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类器官是一种来源于干细胞，在特定诱导条件下分化为与研究器官细胞组成类似的3D培养物。与传统细胞培养物相比，类器官更加接近研究器官的三维结构和特征，因此基于类器官进行研究更能体现所研究器官体内的真实反应。这一研究手段广泛应用于肿瘤药物筛选，具有广阔前景。文章目的是建立一种稳定的结肠类器官提取分离方法，使得到的类器官有良好的增殖活性；建立结肠类器官增殖活性评价方法，能够准确评价结肠类器官的增殖活性。采用方法为取大约5 cm C57BL/6小鼠的结肠，用胶原酶分离结肠隐窝，通过梯度离心纯化隐窝，最后将其用基质胶包埋接种在培养皿中，加入肠道类器官培养基培养6 d,最后使用光学显微镜拍照记录并量化类器官的出芽情况，通过qPCR检测干细胞标志物Lgr5的表达。结果显示提取得到的类器官较为纯净，通过光学显微镜可以记录类器官的出芽情况，计算平均每个类器官含有的隐窝数来量化类器官增殖活性，qPCR检测发现干细胞标志物Lgr5的表达与平均每个类器官含有的隐窝数变化一致，因此可以通过出芽情况和基因表达情况来表征类器官的增殖活性。文章建立的结肠类器官提取和分析方法可以用于研究在不同条件影响下结肠类器官的增殖变... 相似文献
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