缺氧诱导因子-2α对脂代谢的调节作用

缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）是一种在缺氧条件下广泛存在于NSL动物和人体内的氧敏感性转录因子,通过调节缺氧诱导基因表达参与组织细胞对低氧的适应性应答,其表达是机体适应低氧的关键环节和起始步骤。近年研究发现HIF-2a可能与脂代谢过程有密切联系。本文就HIF-2α对脂肪酸代谢和胆固醇代谢的调节作用作一综述。     

miR-195在食管癌中的表达及其对食管癌细胞株增殖的影响

目的:探讨microRNA-195 (miR-195) 在食管癌中的表达及其对食管鳞癌细胞Eca109增殖的影响?方法: 采用Taqman 探针实时定量PCR方法检测10对外科手术食管鳞癌标本miR-195的表达,用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-195类似物转染入Eca109细胞,Cell Counting Kit-8 (CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测蛋白表达水平?结果:与正常食管上皮相比,食管鳞癌组织miR-195表达明显降低(P < 0.05)?在48?72?96 h,miR-195转染组细胞吸光值明显低于对照组(P < 0.05),且miR-195转染组处于G0/G1期细胞的百分数明显高于对照组(P < 0.05)?Western blot结果显示miR-195转染组Cdc42蛋白水平明显低于对照组(P < 0.05)?结论:miR-195可阻滞Eca109细胞从G1期进入S期,抑制其增殖?     

生物样本库中血液样本microRNA和DNA的检测方法学探讨

目的探讨建立南京医科大学第一附属医院生物样本库中血液生物样本microRNA的检测方法以及血凝块中DNA的鉴定方法。方法随机选取本院生物样本库自2012-2014年存储的胃癌、肝癌血浆标本进行microRNA的提取,后经Q-PCR验证miR-21和miR-387的表达情况以及将对应的血凝块样本进行全血样本DNA的提取,通过全自动核酸分析仪鉴定提取的DNA的完整性。结果 Q-PCR结果表明,冻存血浆在保存了1、2、3年后都能检测到相关的microRNA的表达,同时血凝块中提取的DNA,经全自动核酸分析仪鉴定,DNA完整性也较好。结论该方法能够初步验证我院生物样本库中冻存的血样标本中的RNA和DNA的保存质量,血样质量基本能满足后续科研实验的需求。本研究中的血样标本质量鉴定的方法切实、可行,能较准确地反映生物样本库中血样本的质量,为今后我院组织样本的质量控制体系的建立奠定基础。     

miR-130b在食管鳞癌中的表达及对食管鳞癌细胞增殖和迁移的影响

目的:检测微小RNA-130b(miR-130b)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达并探讨其对ESCC细胞增殖、迁移的影响.方法:microRNA(miRNA)芯片筛选ESCC组织中异常表达的miRNAs,TaqMan MGB探针法定量PCR检测19例ESCC组织及配对癌旁组织标本中miR-130b的表达;通过脂质体转染模拟物miR-130b mimics(miR-130bm)促进ESCC细胞Eca109中miR-130b的表达,转染抑制物miR-130b inhibitor(miR-130bi)抑制Eca109细胞中miR-130b的表达;进一步采用CCK-8法和Transwell迁移实验检测ESCC细胞增殖、迁移的变化;生物学信息预测miR-130b的靶基因,双荧光素酶报告基因验证其靶向作用;采用SYBR Green定量PCR和Western blot检测靶基因mRNA和蛋白表达.结果:miR-130b在ESCC组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);转染miR-130bm可有效增加ESCC细胞Eca109中miR-130b的表达,进而促进Eca109细胞的增殖和迁移,平均迁移细胞数明显多于对照(112.9±2.4vs54.3±1.8,P<0.01);转染miR-130bi则降低细胞中miR-130b的表达;进而抑制细胞的增殖和迁移,平均迁移细胞数较对照明显减少(33.9±2.3vs56.2±1.9,P<0.01).miR-130b可作用于PTEN3’非翻译区抑制其表达.miR-130b可负向调控PTEN蛋白表达,并促进Akt磷酸化,但对PTENmRNA表达无明显影响.结论:miR-130b在ESCC组织中表达上调,增加其表达促进ESCC细胞Eca109增殖和迁移,降低其表达则抑制Eca109细胞增殖和迁移;miR-130b可在转录后水平负向调控PTEN的表达并促进Akt磷酸化.提示miR-130b有望成为ESCC治疗的新靶点.     

基于三维分析框架的医药科技成果转化政策研究

目的从政策研究层面为促进医药科技成果转化提供参考建议。方法作者结合医药科技成果转化特点,以政策工具为主线,引入创新价值链和创新主体链构建三维分析框架,即政策工具维度(供应面、环境面、需求面),创新价值链维度(研究开发、临床研究与示范应用、商业产业化)和创新主体链维度(高校院所、医疗机构、企业、政府、第三方机构)。针对2015年至2019年国家出台的70份医药卫生科技成果转化政策,使用三维框架进行文本量化分析。结果环境面和供应面政策工具使用存在过溢,需求面相对缺失;临床研究与示范应用是创新价值链维度的政策投入薄弱环节;创新主体链维度中的医疗机构和第三方机构政策频数较弱。结论根据三维框架分析结果结合行业特点,提出应增强医药特色,激发医院与院校活力,加大临床研究投入等政策完善建议。