤后低血钾诊治分析

国内外许多学者注意到重型颅脑损伤患者易发生低血钾。为了解颅脑损伤患者的血钾情况及相应措施，笔者从2002年至2006年开展了颅脑损伤患者血生化、血气分析测定并进行分析，得出颅脑损伤伤情越重低血钾发生率越高的结论，发现低血钾后及时静脉补钾均能补至正常。     

寨卡病毒E蛋白及第三结构域的原核表达和多克隆抗体制备

目的 在大肠杆菌中克隆表达和纯化寨卡病毒(Zika Virus,ZIKV)包膜糖蛋白(Envelope Protein,E)及第三结构域(Envelope DomainⅢ,EDⅢ),并制备两种免疫原的鼠多克隆抗体。方法 通过Vero-E6细胞培养扩增ZIKV,提取病毒总RNA并反转录为cDNA,利用E和EDⅢ基因的cDNA序列构建原核表达载体pET32a/E和pET28a/EDⅢ,转入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni⁺柱亲和层析法纯化蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,采集抗血清,间接ELISA法测定效价,Western Blot检测特异性。结果 成功表达并纯化重组蛋白E和EDⅢ,获得的多克隆抗体效价均达到1:409 600,Western Blot检测多克隆抗体可特异性识别重组E蛋白和EDⅢ以及天然E蛋白。结论 成功制备出特异性抗寨卡病毒E蛋白和EDⅢ的鼠源多克隆抗体,为深入探索寨卡病毒致病机制、检测方法和免疫策略奠定了研究基础。     

SAV1在肿瘤中作用的研究进展

摘 要：SAV1是哺乳动物Hippo信号通路的核心激酶之一,主要参与调节细胞增殖与器官发育。近期研究发现,在众多肿瘤组织中SAV1均处于低表达或者缺失状态,SAV1敲除的小鼠模型更是能诱导出各种肿瘤的发生,表明SAV1的缺失与肿瘤的发生之间存在着直接或间接的分子机制。全文就近年有关SAV1在不同肿瘤中的研究进展进行系统综述,以期为发现新的肿瘤治疗靶点提供理论依据。     

外伤性硬膜下积液转化为慢性硬膜下血肿分析

随着影像学技术的发展和普及．头部外伤后硬膜下积液（TSE）逐步演变为慢性硬膜下血肿（CSDH）的报道越来越多，并逐渐已被人们所认识和重视。本院白1996年1月至2006年1月．收治TSE患者60例，发现10例演变为CS-DH。现报道如下。     

特发性结肠破裂7例诊治体会

作者自1984年10月～2004年6月共收治特发性结肠破裂7例,现分析报告如下.     

信阳地区推行《结核病防治细则》

河南省信阳地区近两年逐步建立和健全了基层防痨网,加强了机构建设和专业人员培训,推行了《结核病防治细则》,对病人实行目标管理,取得了较好的成效,具体做法是:(1)把查治病人的工作纳入目标管理,实行四定(定任务、定指标、定经费、定奖惩),逐级制定责任书,作为地、县、乡卫生行政部门年终考核的指标,(2)要求新登记病人必须做到六有(病历、病案卡、X 线片、痰片、身份证和治疗管理协议书),并经地区会诊审阅合格者.方可作为例数,(3)坚持“查出必治,治必彻底”的原则,要求全疗程结束后,规则用药率达     

CMRF35样分子对Toll样受体信号通路的影响及其机制的研究进展

Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)是人体天然免疫系统的主要参与者,TLR在免疫细胞中广泛表达,通过识别病原体相关分子模式(pathogen-associated molecule pattern,PAMP)来触发免疫应答,而对于TLR信号的调节机制的研究仍然是免疫学及其相关学科的热点领域。CMRF35样分子(CMRF-35-like molecules,CLMs)作为免疫细胞表面受体分子可能参与TLR信号的调节,其中CLM-1和CLM-8通过自身含有的免疫受体酪氨酸抑制基序触发对TLR信号的负向调控作用,而CLM-4通过与带有免疫受体酪氨酸活化基序的接头分子结合,促进TLR信号转导,调节免疫细胞对病原体的应答。对CLMs的深入研究将丰富人们对TLR信号调节分子机制的认识。     

重症颅脑损伤合并脊髓损伤40例临床诊治体会

目的研究重症颅脑损伤合并脊髓损伤患者的临床治疗方法。方法回顾性分析2006年1月至2012年1月采用外科手术治疗的40例重症颅脑损伤合并脊髓损伤患者（作为观察组）的临床资料,以同期颅脑损伤24h后诊断合并脊髓损伤的40例患者作为对照组,比较两组患者治疗效果。结果观察组患者住院时间、平均治疗费用和并发症发生率均明显低于对照组,经美国国立卫生院神经功能缺损评分（NIHSS）低于对照组,经日本矫形外科学会（JOA）评分高于对照组,差异均有统计学意义。观察组28d病死率低于对照组,但组间差异无统计学意义。观察组远期生活质量评估（KPS）高于对照组,差异有统计学意义。结论早期诊断并采取有效措施对患者进行及时治疗,可有效改善患者预后。